改进的蛋白质半合成技术使得能够开展硫代酰胺对β-折叠相互作用去稳定作用的生物物理学研究

内容形式：摘要译文

硫代酰胺是肽骨架的天然翻译后修饰，也可以通过合成引入，用于探究蛋白质折叠，或对肽进行功能化以满足转化应用需求。在本研究中，我们证明，采用 Knorr 吡唑活化可以高效制备含硫代酰胺且 C 端带有硫酯的肽，并将其用于后续的天然化学连接反应，以生成含硫代酰胺的蛋白质。我们将该方法与酰基叠氮活化进行了比较，发现两种途径可获得相近的产率。我们还研究了超声介导的连接位点半胱氨酸脱硫，以探索其相较于化学自由基引发剂的潜在优势。扩大合成规模使我们能够研究硫代酰胺对蛋白 G 的 B1 结构域（GB1）中 β-折叠区域的扰动，以及对帕金森病蛋白 α-突触核蛋白淀粉样纤维中 β-链相互作用的影响。在这两种情况下，我们都观察到 β-折叠网络发生显著失稳，具体表现为 GB1 热稳定性降低，以及 α-突触核蛋白折叠改变和聚集速率减慢。这些发现表明，单个原子的替换能够对协同氢键网络产生重大影响，并促使人们对这两个体系开展进一步研究。

关键词：蛋白质半合成 · 硫代酰胺 · β-折叠稳定性 · 天然化学连接 · 蛋白质聚集 · α-突触核蛋白

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.30.741859v1?rss=1