米曲霉菌丝分散疏水蛋白缺失菌株的重组蛋白产量提升及发酵放大

内容形式：摘要译文

在米曲霉等丝状真菌的液体发酵过程中，发酵液黏度升高以及生物量附着于生物反应器表面，仍是亟待解决的主要问题。我们此前构建了一种菌丝分散突变株，该菌株缺失两种菌丝黏附因子，即细胞壁β-1,3-葡聚糖（AG）和生物膜半乳糖氨基半乳聚糖（GAG）（AGΔ-GAGΔ菌株）。AGΔ-GAGΔ菌株的培养液黏度较低，有利于改善混合效果并提高酶产量。然而，菌丝仍会大量附着于生物反应器壁及下游设备表面，造成混合效果变差并降低产物回收率。疏水蛋白RolA是米曲霉的一种表面活性蛋白，能在分生孢子和菌丝表面形成致密包被，并促使细胞表面呈疏水性。本研究在AGΔ-GAGΔ菌株中敲除rolA基因（AGΔ-GAGΔ-ΔrolA菌株），并评估该基因敲除对菌丝在培养容器壁上的黏附、酶产量及生物反应器性能的影响。在摇瓶培养中，该菌株对玻璃表面的黏附显著减少，重组酶活性提高了10%。发酵结束时培养物回收率的改善进一步提高了酶总产量。在实验室规模的搅拌釜式生物反应器中，菌体生长和酶产量均有所提高。放大至200 L生物反应器后，搅拌功耗降低，水动力学性能得到改善。AGΔ-GAGΔ-ΔrolA菌株成功放大至3000 L生物反应器；计算流体动力学分析证实，各生物反应器中的酶活性保持稳定，流动循环性能得到改善。总体而言，AGΔ-GAGΔ-ΔrolA菌株的酶产量和放大适用性均有所提升，为其……提供了支持。

工业应用适用性

关键词：米曲霉 · 菌丝分散 · 疏水蛋白RolA · 重组蛋白生产 · 发酵放大 · 生物反应器

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.06.739278v1?rss=1