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特定的 tRNA 基因突变可导致误译，即翻译过程中掺入与 mRNA 编码不匹配的氨基酸。误译的影响千差万别，取决于误译类型及多种情境因素。研究突变 tRNA 引发的误译，一个关键环节是可靠地检测误译事件。虽然通常采用质谱法确认并定量误译，但也有研究者设计了利用荧光信号检测误译的方法。在此，我们成功调整了该方法，使其适用于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）——一种当前广泛用于误译研究的模式生物。我们证明，通过显微镜观察和荧光酶标仪测量，均可检测到误译引起的荧光恢复；且荧光强度会随所检测的误译类型而变化。有趣的是，荧光恢复法测得的误译量与标准质谱法的测量结果不同，这可能是因为该方法捕捉到了含有误译错误的蛋白质在不同时间点的情况。因此，该工具在酵母模型中检测突变 tRNA 是否引发误译方面具有较高的应用价值，但其对误译频率的定量能力仍需进一步研究。
荧光救援报告系统的改造：用于酿酒酵母中的错译研究 | bioRxiv
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荧光救援报告系统的改造：用于酿酒酵母中的错译研究
Brendan S Charles，
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Amanda J Moehring
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https://doi.org/10.64898/2026.10.20.760511
Brendan S Charles
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tRNA 基因中的特定突变可导致错译——即翻译过程中掺入与 mRNA 编码不匹配的氨基酸。错译的影响差异极大，取决于错译的形式及多种情境因素。研究突变 tRNA 所致错译的一个关键环节，是可靠地检测错译事件。虽然通常通过质谱分析来确认并定量错译，但也有研究者设计出利用荧光信号检测错译的方法。在此，我们成功改造了这一方法，使其适用于酿酒酵母这一模式生物；目前大量错译研究正在该生物中开展。我们证明，利用显微镜和荧光酶标仪测量均可检测到错译荧光救援信号，且荧光强度会随所评估的错译形式而变化。有趣的是，错译的数量
通过荧光恢复测得的结果与标准质谱方法的测量结果不同，这可能是因为该方法捕捉到的是含有误译错误的蛋白质在不同时间点的状态。因此，该工具在酵母模型中检测突变型 tRNA 误译是否存在方面具有很高的实用价值，但其对误译频率的定量能力仍需进一步研究。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
基金信息
自然科学与工程研究委员会，
版权
本预印本的版权归作者／资助方所有；作者／资助方已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。
该文依据 CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可协议提供。
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发布于 2026 年 10 月 21 日。
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用于酿酒酵母的误译荧光恢复报告系统改造
Brendan S Charles，
Amanda J Moehring
bioRxiv
2026.10.20.760511；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.10.20.760511
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将错译荧光救援报告系统改造用于酿酒酵母
Brendan S Charles，Amanda J Moehring
bioRxiv
2026.10.20.760511
doi：https://doi.org/10.64898/2026.10.20.760511
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关键词：翻译错误 · 突变tRNA · 荧光报告系统 · 酿酒酵母 · 误译检测
原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.20.760511v1?rss=1