沙门氏菌入侵酰基载体蛋白中的硫酯-硫醇交换反应将结合于4′-磷酸泛酰巯基乙胺的酰基链转移至远端半胱氨酸|北京沫之东生物技术有限公司

2 次围观

摘要

鼠伤寒沙门氏菌编码两种功能不同的酰基载体蛋白：参与脂肪酸合成的 AcpP，以及侵袭相关酰基载体蛋白（IacP）。IacP 介导 SipB（沙门氏菌侵袭蛋白 B）的酰化；这一修饰对于 SipB 的成熟和细菌高效侵入宿主至关重要。尽管人们对这一过程的认识不断加深，但调控酰基链转移的 IacP 依赖性机制仍基本不为人知。因此，本研究采用结合生物化学与核磁共振（NMR）的多学科方法。通过酶促反应，将以脱辅基形式表达的 D35N IacP 突变体（IacPᴺ）转化为酰基-IacPᴺ中间体。出乎意料的是，酰基-IacPᴺ中间体的¹H-¹⁵N HSQC 谱中，若干酰胺呈现两组共振信号。第一组峰强度较低，位置靠近全酶型峰；随着酰基链长度增加，其化学位移逐渐改变，这一特征令人联想到 II 型 ACP 中与 4-磷酸泛酰巯基乙胺（4-PP）结合的构象。第二组峰强度较高，其特征此前未有报道，且与酰基链长度无关；这组峰聚集在较长酰基链（C14–）的 4-PP 结合型构象附近。为探究这一新构象的来源，我们构建了三个半胱氨酸替换为丙氨酸的突变体：C16A、C54A 和 C69A IacPᴺ。C54A IacPᴺ突变体的酰基-IacPᴺ中间体仅显示一组峰，对应于 4-PP 结合型 IacPᴺ构象；这证实了 Cys 54 在产生此前未表征峰信号中的关键作用，并表明该峰对应于半胱氨酸结合型构象。酰基-S-羧酰胺甲基化 IacPᴺ中间体同样仅显示一种构象，进一步支持半胱氨酸是产生这一新峰的原因。综上，我们的研究揭示了一种独特的硫酯-硫醇交换反应，其中……与4PP相连的酰基链被化学转移至远端半胱氨酸（Cys 54）。鉴于Cys 54位于IacP的SipB相互作用界面内，这一酰基链接力过程可能有助于IacP介导的SipB酰化及沙门氏菌毒力。

沙门氏菌侵袭酰基载体蛋白中的硫酯–硫醇交换反应将结合于4PP的酰基链转移至远端半胱氨酸 | bioRxiv

跳转至主要内容

首页

关于

投稿

提醒 / RSS

搜索此关键词

高级搜索

最新结果

沙门氏菌侵袭酰基载体蛋白中的硫酯–硫醇交换反应将结合于4PP的酰基链转移至远端半胱氨酸

Rashima Prem、Garima Garima、Debodyuti Sadhukhan、Monica Sundd

doi：

https://doi.org/10.64898/2026.10.23.761286

Rashima Prem¹

印度新德里，国家免疫学研究所；

在 Google Scholar 上查找此作者

在 PubMed 上查找此作者

在本站搜索此作者

Garima Garima¹

印度新德里，国家免疫学研究所；

在 Google Scholar 上查找此作者

在 PubMed 上查找此作者

在本站搜索此作者

Debodyuti Sadhukhan¹

印度新德里，国家免疫学研究所；

在 Google Scholar 上查找此作者

在 PubMed 上查找此作者

在本站搜索此作者

Monica Sundd²

国家免疫学研究所

在 Google Scholar 上查找此作者

在 PubMed 上查找此作者

在本站搜索此作者

通讯作者：

monicasundd{at}nii.ac.in

摘要

信息/历史

指标

补充材料

预览 PDF

摘要

鼠伤寒沙门氏菌编码两种功能不同的酰基载体蛋白：参与脂肪酸合成的AcpP，以及介导SipB（沙门氏菌侵袭蛋白B）酰化的侵袭酰基载体蛋白（IacP）。这一修饰对于SipB成熟和高效侵入宿主至关重要。尽管相关认识日益深入，IacP依赖的酰基链转移机制在很大程度上仍未明了。因此，本研究采用结合生物化学与核磁共振（NMR）的多学科研究方法。一个D35N IacP突变体】【。

以脱辅基形式表达的 IacPN 经酶促转化生成了酰基-IacPN 中间体。出乎意料的是，酰基-IacPN 中间体的 ^1H-^15N HSQC 谱中，若干酰胺的共振信号呈现两组峰。第一组峰强度较弱，位置接近全辅基型峰；随着酰基链长度增加，其化学位移逐渐变化，这与 II 型酰基载体蛋白（ACP）的 4′-磷酸泛酰巯基乙胺（4-PP）结合构象相似。第二组峰强度较高，其化学位移不受酰基链长度影响，此前尚未被表征，并聚集在较长酰基链（C14−）的 4-PP 结合构象附近。为探究这一新构象的来源，我们构建了三个半胱氨酸突变为丙氨酸的突变体：C16A、C54A 和 C69A IacPN。C54A IacPN 突变体的酰基-IacPN 中间体中仅呈现一组峰，对应于 4-PP 结合型 IacPN 构象。这一结果确立了 Cys 54 在产生此前未表征峰中的关键作用，并表明该峰对应于半胱氨酸结合构象。酰基-S-羧酰胺甲基-IacPN 中间体同样仅呈现一种构象，进一步支持半胱氨酸参与形成这一新峰。综上，我们的研究揭示了一种独特的硫酯-硫醇交换反应，其中与 4-PP 相连的酰基链经化学转移，连接至远端半胱氨酸（Cys 54）。鉴于 Cys 54 位于 IacP 与 SipB 的相互作用界面内，这一酰基链传递过程可能有助于 IacP 介导的 SipB 酰化及沙门氏菌毒力。

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突。

版权

本预印本的版权持有者为作者/资助方；其已授予 bioRxiv 许可，允许其展示本预印本。

返回顶部

发布于 2026年10月26日。

下载 PDF

补充材料

电子邮件

感谢您有意帮助传播 bioRxiv 上的内容。

注意：要求提供您的电子邮件地址，仅用于确认您是本文的发送者。

您的电子邮件地址

您的姓名

发送至

请在不同的行中输入多个地址，或用逗号分隔。

您将向以下对象发送电子邮件

《沙门氏菌侵袭酰基载体蛋白中的硫酯-硫醇交换反应将 4PP 结合的酰基链转移至远端半胱氨酸》

邮件主题

（您的姓名）转发了 bioRxiv 上的一个页面给您

邮件正文

（您的姓名）认为您可能想查看 bioRxiv 网站上的这个页面。

您的个人留言

验证码

此问题用于确认您是否为人类访客，并防止自动垃圾信息提交。

《沙门氏菌侵袭酰基载体蛋白中的硫酯-硫醇交换反应将 4PP 结合的酰基链转移至远端半胱氨酸》

Rashima

Prem

，

Garima

，

Debodyuti

Sadhukhan

，

Monica

Sundd

bioRxiv

2026.10.23.761286；

doi：

https://doi.org/10.64898/2026.10.23.761286

分享本文：

复制

引文工具

《沙门氏菌侵袭酰基载体蛋白中的硫酯-硫醇交换反应将 4PP 结合的酰基链转移至远端半胱氨酸》

Rashima

Prem

，

Garima

，

Debodyuti

Sadhukhan

，

Monica

Sundd

bioRxiv

2026.10.23.761286；

doi：

https://doi.org/10.64898/2026.10.23.761286

引文管理器格式

BibTeX

Bookends

EasyBib

EndNote（标记格式）

EndNote 8（xml）

Medlars

Mendeley

Papers

RefWorks Tagged

Ref Manager

RIS

Zotero

推文组件

Facebook 点赞

Google Plus +1

学科领域

所有文章

动物行为与认知

（8164）

生物化学

（19027）

生物工程

（15171）

生物信息学

（45391）

生物物理学

（22958）

癌症生物学

（20125）

细胞

生物学

（27321）

临床试验

（138）

发育生物学

（14154）

生态学

（21406）

流行病学

（2067）

进化生物学

（25818）

遗传学

（16354）

基因组学

（23857）

免疫学

（19040）

微生物学

（43217）

分子生物学

（18352）

神经科学

（95185）

古生物学

（714）

病理学

（3038）

药理学与毒理学

（5205）

生理学

（8289）

植物生物学

（16275）

科学传播与教育

（2116）

合成生物学

（4648）

系统生物学

（10393）

动物学

（2428）

关键词：沙门氏菌 · 酰基载体蛋白 · 硫酯-硫醇交换 · 核磁共振 · 细菌毒力

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.23.761286v1?rss=1

来源出处

沙门氏菌入侵酰基载体蛋白中的硫酯-硫醇交换反应将结合于4′-磷酸泛酰巯基乙胺的酰基链转移至远端半胱氨酸 https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.23.761286v1?rss=1