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常规组织学可提供详尽的细胞信息，但只能呈现头颈组织三维（3D）结构的局部视图。本研究探讨了将组织光学透明化与光片荧光显微镜（LSFM）相结合，能否用于观察大型头颈标本的微观解剖结构，并将其体积特征与常规组织学联系起来。我们采用溶剂型方案对非肿瘤性人腭扁桃体、颈部淋巴结、舌和腮腺标本进行透明化处理，以小分子染料标记后使用 LSFM 成像，并以苏木精-伊红（H&E）组织学作为形态学参照。LSFM 显示了各组织的特征性结构，包括扁桃体中的淋巴滤泡和隐窝上皮、淋巴结中的皮质、副皮质和滤泡、舌中的上皮及固有肌纤维，以及腮腺中的小叶、导管和脂肪细胞。通过连续光学切片追踪结构，可观察其在较长距离上的连续性与分支情况，而这些信息无法从单张切片中获得。舌上皮测量结果与 H&E 相当；通过分割，还可对舌上皮和腮腺脂肪细胞等结构进行体积定量。因此，组织光学透明化与 LSFM 构成了一套可行的单一工作流程，可用于对人头颈部微观解剖结构开展体积成像研究。本研究数据建立了一个三维形态学参照，未来有望应用于癌症研究与分期、计算机图像分析和解剖学教学；相关方法仍需通过扩大供体队列和开展特异性标记进一步完善。
光片荧光显微镜成像观察光学透明化的人体头颈部器官：三维组织评估及组织学对照 | bioRxiv
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光片荧光显微镜成像观察光学透明化的人体头颈部器官：三维组织评估及组织学对照
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Lisa D.J. Schiffelers，
Mari F.C.M. van den Hout，
Ioana Gabor，
Albert Bitorina，
Elias Wieland，
Taisiya Ageeva，
Andreas Herrler，
Zohaib Salahuddin，
Francesco Missale，
Anna Schueth
DOI：
https://doi.org/10.64898/2026.10.30.763209
Lisa D.J. Schiffelers
1
马斯特里赫特大学（UM）遗传学与细胞生物学系，荷兰马斯特里赫特；
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Mari F.C.M. van den Hout
2
马斯特里赫特大学医学中心（MUMC+）病理学系，荷兰马斯特里赫特；
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Ioana Gabor
1
马斯特里赫特大学（UM）遗传学与细胞生物学系，荷兰马斯特里赫特；
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Albert Bitorina
1
马斯特里赫特大学（UM）遗传学与细胞生物学系，荷兰马斯特里赫特；
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Elias Wieland
2
马斯特里赫特大学医学中心病理学系】【。
中心（MUMC+），荷兰马斯特里赫特；
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Taisiya Ageeva
1
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Andreas Herrler
3
马斯特里赫特大学（UM）解剖学与胚胎学系，荷兰马斯特里赫特；
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Zohaib Salahuddin
4
马斯特里赫特大学（UM）精准医学系，荷兰马斯特里赫特；
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Francesco Missale
5
马斯特里赫特大学医学中心（MUMC+）耳鼻咽喉头颈外科，荷兰马斯特里赫特
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Anna Schueth
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常规组织学能够提供详细的细胞信息，但只能呈现头颈部组织三维（3D）组织结构的局部视图。我们研究了光学组织透明化结合光片荧光显微镜（LSFM）能否用于观察大型头颈部标本的微观解剖结构，并将体积特征与……相关联。
常规组织学。对非肿瘤性人腭扁桃体、颈淋巴结、舌和腮腺标本采用溶剂型透明化方案进行处理，以小分子染料标记，并通过光片荧光显微镜（LSFM）成像；同时以苏木精-伊红（H&E）组织学切片作为形态学参照。LSFM 显示了各组织的特征性结构，包括扁桃体中的淋巴滤泡和隐窝上皮、淋巴结中的皮质、副皮质和滤泡、舌中的上皮和固有肌纤维，以及腮腺中的小叶、导管和脂肪细胞。通过连续光学切片追踪结构，可揭示其在较长距离上的连续性和分支情况，这是单张切片无法提供的信息。舌上皮的测量结果与 H&E 相当，分割分析则可对舌上皮和腮腺脂肪细胞等结构进行体积定量。因此，组织透明化与 LSFM 构成了一套可行的工作流程，可用于对人类头颈部微观解剖进行体积研究。这些数据建立了三维形态学参照，未来有望应用于癌症研究与分期、计算机图像分析和解剖学教学；后续还需通过扩大供体队列并开展特异性标记研究，进一步完善该方法。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
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University Fund Limburg
CoBes2026-P-9
版权
本预印本的版权持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。
该预印本依据 CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可协议开放提供。
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发布于 2026 年 11 月 3 日。
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光学透明化人类头颈部器官的光片荧光显微成像：三维组织评估与组织学相关性
Lisa D.J. Schiffelers、Mari F.C.M. van den Hout、Ioana Gabor、Albert Bitorina、Elias Wieland、Taisiya Ageeva、Andreas Herrler、Zohaib Salahuddin、Francesco Missale、Anna Schueth
bioRxiv
2026.10.30.763209；
doi：https://doi.org/10.64898/2026.10.30.763209
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光学透明化人类头颈部器官的光片荧光显微成像：三维组织评估与组织学相关性
Lisa D.J. Schiffelers、Mari F.C.M. van den Hout、Ioana Gabor、Albert Bitorina、Elias Wieland、Taisiya Ageeva、Andreas Herrler、Zohaib Salahuddin、Francesco Missale、Anna Schueth
bioRxiv
2026.10.30.763209；
doi：https://doi.org/10.64898/2026.10.30.763209
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关键词：组织光学透明化 · 光片荧光显微成像 · 头颈部微观解剖 · 三维组织形态学 · 组织学对照 · 体积定量
原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.30.763209v1?rss=1