原生单转录本 TnpB 架构实现高效的病毒诱导基因组编辑，并可视化筛选携带表型沉默编辑的可遗传后代

内容形式：摘要译文

TnpB 是超紧凑型 RNA 引导核酸酶，但大多数已报道系统都需要分别表达核酸酶及其配套的 reRNA，这削弱了其尺寸优势，并限制了其在植物中的病毒载体递送。在此，我们证明，ISDra2 TnpB 利用其天然的重叠结构——reRNA 序列位于 TnpB 的 3′ 编码区内——并通过加工自身 mRNA 生成具有功能的 reRNA，从而能够在植物中通过单一转录本实现基因组编辑。编码序列下游仅需一个保守的 7 bp 基序及其后的 16–20 bp 间隔序列，即可实现编辑，无需外源核酶或独立的引导 RNA 启动子。这种超紧凑设计使编辑系统与 NbPDS 沉默模块能够同时装载于单一 TRV 载体中，从而在本氏烟草（Nicotiana benthamiana）的系统性组织中实现高效编辑，并建立了 VIGE–VIGS 双重策略：利用不同的白化表型，直接目视筛选可遗传且不含转基因的编辑后代；即使靶标本身没有明显可见性状，也能减少繁琐的大规模基因分型工作。

关键词：TnpB核酸酶 · 单转录本架构 · 病毒诱导基因组编辑 · 植物基因编辑 · 可遗传无转基因编辑 · 表型筛选

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.09.750255v1?rss=1