卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV；人疱疹病毒8型）是一种致癌性γ疱疹病毒，可引发卡波西肉瘤及多种淋巴增殖性疾病。KSHV开放阅读框（ORF）16编码病毒Bcl-2（vBcl-2），后者可抑制细胞凋亡和自噬。vBcl-2对于高效裂解性复制及感染性子代病毒的产生至关重要；然而，这一必需作用独立于其已知的调控细胞死亡功能。为鉴定可能有助于vBcl-2发挥功能的宿主因子，我们对裂解性再激活的KSHV感染细胞中HA-vBcl-2免疫沉淀物进行了蛋白质组学分析。该分析鉴定出BTB-Kelch蛋白KLHL9，它是Cullin 3-RING连接酶（CRL3）复合物的底物特异性衔接蛋白，也是候选的vBcl-2相关因子。我们通过对感染细胞进行双向免疫共沉淀，以及在未感染细胞中异位表达，验证了vBcl-2与KLHL9之间的相互作用。裂解性再激活期间，KLHL9从以细胞质/核周分布为主的模式重新定位至线粒体，其分布与HA-vBcl-2重叠。丙氨酸扫描突变分析将KLHL9相互作用决定簇定位于vBcl-2的N端区域；无法结合KLHL9的vBcl-2突变体也未能与KLHL9共定位。相反，KLHL9缺失分析表明，其C端Kelch重复区域对于与vBcl-2有效结合至关重要。AlphaFold建模结果支持这些界面区域。然而，未检测到vBcl-2发生KLHL9依赖性泛素化，提示其不太可能是含KLHL9复合物的底物。在功能方面，CRISPR/Cas9介导的KLHL9敲除降低了裂解性病毒蛋白的积累及感染性子代病毒的产生，而重新表达对sgRNA具有抗性的KLHL9则部分恢复了……恢复了这些表型。综上，这些发现表明，在生产性感染期间，vBcl-2可能与宿主CRL3复合物相互作用，并揭示KLHL9是一种与vBcl-2相关、支持KSHV高效裂解复制的宿主因子。
saridr{at}mail.biu.ac.il
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卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV；人疱疹病毒8型）是一种致癌性γ疱疹病毒，可引起卡波西肉瘤及多种淋巴增殖性疾病。KSHV开放阅读框（ORF）16编码病毒Bcl-2（vBcl-2），该蛋白可抑制细胞凋亡和自噬。vBcl-2是高效裂解复制及感染性子代病毒产生所必需的；然而，这一关键作用独立于其已知的细胞死亡调控功能。为鉴定可能参与vBcl-2功能的宿主因子，我们对裂解性再激活的KSHV感染细胞中免疫沉淀获得的HA-vBcl-2复合物进行了蛋白质组学分析。分析发现，BTB-Kelch蛋白KLHL9是Cullin 3-RING连接酶（CRL3）复合物中底物特异性接头蛋白，也是候选的vBcl-2相关因子。我们通过对感染细胞进行双向共免疫沉淀，以及在未感染细胞中异位表达，验证了vBcl-2与KLHL9之间的关联。裂解性再激活期间，KLHL9从主要分布于细胞质/核周区域重新定位至线粒体，并与HA-vBcl-2呈现重叠分布。丙氨酸扫描突变分析将KLHL9相互作用决定区定位于vBcl-2的N端区域；不能结合KLHL9的vBcl-2突变体也无法与KLHL9共定位。相反，对KLHL9进行缺失分析表明，其C端Kelch重复区域对于与vBcl-2有效结合至关重要。AlphaFold建模结果支持上述界面区域。然而，未检测到vBcl-2发生依赖KLHL9的泛素化，这表明它不太可能是含KLHL9复合物的底物。在功能层面，CRISPR/Cas9介导的KLHL9破坏降低了裂解期病毒蛋白的积累以及感染性……
子代病毒的产生，而对sgRNA耐受的KLHL9重新表达部分恢复了这些表型。综合来看，这些发现表明，vBcl-2可能在产性感染期间招募宿主CRL3复合物，并鉴定出KLHL9是一种与vBcl-2相关、支持KSHV高效裂解复制的宿主因子。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
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发布于2026年8月13日。
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KLHL9作为与KSHV vBcl-2相互作用的宿主因子支持裂解复制
Inna
Kalt
，
Sapir
Ohev
，
Anastasia
Gelgor Dontsov
，
Coral Orel
Haddad
，
Itay
Koren
，
Rotem
Fuchs
，
Tzachi
Hagai
，
Ronit
Sarid
bioRxiv
2026.08.13.744635；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.08.13.744635
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关键词：卡波西肉瘤相关疱疹病毒 · KLHL9 · 病毒-宿主互作 · 裂解复制 · vBcl-2
原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.13.744635v1?rss=1