- 3 次围观
摘要 通过抗体募集内吞受体，为将细胞外细胞因子重定向至细胞内提供了一种途径。本研究开发了类 IgG 双特异性抗体 BiAb J31，将 TNF 识别与去唾液酸糖蛋白受体 1（ASGPR1）的膜近端区域连接起来。我们通过使用工程化 ASGPR1 胞外结构域进行免疫，随后以野生型 ASGPR1 和 HepG2 细胞进行筛选，分离获得 J31。采用“凸起-空腔”策略和 CrossMab 工程化方法，将其可变结构域与未经修饰的阿达木单抗可变区组合，并引入 L234A/L235A/P329G Fc 突变。BiAb J31 保留了与 HepG2 细胞的结合能力，并在桥接实验中同时结合两种抗原。连续结合实验表明，BiAb J31 处理的细胞可募集 TNF。活细胞成像显示，含荧光标记抗体的复合物被摄取，并与 LysoTracker 阳性区室共定位。在含有 BiAb J31、TNF 和 PE 偶联检测抗体的 HepG2 细胞培养体系中，90 分钟内上清液的 PE 荧光降低约 60%。截短实验和合成肽实验将 J31 的识别区域定位于 ASGPR1 的第 62～100 位残基，位于糖类识别结构域之外；AlphaFold 3 建模则提出了一个 Fv-肽界面。这些发现鉴定出一种靶向 ASGPR1 膜近端区域的抗体，该抗体适用于双特异性工程化，并可支持含 TNF 复合物的细胞募集与摄取。BiAb J31 为基于抗体的细胞因子重定向策略提供了一个分子起点。
靶向ASGPR1近膜区域的双特异性抗体促进TNF-α的募集与摄取 | bioRxiv
跳转至主要内容
首页
关于
投稿
提醒 / RSS
搜索此关键词
高级搜索
最新结果
靶向ASGPR1近膜区域的双特异性抗体促进TNF-α的募集与摄取
Xu
Song
,
SiJie
Li
,
AoJiaSi
HaShan
,
JianMing
Du
,
Yitong
Sun
,
Xiao Tao
Jiang
,
Xuan
Liu
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.11.750848
Xu Song
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
SiJie Li
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
AoJiaSi HaShan
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
JianMing Du
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
Yitong Sun
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
Xiao Tao Jiang
1
南方医科大学基础医学院免疫学系，中国广州；
在 Google Scholar 上查找此作者
在 PubMed 上查找此作者
在本网站搜索此作者
通信请联系：
jxt_go{at}foxmail.com
Xuan Liu
2
南方医科大学南方医院儿科，中国广州
在Google Scholar上查找此作者
在PubMed上查找此作者
在本站搜索此作者
摘要
信息/历史
指标
PDF预览
摘要
摘要
通过抗体募集内吞受体，为将细胞外细胞因子重定向至细胞内提供了一种途径。在本研究中，我们开发了BiAb J31，这是一种类IgG双特异性抗体，可将对TNF-α的识别与去唾液酸糖蛋白受体1（ASGPR1）的膜近端区域相连接。我们通过使用工程化ASGPR1胞外结构域进行免疫，并随后针对野生型ASGPR1和HepG2细胞进行筛选，分离获得了J31。我们采用“杵臼”突变和CrossMab工程策略，将其可变结构域与未修饰的阿达木单抗可变区组合，并引入L234A/L235A/P329G Fc区替换。BiAb J31保留了与HepG2细胞的结合能力，并在桥接实验中同时结合两种抗原。顺序结合实验表明，BiAb J31可将TNF-α募集至经其处理的细胞。活细胞成像显示，含荧光标记抗体的复合物被摄取，并与LysoTracker阳性区室共定位。在含有BiAb J31、TNF-α和PE偶联检测抗体的HepG2细胞培养体系中，90分钟内上清液中的PE荧光降低约60%。截短体和合成肽实验将J31的识别位点定位于ASGPR1的第62至100位残基，该区域位于碳水化合物识别结构域之外；AlphaFold 3建模则提出了一个Fv与肽的结合界面。这些发现鉴定出一种靶向ASGPR1膜近端区域的抗体，该抗体适用于双特异性工程改造，并可促进含TNF-α复合物的细胞募集与摄取。BiAb J31为抗体介导的细胞因子重定向提供了一个分子起点。
方法。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
版权
本预印本的版权归作者/资助方所有；作者/资助方已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。
本内容依据 CC-BY-NC 4.0 国际许可协议提供。
返回顶部
上一篇
下一篇
发布于2026年9月16日。
下载 PDF
电子邮件
感谢您有意帮助传播 bioRxiv 的信息。
注意：要求提供您的电子邮件地址，仅用于确认您是本文的发送者。
您的电子邮件地址
*
您的姓名
*
收件人
*
请在不同的行中输入多个电子邮件地址，或用逗号分隔。
您将通过电子邮件发送以下内容
靶向 ASGPR1 膜近端区域的双特异性抗体促进 TNF-α 募集与摄取
邮件主题
（您的姓名）通过 bioRxiv 向您转发了一个页面
邮件正文
（您的姓名）认为您会想看看 bioRxiv 网站上的这个页面。
您的个人留言
验证码
此问题用于验证您是否为真人访客，并防止自动提交垃圾信息。
分享
靶向 ASGPR1 膜近端区域的双特异性抗体促进 TNF-α 募集与摄取
Xu Song，
SiJie Li，
AoJiaSi HaShan，
JianMing Du，
Yitong Sun，
Xiao Tao Jiang，
Xuan Liu
bioRxiv
2026.09.11.750848；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.11.750848
分享本文：
复制
引文工具
靶向 ASGPR1 膜近端区域的双特异性抗体促进 TNF-α 募集与摄取
Xu Song，
SiJie Li，
AoJiaSi HaShan，
JianMing Du，
Yitong Sun，
Xiao Tao Jiang，
Xuan Liu
bioRxiv
2026.09.11.750848；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.11.750848
引文管理器格式
BibTeX
Bookends
EasyBib
EndNote（标记格式）
EndNote 8（xml）
Medlars
Mendeley
Papers
RefWorks（标记格式）
Ref Manager
RIS
Zotero
推特小工具
Facebook 点赞
Google +1
学科领域
免疫学
学科领域
所有文章
动物行为与认知
(8003)
生物化学
(18709)
生物工程
(14839)
生物信息学
(44356)
生物物理学
(22557)
癌症生物学
(19680)
细胞生物学
(26844)
临床试验
(138)
发育生物学
(13942)
生态学
(20969)
流行病学
(2067)
进化生物学
(25412)
遗传学
(16150)
基因组学
(23476)
免疫学
(18677)
微生物学
(42396)
分子生物学
(18020)
神经科学
(93337)
古生物学
(699)
病理学
(2977)
药理学与毒理学
(5085)
生理学
(8105)
植物生物学
(15969)
科学传播与教育
(2094)
合成生物学
(4549)
系统生物学
(10219)
动物学
(2384)
关键词：双特异性抗体 · ASGPR1 · TNF-α · 受体介导内吞 · 抗体工程 · 细胞因子重定向
原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.11.750848v1?rss=1