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多梳组（Polycomb group，PcG）蛋白是一类在进化上保守的表观遗传调控因子，能够在发育过程中维持转录状态，其调控失常常见于疾病中。本研究利用 CRISPR/Cas9 介导的基因组工程，在黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）中构建了一套全面的内源性 HA 标签等位基因资源，涵盖多梳抑制复合物 1（Polycomb Repressive Complex 1，PRC1）的核心组分及其他染色质调控因子。我们证实，内源性 HA 标签的引入不影响蛋白质表达、染色质定位及全基因组结合谱，从而能够使用同一种抗体对不同 PcG 亚基进行直接比较分析。蛋白质组学分析检出了经典与非经典 PRC1 复合物以及 PRC2 复合物的已知组分，并鉴定出其他 PcG 相关因子。值得注意的是，核孔复合物（nuclear pore complex，NPC）的多个组分被鉴定为 PcG 的相互作用因子，且遗传学分析证实了二者之间的功能性相互作用。该资源为多梳功能与染色质调控的标准化分析提供了一个平台，可便捷地扩展至其他染色质调控复合物，并应用于不同发育阶段。
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多梳组（Polycomb group，PcG）蛋白是一类在进化上保守的表观遗传调控因子，能够在发育过程中维持转录状态，其调控在疾病中常发生异常。本研究利用 CRISPR/Cas9 介导的基因组工程技术，在黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）中构建了一套全面的内源性 HA 标签等位基因资源，涵盖多梳抑制复合物 1（Polycomb Repressive Complex 1，PRC1）的核心组分及其他染色质调控因子。我们证明，内源性 HA 标签可保留蛋白质的表达、染色质定位及全基因组结合谱，从而能够使用同一种抗体分析不同的 PcG 亚基并进行直接比较。蛋白质组学分析鉴定到了经典及非经典 PRC1 和 PRC2 复合物的已知组分，并发现了其他 PcG 相关因子。值得注意的是，核孔复合物（nuclear pore complex，NPC）的多个组分被鉴定为 PcG 的相互作用因子，遗传学分析进一步证实了二者之间的功能性相互作用。该资源为多梳蛋白功能和染色质调控的标准化分析提供了一个平台，可轻松扩展至其他染色质调控复合物，并应用于不同发育阶段。
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Schuttengruber
bioRxiv
2026.07.27.741006;
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https://doi.org/10.64898/2026.07.27.741006
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bioRxiv
2026.07.27.741006;
doi:
https://doi.org/10.64898/2026.07.27.741006
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关键词：多梳抑制复合物1 · 内源性HA标签 · 染色质图谱 · 相互作用蛋白质组学 · 黑腹果蝇 · 表观遗传调控
原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.27.741006v1?rss=1