重新评估组蛋白H3尾部对KRAB-DNMT3L介导的表观遗传沉默的贡献

内容形式：摘要译文

Neumann等人提出了CHARM，这是一种紧凑型表观遗传沉默工具，其中组蛋白H3尾部与DNMT3L融合，据称可募集并激活内源性DNMT3A，从而在不融合DNMT3A催化结构域的情况下实现持久的基因抑制。在本研究中，我们在独立的报告基因系统和内源基因背景下评估了H3尾部的作用。在SNRPN报告基因系统中，缺失H3尾部的KRAB-DNMT3L-dCas9构建体表现出与CRISPRcharm Kv2相当的沉默动力学；将CRISPRcharm Kv2中的关键H3K4残基突变为丙氨酸，也未削弱其沉默效果。类似地，向HEK293T细胞瞬时导入编辑器mRNA后，CRISPRcharm Kv2在三个内源位点上并未始终优于相应的不含H3尾部的构建体；将CRISPRcharm Kv2中的关键H3K4残基突变为丙氨酸，也未削弱其活性。这些观察结果表明，在所测试的条件下，工程化H3尾部在KRAB-DNMT3L-dCas9架构中并未带来普遍的功能优势。

关键词：表观遗传沉默 · CRISPR/dCas9 · DNMT3L · 组蛋白H3尾部 · DNA甲基化

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.24.753995v1?rss=1