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发育中的胚胎表现出令人瞩目的能力，能够缓冲外部和内部扰动。在各种发育系统中，这一现象的一个典型例证是：即使发生大量细胞丧失，器官仍可成功形成。尽管人们开始逐渐了解调控这种稳健性的分子调节因子，但存活细胞是否以及如何能够重塑其发育轨迹以保障形态发生，仍不清楚。为探究这一问题，我们采用斑马鱼视网膜作为研究对象；在该系统中，祖细胞行为和谱系转换具有高度可操作性，并已得到广泛表征。我们通过热应激和遗传学方法诱导广泛的细胞凋亡，并在体内随时间追踪细胞和组织层面的响应。我们发现，视网膜发育具有很强的韧性：尽管发生大量细胞凋亡，神经发生仍按时启动，组织生长也持续进行。持续生长得益于神经源性祖细胞对细胞凋亡作出的反应，这种反应表现为一种非细胞自主性的行为转换。这些细胞绕过其经典的分化路径，进行自我更新性分裂，从而扩大克隆产出并补偿丧失的细胞。重要的是，自我更新是暂时性的；祖细胞随后恢复谱系进程，并生成适当的神经元类型。这一适应性响应支持了具有正常结构、与大脑建立正常连接并具备视觉功能的视网膜形成。总体而言，这些发现揭示了神经源性程序中潜在的可塑性，表明其是一种有助于胁迫条件下发育稳健性的机制。
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神经发生祖细胞的凋亡诱导性自我更新通过应对大规模细胞丢失来保障视网膜发育
Catarina
Figueiredo
、
Greta
Tellkamp
、
Caren
Norden
、
Mauricio
Rocha-Martins
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.07.03.735591
Catarina Figueiredo
1
古尔本基安科学研究所（IGC）
，2780-156 Oeiras，
葡萄牙
2
古尔本基安分子医学研究所（GIMM）
，2780-156 Oeiras，
葡萄牙
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Greta Tellkamp
3
马克斯·普朗克分子生物医学研究所
，Röntgenstraße 20，48149 Münster，
德国
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Caren Norden
1
古尔本基安科学研究所（IGC）
，2780-156 Oeiras，
葡萄牙
2
古尔本基安分子医学研究所（GIMM）
，2780-156 Oeiras，
葡萄牙
4
剑桥大学冈维尔与凯斯学院研究所 / 生理学、发育与神经科学系，
Tennis Court Road，Cambridge CB2 1QN，
英国
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通讯作者：
cn288{at}cam.ac.uk
mrmartins{at}mpi-muenster.mpg.de
Mauricio Rocha-Martins
1
古尔本基安科学研究所（IGC）
，2780-156 Oeiras，
葡萄牙
3
马克斯·普朗克分子生物医学研究所
，Röntgenstraße 20，48149 Münster，
德国
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通讯作者：
cn288{at}cam.ac.uk
mrmartins{at}mpi-muenster.mpg.de
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摘要
发育中的胚胎具有令人瞩目的能力，能够缓冲外部和内部扰动。跨不同发育系统而言，这一现象的一个典型例子是：即使发生大量细胞丢失，器官仍能成功形成。尽管人们开始逐渐了解调控这种稳健性的分子机制，但存活细胞是否以及如何能够重塑其发育轨迹，从而保障形态发生，仍不清楚。为探究这一问题，我们选用斑马鱼视网膜作为研究对象，因为在该系统中，祖细胞行为及谱系转换具有高度可操作性，并且已得到广泛表征。我们通过热应激和遗传学方法诱导广泛的细胞凋亡，并在体内随时间追踪细胞及组织整体的响应。
我们发现，尽管发生了大量细胞凋亡，视网膜发育仍表现出高度韧性：神经发生按时启动，组织生长持续进行。持续生长由神经源性祖细胞支持，这些细胞通过一种非细胞自主性的行为转换对细胞凋亡作出响应。它们绕过经典的分化途径，进行自我更新式分裂，从而扩大克隆输出并补偿丢失的细胞。重要的是，这种自我更新具有短暂性；祖细胞随后恢复谱系进程，生成适当的神经元细胞类型。这一适应性响应支持视网膜形成正常的结构、与大脑的连接以及视觉功能。综上，这些发现揭示了神经源性程序中潜在的可塑性，这种可塑性是在应激条件下促进发育稳健性的一种机制。
引言
即使受到内部或外部应激因素的挑战，发育中的胚胎仍具有非凡的能力，能够以可重复的方式形成具有功能的器官¹。外部应激因素因……而异。
这取决于生物体及其所处环境，并包括温度、缺氧、病原体暴露和紫外线辐射等变化²。胚胎能够对这些挑战作出反应，这意味着发育过程具有一定的缓冲能力，使生物体不仅能够抵御遗传变异，还能够抵抗环境胁迫³，⁴。如果这些缓冲机制失效，发育应激可能会造成严重后果。例如，适应失败可能损害细胞增殖、扰乱细胞迁移，甚至诱发细胞死亡；在最严重的情况下，这些影响会破坏器官乃至整个生物体的形成⁵–⁷。因此，理解胚胎对胁迫的适应机制，对于解释胚胎发生如何实现可重复性至关重要。
目前已经鉴定出一些能够增强细胞抵御应激因素能力的分子机制⁸–¹⁰。其中包括由分子伴侣介导的蛋白质质量控制机制，研究表明，该机制能够防止错误折叠蛋白质积累所导致的细胞毒性¹¹–¹³。另一个例子是果蝇的间隙基因系统，其中基因调控网络能够缓冲形态发生素噪声，并确保即使存在有害突变，图式形成仍具有可重复性，从而避免细胞缺陷¹⁴，¹⁵。在细胞和组织层面，胚胎能够调整发育轨迹并重塑组织，以缓冲或纠正错误¹⁶–¹⁸。发育中组织在大量细胞丧失后仍能恢复生长的能力，正体现了这种缓冲能力。在果蝇翅盘和眼ⁱ⁹–²¹以及小鼠大脑皮层²²中，均可观察到对导致细胞丧失的急性扰动所产生的代偿性增殖。对果蝇的研究表明，濒死细胞中的半胱天冬酶激活能够促进有丝分裂原的分泌，诱导存活邻近细胞发生增殖，
这表明，补偿性生长是对细胞死亡的直接响应
23
,
24
。然而，这些研究大多依赖静态观察和终点分析，因此对生长恢复过程中组织范围的适应性变化及细胞可塑性的动态过程关注不足。
在中枢神经系统（CNS）的发育过程中，抵御细胞丢失的能力尤为重要，因为细胞数量、组织生长和神经连接都需要受到严格调控，而细胞的非预期丢失可能直接影响功能
25
,
26
。因此，CNS 是研究存活细胞是否以及如何调整其发育程序、以确保器官正常形成的理想模型。在正常的 CNS 发育过程中，少量程序性细胞死亡可用于清除缺陷细胞
27
–
29
。然而，热应激、缺氧、病毒感染和遗传异常等因素均可显著增加细胞死亡。例如，影响复制应激反应的基因突变或 ZIKV 病毒感染可导致神经祖细胞死亡，并引发小头畸形和视网膜畸形
30
,
31
。尽管存在诸多可能扰乱神经发育的应激因素，人类显著的发育缺陷仍较为罕见（欧盟每 10000 例出生中有 27.55 例；（EUROCAT，2026）
32
）。因此，有研究提出，神经组织能够适应细胞丢失，从而确保器官正常发育
33
,
34
。与这一观点一致，鸡胚在神经管节段部分消融后能够完全恢复
35
,
36
。类似地，对人脑类器官和斑马鱼视网膜的研究表明，通过选择性清除细胞诱导的嵌合性细胞凋亡，可由神经祖细胞调整其克隆大小来抵消
37
,
38
。这些发现提示
神经祖细胞具有内在的感知并补偿细胞丢失的能力，从而保障组织生长。这种灵活性的一种来源可能在于，脑组织和视网膜组织中单个祖细胞的决策在很大程度上具有随机性。研究表明，这会导致克隆大小存在差异
39
–
41
。然而，这种差异性是否也能够为应对胁迫和细胞丢失提供适应性反应的来源，目前仍不清楚。
我们采用斑马鱼视网膜作为研究对象。该系统中的祖细胞分裂模式和谱系转变已得到充分表征
40
,
42
–
45
。通过不同的实验处理诱导高水平的短暂性细胞凋亡，我们研究了组织对细胞死亡增加的稳健性。结果发现，经历广泛细胞死亡的视网膜并未停止发育，而是在正确的发育阶段启动神经发生，同时继续生长。这种持续生长由一种非细胞自主性反应驱动：主要的神经发生祖细胞群体（Ath5+）绕过了向分化细胞状态转变的经典过程，转而进行自我更新性分裂。这些额外的分裂扩大了祖细胞库，从而补偿了细胞丢失。自我更新的神经发生祖细胞最终恢复正常的发育轨迹，并参与形成具有适当结构、与脑部建立连接且具备视觉功能的功能性视网膜。这表明，神经发生程序内部的可塑性能够在分化过程中缓冲细胞丢失对视网膜形成的影响。
结果
视网膜发育在热应激诱导的广泛细胞凋亡后仍能继续进行
既往研究表明，发育中的中枢神经系统（CNS）是
对凋亡敏感，例如在热应激条件下的啮齿动物脑
46
,
47
、蜥蜴
48
和斑马鱼
49
中均观察到了这一现象。因此，我们采用全身热应激，在斑马鱼器官发生早期诱导发育中枢神经系统（CNS）内广泛的细胞死亡。为此，将受精后 24 小时（hpf）的胚胎置于 42 °C 下处理 45 分钟（图 1A）。热应激后一天（48 hpf），对促凋亡标志物活化型 caspase 3 进行染色，结果显示所有胚胎均发生了凋亡，且凋亡在 CNS（包括视网膜）中尤为显著（图 1B），但严重程度各异（图 1B、1C，图 S1B）。尽管 48 hpf 时发生了广泛的细胞死亡，热应激后一天仍有 94% 的胚胎存活（图 S1A），且 83% 的胚胎存活至 72 hpf（图 S1A）。
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图 1.
热应激诱导发育中斑马鱼视网膜发生短暂性凋亡。
(A) 热应激后视网膜发育示意图。胚胎在 24 hpf 接受热应激时，视网膜中仅有多能祖细胞。至 28 hpf，祖细胞开始表达 Ath5，神经发生由此启动；至 48 hpf，大多数神经元已分化并排列形成不同层次。
(B) 48 hpf 时全胚胎中凋亡细胞的空间分布。活化型 caspase 3（品红色）标记凋亡细胞。箭头和箭头尖分别指示视网膜和脑中的凋亡细胞。
(C) 对照组和热应激组胚胎在 48 hpf 和 72 hpf 时的明场图像。
(D) 对照组（左）和热应激组（右）胚胎视网膜中凋亡细胞的空间分布，检测时间分别为热应激后 10 h（34 hpf；上）、24 h（48 hpf；中）和 48 h（72 hpf；下）。DAPI（灰色）标记细胞核。活化型 caspase 3
标记凋亡细胞；颜色表示 Z 深度。
（E）
热应激视网膜中复制压力增加。热应激后 4 h（中）和 24 h（下）的对照视网膜（上）与热应激视网膜神经上皮。DAPI（灰色）标记细胞核，ɣH2AX 标记 DNA 双链断裂；颜色表示荧光强度。白色虚线框表示高倍图像所示区域。
（F）
遗传性耗竭 p53 对热应激视网膜的影响。热应激后 24 h（48 hpf），分别注射对照 morpholino（上）或 p53 morpholino（下）的热应激视网膜。DAPI（灰色）标记细胞核。活化的 caspase 3 标记凋亡细胞；颜色表示 Z 深度。白色虚线勾勒出胚胎（B）或视网膜（D、F）的轮廓。查找表显示最小和最大 Z 深度（D、F）或最小和最大信号值（E）。比例尺：150 μm（B、C），50 μm（D-F），高倍区域为 10 μm（E）。
为检验先前关于热应激后细胞死亡是由基因组不稳定性和复制压力诱导，继而触发 p53 依赖性凋亡的观点
46
,
50
–
52
，我们进行了针对 ɣH2AX 的免疫染色。ɣH2AX 是 DNA 双链断裂的标志物。在 28 hpf（热应激后 4 h），与对照组相比，我们观察到热应激视网膜中的 ɣH2AX 信号较强（图 1E）。然而，在 48 hpf（热应激后 24 h），ɣH2AX 染色基本消失（图 1E）。由于此时活化 caspase 3 染色最为明显，这提示视网膜祖细胞在凋亡发生之前经历了较高水平的复制压力。采用已建立的 morpholino 方法耗竭 p53
53
，在 48 hpf（热应激后 24 h）时大幅挽救了热应激视网膜中的细胞死亡（图 1F），证实了
热应激诱导的细胞凋亡主要通过 p53 通路激活。
为考察视网膜细胞死亡的时间进程，我们分析了热应激后 48 小时内的凋亡进展。热应激后 4 小时开始出现凋亡细胞（图 S1C），热应激后 10 至 24 小时，凋亡现象更为明显（图 1D、图 S1C）。至 72 hpf（热应激后 48 小时），视网膜中残留的活化 caspase 3 信号水平已较低，与年龄匹配的对照组相近。通过 DAPI 染色对视网膜进行定性观察时，我们注意到，72 hpf 时热应激组与对照组视网膜的细胞核层排列相似，表明两组的视网膜发育均在继续（图 1D）。总体而言，这些结果表明，热应激会在 28 hpf 至 48 hpf 期间通过 p53 依赖性凋亡，引发斑马鱼视网膜中广泛且大量的细胞死亡。至 72 hpf 时，细胞死亡已减退，热应激组视网膜也呈现出持续发育的状态。
热应激视网膜中的神经发生起始时间未发生改变
热应激诱导的凋亡最为显著的 28 hpf 至 48 hpf 时段，恰与发育中斑马鱼视网膜神经发生的起始时间相吻合（图 1A）。既往研究表明，在小鼠长骨中通过化学遗传学消融造成的细胞丢失，或在斑马鱼视泡中通过物理方式移除细胞，均可通过延迟分化起始时间得到补偿⁵⁴˒⁵⁵。为检验热应激诱导的凋亡是否会对视网膜神经发生的起始时间产生类似影响，我们对标记首批神经发生祖细胞的 Tg(ath5:GAP-RFP) 报告基因品系进行了成像⁵⁶–⁵⁸。我们观察到，与对照组中所见的时间进程相似，Ath5⁺ 细胞……
在28 hpf（热应激后4 h），77%的热应激胚胎中开始出现Ath5+神经源性祖细胞（N=14）（图2A、2B）。即使热应激视网膜看起来明显小于同龄对照组，这种Ath5+神经源性祖细胞的及时出现仍然可以观察到（图2A）。因此，认为神经发生普遍延迟是机体为补偿热应激引起的大量细胞死亡而采取的适应性反应，这一可能性并不大。
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图2.
Ath5+神经源性祖细胞在热应激视网膜中进行自我更新分裂。
(A-D)
Ath5+神经源性祖细胞的出现与分裂模式。
(A)
对照组和热应激组胚胎在24 hpf（神经发生开始前）及28 hpf（热应激后4 h）的视网膜。箭头表示Ath5+神经源性祖细胞。
(B)
对照组和热应激组胚胎在28 hpf时含有Ath5+神经源性祖细胞的视网膜比例（对照组n=13，热应激组n=14）。
(C)
对照组视网膜中Ath5+神经源性祖细胞分裂产生一个RGC（基底侧细胞）和一个PR前体（顶端侧细胞）的时间序列。
(D)
热应激胚胎中Ath5+祖细胞进行自我更新分裂的时间序列。
(A, C-D)
Tg(ath5:GAP-GFP)、Tg(ath5:GAP-RFP)和ath5:GFP-CAAX标记神经源性祖细胞。
(C-D)
箭头表示基底侧和顶端侧突起。
(E)
热应激视网膜中被追踪的Ath5+祖细胞中，经典分裂和自我更新分裂所占的比例（n=72个细胞，N=14个胚胎）。
(F)
对照组视网膜中Ath5+祖细胞从产生至分裂的示例性轨迹，显示光感受器前体（PRpr，蓝色）和视网膜神经节细胞（RGC，蓝色）特征性的基底侧迁移模式；以及发生自我更新分裂的热应激Ath5+祖细胞（HS，淡紫色）。图中绘制了其距顶端侧的距离随
时间。所有单个轨迹均显示于图 S2A 中。
(G) 对照视网膜中经历自我更新分裂的热应激 Ath5+ 祖细胞（HS，粉色，n=56 个细胞，α=1,678）、光感受器前体细胞（PRpr，蓝色，n=49 个细胞，α=1,349）和多能祖细胞（MP，灰色，n=31 个细胞，α=1,739）顶端迁移的均方位移（MSD），以所有轨迹的均值 ± 标准误（s.e.m.）表示。PRpr* 轨迹取自 Rocha-Martins 等，2023 年的研究，多能祖细胞**轨迹取自 Nerli 等，2020 年的研究；分别从出生至分裂或最终位置对这些轨迹进行了重新分析。
(H) 对 Nerli 等，2020 年和 Nerli 等，2023 年研究中的多能祖细胞**（灰色）和 PRpr*（蓝色）分别进行重新分析，并分析热应激视网膜中自我更新分裂的细胞周期长度（粉色）。数据以叠加单个测量值（点）的箱线图表示。箱体下边缘和上边缘分别表示第 25 百分位数和第 75 百分位数；中线表示中位数；须线表示最小值和最大值。(I-J) Ath5+ 神经源性祖细胞中光感受器分化报告基因表达的时间序列。(I) 对照胚胎中的经典分裂。(J) 热应激胚胎中的自我更新分裂。(I) Tg(ath5:GAP-RFP) 和 (J) ath5:GAP-RFP 标记神经源性祖细胞，(I-J) Tg(crx:GAP-CFP) 标记 PRpr。虚线框表示下方所示的放大区域。在每个时间点，左、右图分别显示合并的 RFP/CFP 通道和 CFP 通道。
(K) 热应激胚胎中 Ath5+ 祖细胞自我更新分裂期间缺乏多能祖细胞报告基因表达的时间序列。Tg(ath5:GAP-RFP) 标记神经源性祖细胞，Tg(vsx2:GFP) 标记多能祖细胞。虚线框表示下方所示的放大区域。在每个】【。
在该时间点，左侧和右侧面板分别显示合并的 RFP/GFP 通道和 GFP 通道。
(L)
Ath5+ 祖细胞发生经典分裂和自我更新分裂的示意图。白色虚线表示视网膜的轮廓
(A)
或顶端侧
(C-D, I-K)
。查找表显示最小和最大 Z 深度
(A)
或最小和最大信号值
(I-K)
。
(C-D, I-K)
时间以小时:分钟表示。比例尺：50 μm
(A)
，10 μm
(C, D, I-K)
，放大区域为 5 μm
(I-K)
。
Ath5+ 神经源性祖细胞在热应激视网膜中发生自我更新分裂
为了解热应激诱导的细胞凋亡后神经发生的进程，我们利用 Tg(ath5:GAP-RFP) 报告基因品系，从 28 hpf（热应激后 4 小时）开始，对 Ath5+ 神经源性祖细胞的分裂行为进行了最长 48 小时的监测。我们采用光片显微镜成像，以尽量减少光毒性造成的进一步应激
59
。在对照胚胎中，Ath5+ 祖细胞的胞体向顶端表面移动并分裂一次，产生一个光感受器前体细胞，以及一个视网膜神经节细胞（RGC）或一个中间神经元（
图 2C
、2F；视频 S1），这与此前的报道一致
44
，
57
，
60
。最初发生基底侧移位后，光感受器前体细胞会移回顶端表面，而其姐妹细胞则继续向基底侧移动至其最终的层状位置，这与此前的描述一致
44
，
60
（
图 2C
；视频 S1）。在热应激视网膜中，这种分裂行为发生了改变：我们观察到，在相当大比例的 Ath5+ 祖细胞子细胞中发生了额外分裂：在 64% 的情况下（n=72 个细胞，N=14 个胚胎；
图 2E
），Ath5+ 祖细胞分裂后，一个子细胞（35%）或两个子细胞（29%）均返回顶端侧，并立即再次发生分裂（
图 2D
；视频 S1；
图 S2B
】【。
在各次分裂之间，这些细胞保持双极形态，与祖细胞相似（图2D），这种行为此前尚未见报道。
为确定这种行为是否确实更接近祖细胞的行为，我们分析了Ath5+细胞体在顶端分裂之间的运动（n=56个细胞，N=14个胚胎；图S2A）。所得数据与此前发表的、采用相同实验体系获得的非神经源性祖细胞和光感受器前体细胞行为数据进行了比较，并在本研究中重新分析
43
,
60
。热应激视网膜中Ath5+分裂产生的子细胞在再次分裂前表现出定向的顶端运动（图2F、G），其特征是均方位移（MSD）曲线呈超线性增长（图2G）。这种运动不同于光感受器前体细胞的运动。光感受器前体细胞是唯一一类经典上由Ath5+分裂产生并返回顶端的细胞，但其迁移速度较慢，且呈现更多跳跃式的转位（图2F、2G）。相较之下，热应激视网膜中Ath5+分裂产生的子细胞的顶端运动更接近视网膜祖细胞的运动（图2G）。此外，在热应激视网膜中经历额外分裂轮次的Ath5+细胞，其细胞周期长度也更接近祖细胞的细胞周期，平均为359.7 min ± 48.49 min（图2H），而祖细胞为296.1 min ± 39.89 min
43
。该时长约为光感受器前体细胞所报道时长的一半
61
（629.4 min ± 44.63 min；图2H）。这些额外的Ath5+分裂并不会立即产生光感受器前体细胞，这一点也进一步得到了证实，因为在Ath5+子细胞中未检测到光感受器分化报告基因Crx+（Tg(
crx:GAP-CFP
)）（图2I、2J；视频S1）。
这些结果引发了两个
可能性包括：1）额外分裂产生的子细胞仍可保留神经源性祖细胞身份；或2）子细胞可逆转至神经源性前状态。为区分这两种可能性，我们检测了 Vsx2 报告基因转基因的表达 62。Vsx2 是多能祖细胞状态的主调控因子；如果热应激胚胎中的 Ath5+ 细胞逆转至神经源性前状态，我们预期 Vsx2 应与这些细胞共表达。然而，在 Tg(ath5:GAP-RFP; vsx2:GFP) 转基因品系中，热应激后我们未发现任何同时表达这两种标志物且正在进行自我更新分裂的 Ath5+ 细胞（图 2K，n=12 个细胞，N=4 个胚胎）。因此，Ath5+ 祖细胞很可能在未逆转至神经源性前祖细胞状态的情况下进行额外分裂。
值得注意的是，在 7 个能够追踪 Ath5+ 细胞完成第二次分裂之后的实例中，有 3 个细胞进行了第三次分裂（图 S2D；视频 S1）。在其余 4 个实例中，Ath5+ 祖细胞第二次分裂产生的子细胞各自生成了 3 个神经元，即 PR-PR 和一个 RGC/中间神经元，这与经典的 Ath5+ 分裂模式一致（图 S2C；视频 S1）。因此，神经源性祖细胞在最终产生其经典神经元后代之前，可以进行多轮额外分裂。这些结果表明，在热应激诱导的细胞死亡之后，Ath5+ 神经源性祖细胞能够绕过其向分化细胞状态的经典转变。相反，它们在神经元命运决定之前进行额外的分裂轮次（图 2L）。我们将这种此前未被描述的能力称为“自我更新分裂”（self-renewing divisions）。
Ath5+ 神经源性祖细胞的自我更新分裂是细胞凋亡的一般性响应
为检验 Ath5+ 自我更新分裂是否会（ ）
为确定祖细胞是否会对热应激范围之外的细胞死亡作出响应，我们采用化学遗传学消融方法（NTR-Mtz）诱导细胞凋亡⁶³˒⁶⁴。胚胎在 8–32 细胞期注射编码 NTR 蛋白的 RNA，随后从 16 hpf 至 28 hpf 用 10 mM 甲硝唑处理（图 3A）。在 48 hpf（处理结束后 20 h），与未处理对照组相比，处理组视网膜中 γH2AX 水平（图 S3A）及活化 caspase 3 染色信号均升高（图 3B），证实 DNA 损伤和细胞凋亡已被诱导。对 NTR-Mtz 处理视网膜中 Ath5⁺ 祖细胞进行活体成像（图 3C；视频 S2）显示，在这一处理条件下，Ath5⁺ 细胞同样会发生自我更新分裂（n=10/43 个细胞，N=11 个胚胎），但发生率低于热应激胚胎（图 3L）。这种差异很可能是由于 NTR-Mtz 处理诱导的整体细胞凋亡水平较低。
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图 3.
Ath5⁺ 神经发生祖细胞的自我更新分裂是对细胞凋亡的非细胞自主性响应。
(A)
采用 NTR/MTZ 系统进行化学遗传学消融的示意图。向胚胎注射 CFP-NTR RNA（B–C）或 rx2:CFP-NTR DNA（D–E）后，在 16 hpf 至 28 hpf 期间用 10 mM Mtz 处理，以诱导 NTR 表达细胞发生细胞死亡。
(B)
48 hpf 时 CFP-NTR RNA 注射对照胚胎（上）和 Mtz 处理胚胎（下）视网膜中凋亡细胞的空间分布。DAPI（灰色）标记细胞核。活化 caspase 3 标记凋亡细胞；颜色表示 Z 轴深度。
(C)
CFP-NTR RNA 注射并经 Mtz 处理的胚胎中一个自我更新 Ath5⁺ 祖细胞的时间序列。
Tg(ath5:GAP-RFP)
（灰色）标记神经发生祖细胞。
(D)
48 hpf 时 rx2:CFP-NTR 乐彩
DNA注射/Mtz处理的胚胎。活化的caspase 3（洋红色）标记凋亡细胞；表达CFP-NTR的细胞（黄色）。箭头表示凋亡的CFP-NTR阳性细胞。
（E）
rx2:CFP-NTR DNA注射/Mtz处理胚胎中一个可自我更新的Ath5+ NTR祖细胞的时间序列。Tg(ath5:GAP-RFP)标记神经源性祖细胞。虚线框表示下方所示的放大区域。在每个时间点，左、右图分别显示RFP通道和CFP通道。
（F）
CFP-NTR RNA注射/Mtz处理胚胎中可自我更新的Ath5+祖细胞的运动轨迹。绿色突出显示一条代表性轨迹（n=10个细胞，N=10个胚胎）。绘制细胞距顶端侧的距离随时间的变化。
（G）
CFP-NTR RNA注射/Mtz处理胚胎中可自我更新的Ath5+祖细胞顶端迁移的均方位移（MSD）曲线（NTR-Mtz，绿色，n=10个细胞，α=1,515）和热应激胚胎（HS，粉色，n=56个细胞，α=1,678）、rx2:CFP-NTR DNA注射/Mtz处理胚胎中的Ath5+ NTR祖细胞（黄色，n=12个细胞，α=1,565）、对照胚胎中的光感受器前体细胞（PRpr，蓝色，n=49个细胞，α=1,349）和多能祖细胞（MP，灰色，n=31个细胞，α=1,739）的MSD曲线。数据表示所有轨迹的均值±均值标准误（s.e.m.）。
（H）
rx2:CFP-NTR DNA注射/Mtz处理胚胎中可自我更新的Ath5+ NTR祖细胞的运动轨迹。绘制细胞距顶端侧的距离随时间的变化。黄色突出显示一条代表性轨迹。（n=12个细胞，N=3个胚胎）。
（I）
CFP-NTR RNA注射/Mtz处理（绿色）和热应激胚胎（粉色）中可自我更新的Ath5+祖细胞、rx2:CFP-NTR DNA注射/Mtz处理胚胎中的Ath5+ NTR祖细胞（黄色）、以及对照胚胎中的多能祖细胞（灰色）和PRpr（蓝色）的细胞周期长度。数据以叠加单个...的箱线图表示。
测量值（点）。箱体下、上边缘分别表示第 25 和第 75 百分位数；中间线表示中位数；须线表示最小值和最大值。
(J) 未受扰动视网膜中观察到的自我更新型 Ath5+ 细胞分裂时间序列。ath5:GFP-CAAX（灰色）和 Tg(ath5:GAP-RFP) 标记神经发生祖细胞。
(K) J 面板所示自我更新型 Ath5+ 祖细胞的运动轨迹。图中显示其距顶端侧的距离随时间的变化。
(L) 对照组（n=59 个细胞，N=14 个胚胎）、NTR-Mtz 处理组（n=43 个细胞，N=11 个胚胎）和热应激视网膜组（n=72 个细胞，N=14 个胚胎）中，已追踪的 Ath5+ 祖细胞发生经典型分裂与自我更新型分裂的比例。为便于比较，热应激胚胎中 PRpr、多能祖细胞和自我更新型 Ath5+ 祖细胞的 MSD（G）和细胞周期长度（I）数据根据图 2 重新绘制。白色虚线表示视网膜轮廓（B、D）或顶端侧（C、E、J）。查找表显示 Z 轴深度的最小值和最大值（B），或信号值的最小值和最大值（C、E、J）。
(C、E、J) 时间以小时:分钟表示。比例尺：50 μm（B）、20 μm（D）、10 μm（C、E 和 J）；放大区域的比例尺为 2 μm（E）。
与热应激处理胚胎中的观察结果一致，自我更新型 Ath5+ 细胞在有丝分裂前表现出定向的顶端移动，其 MSD 曲线斜率呈超线性（图 3F、3G）。此外，其平均细胞周期长度（445 min ± 78 min）短于文献报道的光感受器前体细胞周期长度⁶¹（629,4 min ± 44,63 min；图 3I）。
这些发现表明，在不同的诱导凋亡条件下，神经发生 Ath5+ 祖细胞都会发生自我更新型分裂，说明这种行为改变是细胞死亡的一种普遍响应。
Ath5+ 祖细胞的自我更新是对凋亡的非细胞自主性响应
为
为探究未直接受到 NTR 诱导凋亡影响的细胞是否会进行自我更新分裂，我们构建了受视网膜特异性启动子 Rx2 调控的 CFP-NTR DNA 构建体。通过在单细胞期注射该 DNA 构建体，实现 NTR 的镶嵌表达。按照上述方法，用 10 mM 甲硝唑处理胚胎（16 hpf–28 hpf）以诱导细胞死亡（图 3A）。我们发现，所有 caspase 3 阳性细胞均共表达 CFP-NTR（图 3D），证实凋亡仅在 Rx2 表达细胞中被诱导。追踪 ath5:GAP-RFP 阳性、rx2:CFP-NTR 阴性的祖细胞（图 3E；视频 S2）时，我们观察到未直接受到 NTR 影响的 Ath5+ 细胞发生了自我更新分裂（n=12 个细胞，N=3 个胚胎；图 3E）。MSD 分析证实，这些细胞在有丝分裂前表现出定向的顶端迁移，与其他诱导凋亡的处理条件下观察到的情况一致（图 3H、3G）。与热应激以及 NTR-Mtz 处理胚胎中的自我更新 Ath5+ 祖细胞相似，这些细胞的平均细胞周期时长（401.7 min ± 39.16 min；图 3I）短于此前报道的光感受器前体细胞周期时长（629.4 min ± 44.63 min；图 3I）。⁶¹
未受干扰的 Ath5+ 祖细胞能够进行自我更新分裂，这一发现促使我们进一步探究：在未暴露于高应激水平的胚胎中，是否也会偶尔出现此类分裂。为此，我们追踪了未经干预的视网膜中 Ath5+ 神经源性祖细胞的分裂（来自 N=14 个胚胎的 n=59 个细胞）。我们发现一个 Ath5+ 神经源性祖细胞发生了自我更新分裂（图 3J、3L；视频 S2）。该细胞的转位轨迹与热应激条件下自我更新分裂所观察到的轨迹相似，
经 NTR-Mtz 和 rx2:NTR-Mtz 处理的视网膜（图 3K）。综上，这些结果表明，自我更新能力是 Ath5+ 神经源性祖细胞的一种内在属性；在对照条件下，这种能力偶尔发生，而在诱导细胞凋亡后则会增强。
胚胎斑马鱼视网膜可从大范围细胞凋亡中恢复并获得视觉功能
大量 Ath5+ 祖细胞在细胞损失后会进一步进行多轮分裂，这意味着这些细胞实际上形成了更大的细胞克隆（图 2L）。根据热应激视网膜中观察到的自我更新分裂频率，我们估算每个 Ath5+ 神经源性祖细胞平均产生 4.2 个神经元，而非经典情形下的 3 个。这相当于克隆产出增加约 40%。因此，我们进一步探究细胞产量的增加是否能够促使组织形成和视觉功能恢复。这一设想与我们的观察相符：尽管细胞大量损失，热应激视网膜似乎仍在继续发育（图 1D）。
我们测量了热应激组和对照组胚胎在热应激后 8 小时（32 hpf）至 5 dpf 期间的眼部面积，以追踪视网膜大小的变化（图 S4A）。在此期间，热应激视网膜的眼部面积增加了 135%（对照组为 111%），表明尽管细胞大量损失，生长仍在持续（图 S4A）。为了解析对照组与热应激组视网膜的三维生长动态，我们使用标记的层粘连蛋白勾勒活体胚胎视网膜表面，并在 IMARIS 软件中重建其体积；成像时间为 48 hpf 和 72 hpf（热应激后 24 小时和 48 小时）。该分析显示，热应激视网膜的生长速率（n=16；60385 μm³】【。
/小时 ± 29944 μm³/小时
3
/小时）以及对照组（n=15；56389 μm³/小时 ± 18462 μm³/小时；
图4B
）。对固定胚胎的分析证实了这一观点。热应激视网膜在48 hpf时平均比对照组小50%（热应激后24小时；
图4A、4C
）。在随后3天内，视网膜体积增加了2.19倍，而对照组增加了1.75倍（热应激后4天；
图4C
）。在5 dpf时，热应激视网膜的体积平均达到对照组的64%，其中一些视网膜的体积已与对照组相当。因此，尽管发生了广泛的细胞死亡，热应激视网膜仍以与对照组相当甚至略高的速率持续生长。
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图4. 热应激视网膜的生长、组织结构恢复及视觉功能恢复。
(A)
48 hpf（左）和5 dpf（右）时对照组（蓝色；上）和热应激组（粉色；下）视网膜的三维表面重建图。
(B)
对照组（蓝色，n=15）和热应激胚胎（粉色，n=16）在48 hpf至72 hpf期间的视网膜体积增长率。采用Mann–Whitney检验（双侧）比较对照组与热应激组，P=0.9224。
(C)
固定的对照组（蓝色，n=20、n=21）和热应激组（粉色，n=29、n=25）在热应激后1天和4天的视网膜体积。采用Mann–Whitney检验（双侧）比较各时间点的对照组与热应激组，P<0.0001。
(B–C)
数据以叠加单个测量值（点）的箱线图表示。箱体下边缘和上边缘分别表示第25和第75百分位数；中间线表示中位数；须线表示最小值和最大值。
(D)
72 hpf时对照组（左）和热应激组（右）视网膜中的神经元分层。
Tg(ath5:GAP-RFP)
标记视网膜神经节细胞（洋红色），
Tg(ptf1a:Gal4/UAS:GAP-YFP)
标记抑制性神经元（黄色），以及
Tg(crx:GAP-CFP)
标记…
光感受器（青色）。白色虚线框标示放大区域。
（E）72 hpf 时对照组和热应激组视网膜的厚度及各层厚度（神经节细胞层（GCL）、内核层（INL）和外核层（ONL））。图中标示均值和标准差。显示单个数据点（对照组 n=6，热应激胚胎 n=10）。采用 Mann–Whitney 检验（双侧）比较对照组与热应激组胚胎，所得 P 值见表 1。
（F）5 dpf 时对照组（上）和热应激组（下）视网膜中的神经元成熟情况。Zn-5 标记视网膜神经节细胞（RGCs，洋红色），HuC/D 标记 RGCs 和无长突细胞（ACs，黄色），Zpr-1 标记光感受器（PRs，青色），DAPI（灰色）标记细胞核。
（G）5 dpf 时，对照组（左）和热应激组（右）胚胎的视神经及投射至顶盖的神经元突起示意图和代表性图像。神经元突起由 Tg(ath5:GAP-RFP)（灰色）标记。
（H）5 dpf 时对照组（左）和热应激组（右）幼鱼的视觉背景适应实验。示意图显示黑暗（上）和光照（下）条件下预期的色素分布。热应激组和对照组幼鱼的明场图像。比例尺：100 μm（A），50 μm（D、G），10 μm（F）。
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表 1。
对照条件和热应激条件下的视网膜层厚度测量值。
在细胞凋亡的高峰阶段（热应激后 24 h），DAPI 染色显示视网膜严重紊乱，细胞核取向异常（图 1D）。然而，到 72 hpf 时，热应激组视网膜似乎已形成分层结构，表明视网膜结构已经得到恢复（图 1D）。在 Spectrum of fates 转基因品系中分析细胞类型分布时，该品系能够明确区分所有……
在主要视网膜神经元类型方面，我们注意到，热应激后72 hpf的视网膜包含所有神经元类型，并且这些神经元排列在正确的层次中（图4D）；其厚度与对照胚胎相近（图4E，表1）。此外，在5 dpf时，成熟中光感受器（Zpr-1）、视网膜神经节细胞（Zn-5）和基底神经元（HuC/D）的标志物均出现在相应的层次中（图4F）。因此，对细胞损失的补偿似乎能够支持神经元分化以及正确组织结构的形成。为了解这种组织结构的恢复是否超越视网膜本身，并进一步促成视觉功能的产生，我们检测了热应激视网膜是否能够形成视神经。对Tg(ath5:GAP-RFP)胚胎进行三维重建显示，88%的热应激视网膜在5 dpf时（热应激后4天；对照胚胎n=30，热应激胚胎n=32）形成了视神经（图4G，图S4B），其形态上与对照组所见相似。为评估视觉功能，我们采用背景适应反应进行检测；在该反应中，斑马鱼以依赖视觉的方式，根据环境亮度调节其皮肤色素沉着^66,67。在5 dpf时，热应激幼鱼在明暗环境中调节黑色素细胞形态的能力与对照组无可辨别差异（图4H），表明这些鱼确实能够感知视觉信息。
因此，尽管热应激视网膜经历了大规模细胞死亡，其仍能继续生长，并在幼鱼阶段包含排列于正确层次中的所有神经元类型。这种对广泛细胞损失的稳健性使其能够获得光感知能力，提示补偿性反应能够支持视网膜在经历严重发育扰动后获得视觉功能。
讨论
本研究考察了细胞可塑性的若干方面，即】【。
构成发育中中枢神经系统抵御细胞丢失能力的基础。斑马鱼视网膜发育迅速且具有透明性，使我们能够利用高分辨率活体成像，监测从损伤发生到形态发生过程中细胞和组织的响应。我们发现，在热应激或化学遗传学消融诱发广泛细胞死亡后，很大一部分 Ath5⁺ 神经发生祖细胞并未立即产生神经元，而是继续进行额外轮次的细胞分裂。这种神经发生祖细胞行为的转变是由凋亡引发的非细胞自主性响应，同时伴随着视网膜持续生长和神经元分化。这些自我扩增的 Ath5⁺ 细胞分裂提高了经历广泛细胞丢失的视网膜中的克隆产量，为补充细胞提供了重要来源，有助于维持视网膜形态发生，并最终保全视觉功能。
Ath5⁺ 神经发生祖细胞具有进行自我更新分裂的能力，这一发现拓展了我们对发育中脊椎动物视网膜神经祖细胞行为的既有认识。此前针对小鼠和斑马鱼的研究表明，具有相同潜能的视网膜祖细胞通过随机命运决策产生差异显著的克隆产量，却仍能可靠地形成大小、组成和功能一致的视网膜³⁹˒⁴⁰˒⁶⁸。这表明发育中的视网膜能够缓冲单细胞层面的变异，从而确保组织层面的结果具有可预测性。近期针对斑马鱼的研究进一步揭示了这些命运决策具有出乎意料的可塑性。当关键命运决定因子被移除时，早期神经发生祖细胞并未停留在祖细胞阶段或发生细胞死亡，而是拓宽了其命运选择范围，并且
甚至产生了在对照条件下不会出现的神经元谱系⁴⁴。本研究进一步拓展了我们对早期神经发生祖细胞可塑性的认识，表明当发育中的视网膜经历过度细胞丢失时，Ath5+祖细胞能够绕过其向分化细胞状态转变的经典过程，转而进行额外轮次的分裂。这使克隆规模估计增加约40%，可能有助于缓冲细胞丢失对视网膜发生的影响。目前尚不清楚，这种适应性可塑性是否仅限于Ath5+祖细胞，或者其他祖细胞状态，例如多潜能增殖性祖细胞和已承诺的前体细胞，是否也能够调节其增殖行为。细胞丢失可能还存在其他缓冲机制，因为早期在斑马鱼视泡阶段物理移除细胞的研究显示，神经发生的起始时间会延迟⁵⁵。这表明，早期发育阶段的细胞丢失能够改变多潜能祖细胞的分裂行为。综合来看，这些发现提出了一种可能性：发育中的斑马鱼视网膜利用不同的祖细胞可塑性库，以补偿不同发育阶段的细胞丢失。仍需开展进一步研究，以探明不同祖细胞状态的适应性可塑性如何协同作用，从而支持组织的稳健生长。
我们表明，镶嵌性细胞凋亡足以触发未受扰动的Ath5+祖细胞进行自我更新。自我更新性分裂是短暂的，随后祖细胞恢复神经发生，并产生与对照组中相同的细胞类型。这表明，机体存在能够响应细胞死亡并激活自我扩增的调控机制；但重要的是，这些机制也会在细胞死亡发生后将其关闭。
已恢复的问题。未来的研究需要探究这些祖细胞如何感知周围组织中的细胞死亡，以及相关信号如何转导为短暂的增殖行为改变。揭示这类信号的性质也至关重要。对发育中组织代偿性生长和成年个体再生的研究已提出一些可能的机制：在果蝇的翅和眼成虫盘中，凋亡细胞通过分泌促有丝分裂因子，刺激邻近存活细胞增殖¹⁴˒²⁴。在斑马鱼成年视网膜中，正在死亡的神经元会释放肿瘤坏死因子 α（TNFα），刺激静息干细胞重编程，而这是再生过程中的关键步骤⁶⁹˒⁷⁰。体外发生凋亡的 MDCK 上皮细胞可产生作用力，通过 YAP 介导的机械转导触发邻近细胞的代偿性增殖⁷¹。明确这些通路和／或其他通路是否参与 Ath5⁺ 祖细胞的适应性可塑性，对于理解其增殖潜能如何在正常发育过程中受到限制以防止过度生长，同时又能在应激条件下保持可调节性，至关重要。同样重要的是，还需了解清除死亡细胞的机制，因为在发育后期观察不到 caspase 阳性细胞。可能的机制包括由专业吞噬细胞⁷²˒⁷³或神经上皮细胞⁷⁴清除凋亡细胞。这一过程中发挥作用的通路仍有待确定。
在一个未受扰动的胚胎中也观察到了 Ath5⁺ 祖细胞的自我更新。这表明这种行为并非凋亡诱导状态所独有。这一观点与此前针对未受扰动胚胎中 Ath5⁺ 祖细胞开展的大规模遗传谱系追踪研究结果一致。
胚胎中发现了由5个或更多细胞组成的罕见大型克隆（484个细胞中的0.1%）75。这一结果超出了Ath5+祖细胞典型行为所能产生的范围，因为每次神经源性分裂通常仅产生一个光感受器前体，后者进一步形成两个光感受器（PR-PR），以及一个有丝分裂后神经元（RGC/AC）或一个可形成两个水平细胞的水平细胞前体（HC-HC），因此克隆大小从不会超过4个细胞。这些罕见的大型克隆反而与本研究观察到的自我更新行为相一致。因此，我们不禁推测，此处Ath5+祖细胞表现出的可塑性反映了一种隐性细胞变异。这可能类似于隐性遗传变异，即进化生物学中一个已得到广泛确立的概念，用于描述只有在生态扰动和疾病等应激条件下才会变得重要的隐藏遗传潜能76–78。类比而言，Ath5+祖细胞的自我更新代表了一种潜在的细胞能力，可在发育受到扰动时被激活。我们在一个数十年来一直受到广泛研究的祖细胞群体中发现了这种出乎意料的行为43,44,57,60,79,80，这表明发育中中枢神经系统的祖细胞变异性远未被充分理解。我们推测，发育中枢神经系统的其他区域可能也存在类似的隐藏潜能，等待被揭示。在小鼠脑中，谱系追踪研究表明，一些细胞状态转换以及命运决定具有随机性41，这提示其他系统中的祖细胞也可能保留一定程度的可塑性，并且这种可塑性能够在应激条件下受到调节。与这一观点一致，既往研究揭示了以下现象：
小鼠胚胎大脑皮层中的细胞死亡会导致中间祖细胞增殖增加，而这些细胞通常会进行自我消耗性分裂
22
。结合本文所呈现的研究结果，这提示中枢神经系统（CNS）中间祖细胞状态的潜在可塑性可能广泛存在，并在组织分化过程中缓冲细胞损失。因此，研究发育扰动下 CNS 不同区域的变化，对于确定隐藏的细胞变异性是否以及如何促进器官发育的稳健性至关重要。
急性热应激后，Ath5+ 祖细胞的自我更新尤为显著；对于体外发育的胚胎而言，这是一种相关的物理挑战。我们发现，即使热应激导致大量细胞死亡，视网膜发育和视觉功能的获得仍能继续进行。我们推测，与 Ath5+ 祖细胞中观察到的现象类似的可塑性，或可使组织在与非预期细胞死亡相关的疾病背景下具备韧性。与这一观点一致，有研究假设，补偿性增殖，以及更广义上的发育中组织再生能力，可能有助于解释果蝇小头畸形和小眼畸形模型中不完全外显的现象
33
。类似地，在人类中与小眼畸形和视网膜缺陷相关的 X 连锁疾病里，有人提出，偏倚性 X 染色体失活可能反映了表达突变等位基因的细胞被选择性清除，以及未受影响细胞的补偿性扩增；这或可解释为何部分突变携带者几乎没有或完全没有组织缺陷
34
。迄今为止，这种补偿性扩增的细胞来源仍不清楚。我们的研究结果指出
使祖细胞可塑性成为抵御细胞丢失的一种潜在机制。验证这一设想需要开展比较研究，例如利用可进行活体成像的人视网膜类器官和脑类器官疾病模型，阐明神经祖细胞的适应性可塑性是否能够减轻病理情境下的发育缺陷。
材料与方法
斑马鱼饲养
野生型斑马鱼和转基因品系（*Danio rerio*；AB、TL 和 TU 品系）饲养于循环生命支持系统（Tecniplast）中，水温维持在 28.5 °C（pH 7.0，电导率 1000 μS/cm，光照周期为 14 h 光照、10 h 黑暗）。胚胎在含 0.00002% 亚甲蓝（MB）的 E3 培养液中，于 28.5 °C 或 32 °C 条件下培养。根据 Kimmel 等（1995）的方法，以受精后小时数（hpf）进行分期。从 6 hpf 起，每日更换培养液，并添加 0.2 mM 1-苯基-2-硫脲（PTU）（Acros Organics）以抑制色素形成。实验使用 24 至 120 hpf 的斑马鱼胚胎。所有动物实验均按照机构标准操作规程进行，并依据 DGAV（葡萄牙动物与兽医总局）的许可，以及葡萄牙第 113/2013 号法令、欧盟指令 2010/63/EU 和《德国动物福利法》开展。
斑马鱼转基因品系
视网膜体积重建采用层粘连蛋白报告品系 *Tg(lama1:lama1-sfGFP)* 和 *Tg(lama1:lama1-mKate2)*。为观察新出现的神经发生祖细胞、Ath5⁺ 神经元和光感受器（PR），采用 *Tg(ath5:GAP-RFP)*、*Tg(ath5:GAP-GFP)* 及双转基因品系 *Tg(ath5:GAP-RFP, crx:GAP-CFP)*。为观察所有视网膜神经元或视网膜祖细胞，采用三重转基因品系 *Tg(crx:GAP-CFP)*、*Tg(ath5:GAP-RFP)* 和 *Tg(ptf1a:Gal4/UAS:GAP-YFP)*，或
Tg(vsx2:GFP)品系分别用于该实验。
DNA构建与克隆
rx2:CFP-NTR表达质粒采用Gateway克隆技术（Thermo Fisher Scientific）并结合Tol2试剂盒构建。利用含CFP标签的NTR序列的pCS2载体，通过Phusion聚合酶（New England Biolabs）和带有ATT重组位点的引物进行PCR扩增，构建pENTR(L1-L2)-CFP-NTR质粒（ATT重组位点以小写字母表示）：正向引物5′-ggggacaagtttgtacaaaaaagcaggctggGAATTCCGGTCGCCACCATG-3′，反向引物5′-ggggaccactttgtacaagaaagctgggtcTAGCCGGGCAGATGCCCGGC-3′。随后，将该构建体与p5ENTR(L4-R1)-Rx2^83和pDEST(R4-R2)-Tol2pA^84进行重组，生成Tol2-Rx2:CFP-NTR序列。ath5:GFP-CAAX^79用于标记Ath5^+神经源性祖细胞。
DNA、RNA和吗啉代注射
为在斑马鱼视网膜中对细胞进行嵌合标记，将纯化的质粒DNA稀释于含0.05%酚红（Sigma-Aldrich）的ddH₂O中，并向单细胞期胚胎进行注射。浓度为15 ng/μL–30 ng/μL的构建体注射体积为0.5–1 nL。mRNA采用Thermo Fisher Scientific公司的mMESSAGE mMACHINE SP6转录试剂盒合成。为敲低p53，将靶向p53的吗啉代（Gene Tools，5′-GCGCCATTGCTTTGCAAGAATTG-3′）注射至卵黄中，每个胚胎注射量为4 ng；同时共注射GFP-Ras RNA，每个胚胎注射量为50 pg。
胚胎存活分析
将对照组和热应激组胚胎分别置于培养皿中，每皿含20–30枚胚胎。处理后每24 h对胚胎进行目视检查，并手动计数死亡胚胎后将其从培养皿中移除。
通过热应激诱导细胞死亡
为诱导发育中斑马鱼中枢神经系统（CNS）的细胞死亡，将24 hpf胚胎置于42 °C条件下处理45 min。含有30–60枚胚胎和40 ml培养液的塑料培养皿……
将添加亚甲蓝的 E3 培养液用封口膜密封后置于预热的水浴中。培养皿在室温下冷却 10–15 分钟。随后，更换胚胎培养液，加入 PTU，并将胚胎置于 28 °C 培养。
NTR/甲硝唑系统诱导细胞死亡
为进行全身性化学遗传细胞消融，在 8–32 细胞期向胚胎注射 0.5–1 nL、浓度为 250 ng/μL 的 CFP-NTR RNA，并于 32 °C 培养。为进行视网膜特异性化学遗传细胞消融，在单细胞期向胚胎注射 20 ng/μL 的 rx2:CFP-NTR DNA，并同时注射 50 ng/μL 的 Tol2 转座酶 RNA，以提高表达效率。
在 16 hpf 时，对胚胎进行脱膜处理，并于 28 °C 下在含 2% DMSO 的亚甲蓝 E3 溶液中用 10 mM 甲硝唑（Sigma Aldrich）处理 12 小时。为去除甲硝唑，更换胚胎培养液三次，加入 PTU，并将胚胎置于 28 °C 培养。
斑马鱼胚胎整体染色
手动去除斑马鱼胚胎的卵膜，并在 4 °C 下用 4% 多聚甲醛（PFA）/磷酸盐缓冲盐水（PBS）固定过夜；或在室温下以 100 rpm 振荡固定 2–3 小时。对不超过 48 hpf 的胚胎，用含 0.5% Triton X-100 的 PBS（PBS-T 0.5%）洗涤三次，每次 10 分钟。为进行通透处理，先用 PBS 清洗，再用 ddH₂O 清洗，随后在 −20 °C 下用冰冷丙酮处理 10–15 分钟。用 ddH₂O 清洗两次、PBS 清洗一次后，再用 PBS-T 0.5% 洗涤三次，每次 10 分钟。对超过 48 hpf 的胚胎，用 0.8% PBS-T 洗涤四次，每次 15 分钟。为进行通透处理，将胚胎置于冰上的 0.25% PBS 中的 Trypsin-EDTA 溶液中孵育，具体时间因发育阶段而异（72 hpf 为 17 分钟，20
96 和 120 hpf 时为最短时间）。随后用 PBS-T 0.8% 替换透化液，并将胚胎置于冰上孵育 30 min，再用 PBS-T 0.8% 冲洗两次。所有发育阶段的胚胎均以 PBS-T 0.8% 配制的 10% 驴血清封闭，在室温下轻微振荡 2–3 h，或于 4 °C 孵育过夜。将一抗和二抗稀释于 PBS-T 0.8% 配制的 1% 驴血清中。胚胎在 4 °C 下与以下一抗孵育 72 h：活化型 caspase-3（BD Biosciences 或 BD Pharmingen），1:200；Histone H2A.XS139ph（磷酸化 Ser139，GeneTex），1:200；Zpr-1（ZIRC），1:200；Zn-5（ZIRC），1:50；抗 GFP（Proteintech），1:100；抗 HuC/HuD（Invitrogen），1:250。胚胎用 PBS-T 0.8% 洗涤五次，每次 30 min，随后与适当的荧光标记二抗（Molecular Probes，1:500）和 DAPI（1:1,000，1 µg/mL；Thermo Fisher Scientific）孵育 48 h。最后，胚胎用 PBS-T 0.8% 洗涤四次，每次 15 min，并于 4 °C 下保存于 PBS 中，直至成像。
图像采集
光片成像
按照既往方法⁸⁵，使用配备 ZEN 2014 SP1 软件（v9.2.8.60，黑色版）的 Light-sheet Z.1（Carl Zeiss Microscopy）对 Ath5⁺ 神经发生祖细胞进行活体成像。将胚胎包埋于以 E3 培养液配制的 0.6% 低熔点琼脂糖（Sigma-Aldrich）中，并补加 240 μg/ml MS-222（Sigma-Aldrich）。样品腔内加入补加了 0.04% MS-222 和 30.4 μg/ml 1-苯基-2-硫脲的 E3 培养液，并在成像过程中维持于 28.5 °C。
使用 10×/0.2 物镜（Carl Zeiss Microscopy）进行双侧照明，每 5 min 采集一次覆盖每只眼睛完整体积的单视角图像（约 150 个 Z 轴切片，步长为 1 μm），持续最长可达 48 h。
采用 Plan-Apochromat 20×/1.0 W 物镜（Carl Zeiss Microscopy）和两台 Edge 5.5 或 4.2 sCMOS 相机（PCO）进行成像检测。
激光扫描共聚焦显微镜
采用配备两个 PMT 检测器和一个 GaAsP 检测器的 Zeiss LSM980 Airyscan2 倒置显微镜对去卵膜样品进行成像。视网膜成像使用 Zeiss 40×/1.1 C-Apochromat 水浸物镜，全胚胎成像使用 10×/EC Plan-Neofluar 物镜。将胚胎包埋于玻底培养皿（35 mm；MatTek Corporation）中的 1% 低熔点琼脂糖内，并在室温下进行成像。显微镜采用 ZEN Blue v3.3（Zeiss）软件进行控制。采集的 Z 层序列覆盖视网膜的中心区域或整个视网膜体积（约 50 个 Z 层，层间距为 1–1.5 μm）。
图像处理与分析
使用 ZEN Black 和/或 Fiji 对图像数据进行处理。采用 Manual Drift Correction 插件（
http://imagej.net/Manual_drift_correction_plugin
，ImageJ）校正活细胞成像数据的空间漂移。使用 Imaris（v10.0.0）对数据进行三维可视化。
细胞追踪
根据 ath5 报告基因的表达以及祖细胞形态学特征（如存在顶端和基底端连接）鉴定神经源性祖细胞。在嵌合报告基因表达产生的稀疏标记有助于追踪单个细胞的情况下，通过检测
Tg(ath5:GAP-RFP)
信号进一步确认祖细胞身份。利用 Fiji，对时间序列数据集中子堆栈最大投影图像中的 Ath5+ 细胞后代进行追踪，从细胞出生开始，直至其发生细胞分裂或完成最终定位。通过使用 ImageJ 插件 MtrackJ（
https://imagej.net/plugins/mtrackj
）描绘细胞中心获得细胞轨迹。沿 y 轴的轨迹坐标以细胞出生后的初始位置为基准进行偏移。
视网膜体积重建
为重建视网膜表面，对使用 Light-sheet Z.1 成像的活体及固定胚胎中 Tg(lama1:lama1-sfGFP)⁸⁶ 或 Tg(lama1:lama1-mKate2)⁸⁶ 的信号进行手动描绘，每隔 5–10 个切片描绘一次，覆盖整个视网膜体积。使用 IMARIS 软件计算分割表面的体积。
视网膜厚度测量
使用 Fiji 直线工具，在对照组和热应激组 72 hpf 视网膜的共聚焦 Z-stack 图像上手动测量视网膜厚度。采用 Tg(ptf1a:Gal4; UAS:YFP; ath5:GAP-RFP; and crx:GAP-CFP) 品系区分视网膜各层。在组织中央区域的三个不同 Z 平面上测量视网膜厚度，并计算平均值，作为每个生物学重复的测量结果。外核层（ONL）定义为视网膜顶端表面至外网状层之间的距离；内核层（INL）定义为内网状层至外网状层之间的距离；神经节细胞层（GCL）定义为内网状层至基底膜之间的层，方法同前⁴⁴。
视觉背景适应实验
为评估视网膜的光感知能力，我们参照文献⁶⁶、⁶⁷、⁸⁷所述方法，对视觉背景适应（VBA）实验进行了调整。将 4 dpf 的对照组和热应激组幼鱼分为两组：一组在白色背景下、光照条件下饲养过夜；另一组在黑色背景下、黑暗条件下饲养过夜。次日早晨，在正常光照周期开始后立即评估 VBA 反应。用于成像和 VBA 定量的动物以 MS-222 安乐死后，立即置于 4% PFA 中固定 1 小时。为评估黑色素细胞的形态，将 5 dpf 幼鱼用 PBS 清洗，然后……
在体视显微镜下成像。
定量与统计分析
细胞运动动力学分析
使用 Excel（Microsoft）和开源计算机程序 DiPer^88^，对顶端有丝分裂前 25 min 内的运动进行分析并计算 MSD。为估计方向持久性，根据 MSD 与时间间隔的双对数图斜率获得 α 值。对于光感受器和非神经源性多能祖细胞，采用相同方法对轨迹进行重新分析，所用数据此前已由本实验室发表^43,60^。
克隆大小估算
为估计热应激视网膜中 Ath5^+ 神经源性祖细胞的扩增情况，我们根据观察到的各分裂模式的相对频率（图 S2B）及其预期克隆大小进行了分析。对于经典的神经源性分裂，我们将细胞输出设定为 3 个：一个产生 2 个光感受器的光感受器前体细胞（PR-PR），以及一个有丝分裂后神经元（RGC/AC）。由于水平细胞前体仅占视网膜神经元的很小比例^44^，因此未将其贡献纳入分析。对于一个子细胞发生自我更新的分裂，其克隆大小设定为 4 个细胞（一个已承诺的前体细胞和两个神经元）；对于两个子细胞均发生自我更新的分裂，其预期输出设定为 6 个细胞（两个已承诺的前体细胞和两个神经元）。随后，根据观察到的各分裂模式的频率，对上述克隆大小进行加权求和，计算平均预期克隆产出。
统计学
统计检验使用 GraphPad Prism v.9.4.0 完成。所有统计检验均在图注或表注以及误差线的定义中予以说明。同样，P 值和样本量均报告于图注、表注或专门的……
表格。
稿件准备过程中生成式人工智能和人工智能辅助技术的声明
在本项工作准备期间，作者使用 Claude 4.6 对稿件的拼写、语法和表述清晰度进行了编辑。作者根据需要对生成内容进行了审阅和修改，并对稿件内容承担全部责任。
作者贡献
C. Figueiredo：概念构思、数据整理、形式分析、调查、方法学、验证、可视化、撰写（初稿）。G. Tellkamp：负责与 p53 敲低实验相关的调查和方法学工作。C. Norden：概念构思、经费获取、项目管理、资源提供、撰写（初稿）和监督。M. Rocha-Martins：概念构思、经费获取、资源提供、调查、方法学、撰写（初稿）和监督。
利益声明
作者声明不存在利益冲突。
补充材料
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图 S1。
热应激在发育中的斑马鱼视网膜内诱导瞬时性细胞凋亡。
(A)
对照组（蓝色；n=80）和热应激组（粉色；n=80）胚胎在 48 hpf 和 72 hpf 时的存活胚胎百分比（分别为热应激后 1 天和 2 天）。每条线代表一个重复实验（对照组和热应激组各 3 个重复）。
(B)
48 hpf 和 72 hpf 时对照组及热应激胚胎的明场图像。
(C)
热应激后 0 h（25 hpf）、4 h（28 hpf）、10 h（34 hpf）、24 h（48 hpf）和 48 h（72 hpf）时，对照组（左）和热应激组（右）视网膜中凋亡细胞的空间分布。DAPI（灰色）标记细胞核。活化半胱天冬酶 3 标记凋亡细胞；颜色表示 Z 轴深度，查找表显示 Z 轴深度的最小值和最大值。比例尺：150 μm（B），50 μm（C）。
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图 S2。
热应激视网膜中的 Ath5+ 神经源性祖细胞经历自我更新分裂。
(A)
热应激后 Ath5+ 祖细胞自我更新分裂的轨迹（n=56 个细胞，N=14 个胚胎）。绘制了细胞与顶端侧距离随时间的变化。
(B)
热应激视网膜中，对所追踪 Ath5+ 祖细胞的一个或两个子细胞进行的典型分裂和自我更新分裂的比例（n=72 个细胞，N=14 个胚胎）。
(C)
热应激胚胎中，一个自我更新的 Ath5+ 神经源性祖细胞发生分裂，其子代分化为 PRpr。Tg(ath5:GAP-RFP)（灰色）标记神经源性祖细胞，Tg(crx:GAP-CFP) 标记 PRpr。虚线框表示下方所示放大区域。在每个时间点，左图和右图分别显示合并的 RFP/CFP 通道和 CFP 通道。
(D)
热应激胚胎中，一个自我更新的 Ath5+ 神经源性祖细胞发生分裂，其子代随后进行第二次自我更新分裂。Tg(ath5:GFP-CAAX) 标记 Ath5+ 神经源性祖细胞；颜色表示荧光强度。查找表显示信号值的最小值和最大值。箭头表示细胞分裂。
(C-D)
虚线表示顶端侧。时间以小时:分钟表示。比例尺，10 μm（C-D），放大区域为 2 μm（C）。
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图 S3。
使用 NTR/Mtz 系统进行化学遗传学消融会诱导 DNA 损伤。
(A)
对照组（上）和经 10 mM Mtz 处理的（下）CFP-NTR RNA 注射胚胎的视网膜。Mtz 处理时间为 16–28 hpf。DAPI（灰色）标记细胞核，γH2AX 标记 DNA 双链断裂；颜色表示荧光强度。白色方框标出放大区域（右）。比例尺，50 μm；放大区域为 10 μm。
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图 S4。
热应激视网膜生长并形成投射至脑部的视神经。
(A)
对照组（蓝色，n=25）和热应激组（粉色，n=25）胚胎在热应激后8至96小时（32至120 hpf）期间的眼面积测量队列。每条线代表一个胚胎。眼面积随时间的变化绘制如图。
(B)
5 dpf时，对照组和热应激组胚胎中由
Tg(ath5:GAP-RFP)
（灰色）标记的视神经及投射至顶盖的神经元突起的代表性图像。比例尺：50 μm。
视频图例
视频 S1。热应激视网膜中的Ath5+神经源性祖细胞进行自我更新式分裂，相关内容见
图2
。
第1部分。
对照视网膜中Ath5+祖细胞的典型分裂，产生一个基底神经元和一个PRpr。ath5:GFP-CAAX（灰色）标记早期神经源性祖细胞及其子代。
第2至5部分
热应激诱导的凋亡对Ath5+祖细胞分裂的影响。
第2部分。
Ath5+祖细胞的自我更新式分裂。
Tg(ath5:GAP-RFP)
（灰色）标记早期神经源性祖细胞及其子代。
第3部分。
Ath5+祖细胞的典型分裂。
Tg(ath5:GAP-RFP)
（灰色）标记早期神经源性祖细胞及其子代，
Tg(crx:GAP-CFP)
标记PRpr；颜色表示荧光强度。查找表显示信号值的最小值和最大值。
第4部分。
Ath5+祖细胞的自我更新式分裂。自我更新式分裂产生的一个子细胞随后进行第二次典型的Ath5+分裂，产生两个CRX+光感受器细胞和一个基底神经元。ath5:GAP-RFP（灰色）标记早期神经源性祖细胞及其子代，
Tg(crx:GAP-CFP)
标记PRpr；颜色表示荧光强度。查找表显示信号值的最小值和最大值。
第5部分。
热应激视网膜中Ath5+祖细胞的自我更新式分裂。自我更新式分裂产生的子细胞……
分裂（红点）经历第二次自我更新分裂。ath5:GFP-CAAX（灰色）标记早期神经发生祖细胞及其后代。
圆点标记被追踪的细胞。时间以小时:分钟表示。比例尺为 10 μm。
视频 S2。Ath5+ 神经发生祖细胞的自我更新分裂是对细胞凋亡的非细胞自主性响应，相关内容见图 3。
第 1 部分。
CFP-NTR RNA 注射胚胎中 Ath5+ 祖细胞的自我更新分裂。Tg(ath5:GAP-RFP)（灰色）标记早期神经发生祖细胞及其后代。
第 2 部分。
rx2:CFP-NTR DNA 注射胚胎中 Ath5+ NTR 祖细胞的自我更新分裂。Tg(ath5:GAP-RFP)（灰色）标记早期神经发生祖细胞及其后代。
第 3 部分。
对照视网膜中 Ath5+ 祖细胞的自我更新分裂。自我更新分裂产生的子细胞随后经历第二次典型的 Ath5+ 分裂，产生两个光感受器和一个基底神经元。ath5:GFP-CAAX（灰色）和 Tg(ath5:GAP-RFP) 标记早期神经发生祖细胞及其后代；颜色表示荧光强度。查找表显示信号值的最小值和最大值。
圆点标记被追踪的细胞。时间以小时:分钟表示。比例尺为 10 μm。
致谢
我们感谢 C. Norden 和 M. Rocha-Martins 实验室就本项目展开讨论；感谢 João Coelho 提供实验支持；感谢古尔班基安分子医学研究所（GIMM）和马克斯·普朗克分子生物医学研究所的显微成像设施与鱼类设施提供技术支持。C. Figueiredo 是 Integrative Biology and Biomedicine 博士项目的成员，并获得葡萄牙科学技术基金会博士奖学金资助（UI/BD/152255/2021）。C. Norden 获得 Calouste Gulbenkian 基金会-IGC 以及欧洲研究理事会（ERC）的资助；后者通过欧盟“地平线 2020”研究与创新计划提供（资助编号
协议编号819046），以及葡萄牙科学技术基金会CEEC项目（2023.07063.CEECIND/CP2854/CT0002）。G. Tellkamp是CiM-IMPRS研究生院成员，并获得马克斯·普朗克学会的支持。M. Rocha-Martins获得分子生物医学马克斯·普朗克研究所和马克斯·普朗克学会的支持。
资助方信息声明
葡萄牙科学技术基金会，
，UI/BD/152255/2021
卡洛斯特·古尔本基安基金会，
欧盟“地平线2020”研究与创新计划，819046
葡萄牙科学技术基金会CEEC，2023.07063.CEECIND/CP2854/CT0002
马克斯·普朗克学会，
参考文献
1.
Hamdoun，A.，和Epel，D.（2007）。
在不断变化的世界中的胚胎稳定性与脆弱性。
《美国国家科学院院刊》104，1745–1750。
doi：10.1073/pnas.0610108104。
开放URL
摘要
免费全文
2.
Gilbert，S.F.（2001）。
《生态发育生物学：发育生物学走进现实世界》。
《发育生物学》233，1–12。
doi：10.1006/dbio.2001.0210。
开放URL
交叉引用
PubMed
科学引文索引
3.
Waddington，C.H.（1942）。
发育的渠道化与获得性状的遗传。
《自然》150，563–565。
doi：10.1038/150563a0。
开放URL
交叉引用
4.
Wong，M.，和Gilmour，D.（2020）。
重回正轨：利用发育渠道化揭示发育稳健性的机制。
《遗传学与发育当前观点》63，53–60。
doi：10.1016/j.gde.2020.04.001。
开放URL
交叉引用
PubMed
5.
González-Blanco，A.，Acuña-Higaki，A.，Boettger，D.，Joy，J.，和Milán，M.（2026）。
蛋白质稳态失衡与线粒体功能障碍促进染色体不稳定性诱导的小头畸形。
《自然·通讯》
doi：
10.1038/s41467-026-70521-0
开放链接
CrossRef
6.
Marthiens，
V.，
Rujano，
M.A.，
Pennetier，
C.，
Tessier，
S.，
Paul-Gilloteaux，
P.，以及
Basto，
R.（
2013
）。
中心体扩增导致小头畸形
。
《自然细胞生物学》
15，
731–740。
doi：
10.1038/ncb2746
开放链接
CrossRef
PubMed
Web of Science
7.
Miao，
H.，
Wu，
H.，
Zhu，
Y.，
Kong，
L.，
Yu，
X.，
Zeng，
Q.，
Chen，
Y.，
Zhang，
Q.，
Guo，
P.，以及
Wang，
D.（
2021
）。
妊娠胎儿器官发生期环境温度变异相关的先天性异常：基于478万例出生记录的证据
。
《总体环境科学》
798，
149305。
doi：
10.1016/j.scitotenv.2021.149305
开放链接
CrossRef
PubMed
8.
Dorrity，
M.W.，
Saunders，
L.M.，
Duran，
M.，
Srivatsan，
S.R.，
Barkan，
E.，
Jackson，
D.L.，
Sattler，
S.M.，
Ewing，
B.，
Queitsch，
C.，
Shendure，
J.，
等（
2023
）。
蛋白质稳态决定不同胚胎细胞类型对温度的差异敏感性
。
《细胞》
186，
5015–5027.e12。
doi：
10.1016/j.cell.2023.10.013
开放链接
CrossRef
PubMed
9.
Menon，
T.，以及
Nair，
S.（
2018
）。
早期发育过程中的短暂耐受窗口可减轻热对斑马鱼胚胎的致畸效应
。
《发育动力学》
247，
992–1004。
doi：
10.1002/dvdy.24640
开放链接
CrossRef
PubMed
10.
Wang，
R.，
Zhang，
H.，
Du，
J.，以及
Xu，
J.（
2019
）。
利用体内应激颗粒报告系统揭示斑马鱼胚胎的耐热性
。
《细胞科学杂志》
132，
jcs234807。
doi：
10.1242/jcs.234807
开放链接
摘要
/
免费全文
11.
Hughes，
S.，
Vrinds，
I.，
de Roo，
J.，
Francke，
C.，
Shimeld，
S.M.，
Woollard，
A.，以及
Sato，
A.（
2019
）。
DnaJ伴侣蛋白参与表型缓冲
。
《实验动物学杂志：生态学、综合生理学分册》
331，
201–212。
doi：
10.1002/jez.2254
开放链接
CrossRef
- McClellan, A. J., Tam, S., Kaganovich, D., 和 Frydman, J.（2005）。蛋白质质量控制：伴侣蛋白清除异常构象。《自然·细胞生物学》，7，736–741。doi: 10.1038/ncb0805-736。
CrossRef PubMed Web of Science
- Saibil, H.（2013）。执行蛋白质折叠、解折叠和解聚的伴侣蛋白机器。《自然综述：分子细胞生物学》，14，630–642。doi: 10.1038/nrm3658。
CrossRef PubMed
- Cannavò, E., Khoueiry, P., Garfield, D. A., Geeleher, P., Zichner, T., Gustafson, E. H., Ciglar, L., Korbel, J. O., 和 Furlong, E. E. M.（2016）。影子增强子是发育调控网络的普遍特征。《当代生物学》，26，38–51。doi: 10.1016/j.cub.2015.11.034。
CrossRef PubMed
- Sokolowski, T. R., Erdmann, T., 和 ten Wolde, P. R.（2012）。相互抑制增强基因表达边界的陡峭度和精确性。《PLoS计算生物学》，8，e1002654。doi: 10.1371/journal.pcbi.1002654。
CrossRef PubMed
- Akieda, Y., Ogamino, S., Furuie, H., Ishitani, S., Akiyoshi, R., Nogami, J., Masuda, T., Shimizu, N., Ohkawa, Y., 和 Ishitani, T.（2019）。细胞竞争校正嘈杂的 Wnt 形态发生素梯度，从而实现斑马鱼胚胎中的稳健模式形成。《自然通讯》，10，4710。doi: 10.1038/s41467-019-12609-4。
CrossRef PubMed
- Jelier, R., Kruger, A., Swoger, J., Zimmermann, T., 和 Lehner, B.（2016）。补偿性细胞运动使胚胎发育过程中的机械形变具有稳健性。《细胞系统》，3，160–171。doi: 10.1016/j.cels.2016.07.005。
CrossRef PubMed
- Pinet, K., Deolankar, M., Leung, B., 和 McLaughlin, K. A.（2019）。颅面……的适应性校正。
前变态期非洲爪蟾（*Xenopus laevis*）蝌蚪中的缺陷涉及非甲状腺激素依赖性组织重塑。
《发育》
146，dev175893。
doi：10.1242/dev.175893。
- Huh, J. R.、Guo, M. 和 Hay, B. A.（2004）。果蝇翅盘中由细胞死亡诱导的代偿性增殖需要顶端细胞死亡半胱天冬酶 Dronc 发挥非凋亡作用。《当代生物学》14，1262–1266。
doi：10.1016/j.cub.2004.06.015。
- Kondo, S.、Senoo-Matsuda, N.、Hiromi, Y. 和 Miura, M.（2006）。DRONC 协调细胞死亡与代偿性增殖。《分子与细胞生物学》26，7258–7268。
doi：10.1128/MCB.00183-06。
- Milán, M.、Campuzano, S. 和 García-Bellido, A.（1997）。果蝇翅盘中细胞死亡的发育参数。《美国国家科学院院刊》94，5691–5696。
doi：10.1073/pnas.94.11.5691。
- Freret-Hodara, B.、Cui, Y.、Griveau, A.、Vigier, L.、Arai, Y.、Touboul, J. 和 Pierani, A.（2017）。胚胎大脑皮层中脑室外增殖增强可补偿细胞死亡。《大脑皮层》27，4701–4718。
doi：10.1093/cercor/bhw264。
- Fan, Y. 和 Bergmann, A.（2008）。果蝇眼组织中增殖期与分化期组织通过不同机制实现凋亡诱导的代偿性增殖。《发育细胞》14，399–410。
doi：10.1016/j.devcel.2008.01.003。
- Ryoo, H. D.、Gorenc, T. 和 Steller, H.（2004）。凋亡细胞可通过 JNK 和 Wingless 信号通路诱导代偿性细胞增殖。《发育细胞》7，491–501。
DOI：10.1016/j.devcel.2004.08.019。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
- Buss, R.R., Sun, W. 和 Oppenheim, R.W.（2006）。程序性细胞死亡在神经系统发育中的适应性作用。《神经科学年度评论》，29，1–35。DOI：10.1146/annurev.neuro.29.051605.112800。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
- Homem, C.C.F., Repic, M. 和 Knoblich, J.A.（2015）。神经干细胞与祖细胞的增殖调控。《自然评论：神经科学》，16，647–659。DOI：10.1038/nrn4021。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
- Biehlmaier, O., Neuhauss, S.C. 和 Kohler, K.（2001）。斑马鱼视网膜发育过程中细胞凋亡的起始时间及进程。《细胞与组织研究》，306，199–207。DOI：10.1007/s004410100447。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
- Vecino, E., Hernandez, M. 和 Garcia, M.（2004）。脊椎动物视网膜发育过程中的细胞死亡。《国际发育生物学杂志》，48，965–974。DOI：10.1387/ijdb.041891ev。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
- Yoshida, H., Kong, Y.-Y., Yoshida, R., Elia, A.J., Hakem, A., Hakem, R., Penninger, J.M. 和 Mak, T.W.（1998）。Apaf1 是线粒体凋亡通路及脑发育所必需的。《细胞》，94，739–750。DOI：10.1016/S0092-8674(00)81733-X。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
- Garcez, P.P., Loiola, E.C., Madeiro da Costa, R., Higa, L.M., Trindade, P., Delvecchio, R., Nascimento, J.M., Brindeiro, R., Tanuri, A. 和 Rehen, S.K.（2016）。寨卡病毒抑制人类神经球和脑类器官的生长。《科学》，352，816–818。DOI：10.1126/science.aaf6116。
OpenUrl
摘要 / 免费全文
- Matos-Rodrigues, G.E., Tan, P.B., Rocha-Martins, M., Charlier, C.F., Gomes, A.L., Cabral-Miranda, F.,
Grigaravicius, P., Hofmann, T.G., Frappart, P.-O. 和 Martins, R.A.P.（2020）。祖细胞死亡驱动 ATRIP-Seckel 综合征小鼠模型中的视网膜发育异常和神经元变性。《疾病模型与机制》，13，dmm045807。doi: 10.1242/dmm.045807。OpenUrl 摘要／免费全文
- 欧洲罕见病登记平台。https://eu-rd-platform.jrc.ec.europa.eu。
- Lim, N.R., Shohayeb, B., Zaytseva, O., Mitchell, N., Millard, S.S., Ng, D.C.H. 和 Quinn, L.M.（2017）。小头畸形蛋白 WDR62 的胶质细胞特异性功能及其与有丝分裂激酶 AURKA 的相互作用，对于果蝇脑部发育至关重要。《干细胞报告》，9，32–41。doi: 10.1016/j.stemcr.2017.05.015。
- van Rahden, V.A., Fernandez-Vizarra, E., Alawi, M., Brand, K., Fellmann, F., Horn, D., Zeviani, M. 和 Kutsche, K.（2015）。编码线粒体呼吸链复合体 I 组分的 NDUFB11 基因突变导致伴线状皮肤缺损的小眼畸形综合征。《美国人类遗传学杂志》，96，640–650。doi: 10.1016/j.ajhg.2015.02.002。
- Diaz, C. 和 Glover, J.C.（1996）。后脑神经管调节性再生后形成的模式适当。《发育》，122，3095–3105。doi: 10.1242/dev.122.10.3095。
- Halasi, G., Søviknes, A.M., Sigurjonsson, O. 和 Glover, J.C.（2012）。与脊髓神经管调节性再生相关的增殖及发育模式重现。《发育生物学》，365，118–132。doi: 10.1016/j.ydbio.2012.02.012。
- Lindenhofer, D., Haendeler, S., Esk, C., Littleboy, J.B., Brunet Avalos, C., Naas, J., Pflug, F.G., van de…
Ven, E.G.P., Reumann, D., Baffet, A.D., et al.（2024）。脑类器官呈现动态克隆生长和可调控的组织补充。《自然·细胞生物学》，26，710–718。doi：10.1038/s41556-024-01412-z。OpenUrl CrossRef PubMed
- Dzafic, E., Strzyz, P.J., Wilsch-Bräuninger, M., 和 Norden, C.（2015）。中心粒扩增影响斑马鱼神经祖细胞的增殖和存活，但不影响其分化。《细胞报告》，13，168–182。doi：10.1016/j.celrep.2015.08.062。OpenUrl CrossRef PubMed
- Boije, H., Rulands, S., Dudczig, S., Simons, B.D., 和 Harris, W.A.（2015）。转录因子的独立概率性激活：斑马鱼视网膜克隆变异性的一个范式。《发育细胞》，34，532–543。doi：10.1016/j.devcel.2015.08.011。OpenUrl CrossRef PubMed
- He, J., Zhang, G., Almeida, A.D., Cayouette, M., Simons, B.D., 和 Harris, W.A.（2012）。可变克隆如何构建不变的视网膜。《神经元》，75，786–798。doi：10.1016/j.neuron.2012.06.033。OpenUrl CrossRef PubMed Web of Science
- Llorca, A., Ciceri, G., Beattie, R., Wong, F.K., Diana, G., Serafeimidou-Pouliou, E., Fernández-Otero, M., Streicher, C., Arnold, S.J., Meyer, M., 等（2019）。神经发生的随机框架构成新皮层细胞构筑的组装基础。《eLife》，8，e51381。doi：10.7554/eLife.51381。OpenUrl CrossRef PubMed
- Matejčić, M., Salbreux, G., 和 Norden, C.（2018）。非细胞自主性的肌动蛋白重分布促进视网膜的各向同性生长。《PLOS生物学》，16，e2006018。doi：10.1371/journal.pbio.2006018。OpenUrl CrossRef PubMed
- Nerli, E., Rocha-Martins, M., 和 Norden, C.（2020）。视网膜的非对称神经源性命运决定。
祖细胞通过内吞途径涉及 Notch 信号
。
eLife
9
，e60462
。
doi:
10.7554/eLife.60462
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
44.
↵
Nerli
，
E.
，
Kretzschmar
，
J.
，
Bianucci
，
T.
，
Rocha-Martins
，
M.
，
Zechner
，
C.
，和
Norden
，
C
。（
2023
）。
确定性和概率性命运决策共存于同一视网膜细胞谱系中
。
EMBO J. n/a
，e112657
。
doi:
10.15252/embj.2022112657
。
OpenUrl
CrossRef
45.
↵
Weber
，
I.P.
，
Ramos
，
A.P.
，
Strzyz
，
P.J.
，
Leung
，
L.C.
，
Young
，
S.
，和
Norden
，
C
。（
2014
）。
随着组织成熟过程中组织结构发生变化，斑马鱼视网膜中已定向分化前体细胞的有丝分裂位置和形态随之适应
。
Cell Rep
。
7
，386
–
397
。
doi:
10.1016/j.celrep.2014.03.014
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
46.
↵
Edwards
，
M.J
。（
1998
）。
细胞凋亡、热休克反应、热疗、出生缺陷、疾病与癌症：它们之间的共同联系是什么？
Cell Stress Chaperones
3
，213
–
220
。
doi:
10.1379/1466-1268(1998)003%3C0213:athsrh%3E2.3.co;2
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
47.
↵
Khan
，
V.R.
，和
Brown
，
I.R
。（
2002
）。
热疗对成年及发育期大鼠脑、睾丸和胸腺中细胞死亡诱导的影响
。
Cell Stress Chaperones
7
，73
–
90
。
doi:
10.1379/1466-1268(2002)007%3C0073:teohot%3E2.0.co;2
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
48.
↵
Sanger
，
T.J.
，
Harding
，
L.
，
Kyrkos
，
J.
，
Turnquist
，
A.J.
，
Epperlein
，
L.
，
Nunez
，
S.A.
，
Lachance
，
D.
，
Dhindsa
，
S.
，
Stroud
，
J.T.
，
Diaz
，
R.E.
，
Jr
。
，
等
（
2021
）。
环境热应激诱导爬行动物神经元细胞死亡和发育畸形
。
Integr. Org. Biol
。
3
，obab033
。
doi:
10.1093/iob/obab033
。
OpenUrl
CrossRef
49.
↵
Yabu
，
T.
，
Todoriki
，
S.
，和
Yamashita
，
M
。（
2001
）。
热休克、紫外线和 γ 射线诱导的应激性细胞凋亡
通过检测斑马鱼胚胎中半胱天冬酶活性增加和全胚胎原位TUNEL染色发现的辐照效应
《Fish. Sci》
67，
333–340。
doi：
10.1046/j.1444-2906.2001.00233.x
OpenUrl
CrossRef
50.
↵
Bellmann，
K.，
Charette，
S.J.，
Nadeau，
P.J.，
Poirier，
D.J.，
Loranger，
A.，以及
Landry，
J。（
2010）。
热休克诱导细胞凋亡的机制取决于细胞对胁迫的先天敏感性
《Cell Stress Chaperones》
15，
101–113。
doi：
10.1007/s12192-009-0126-9。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
51.
Takahashi，
A.，
Matsumoto，
H.，
Nagayama，
K.，
Kitano，
M.，
Hirose，
S.，
Tanaka，
H.，
Mori，
E.，
Yamakawa，
N.，
Yasumoto，
J.，
Yuki，
K.，
等。
（2004）。
双链断裂参与热诱导细胞杀伤的证据
《Cancer Res.》
64，
8839–8845。
doi：
10.1158/0008-5472.CAN-04-1876。
OpenUrl
摘要
/
免费
全文
52.
↵
Warters，
R.L.，以及
Brizgys，
L.M.（
1987）。
高热温度处理细胞后DNA中脱嘌呤位点的诱导
《J. Cell. Physiol.》
133，
144–150。
doi：
10.1002/jcp.1041330118。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
53.
↵
Robu，
M.E.，
Larson，
J.D.，
Nasevicius，
A.，
Beiraghi，
S.，
Brenner，
C.，
Farber，
S.A.，以及
Ekker，
S.C.（
2007）。
通过基因敲低技术激活p53
《PLOS Genet.》
3，
e78。
doi：
10.1371/journal.pgen.0030078。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
54.
↵
Ho H’ng，
C.，
Amarasinghe，
S.L.，
Zhang，
B.，
Chang，
H.，
Qu，
X.，
Powell，
D.R.，以及
Rosello-Diez，A.（
2024）。
胎鼠肢体短暂性细胞死亡后软骨细胞结构的代偿性生长与恢复
《Nat. Commun.》
15，
2940。
doi：
10.1038/s41467-024-47311-7。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
55.
↵
Young，
R.M.，
Hawkins，
T.A.，
Cavodeassi，
F.，
Stickney，
H.L.，
Schwarz，
Q.，
Lawrence，
L.M.，
Wierzbicki，
C.，
Cheng，B.Y.，Luo，J.，Ambrosio，E.M.，等（2019）。尽管 Tcf7l1a 在眼场特化过程中发挥作用，代偿性生长使其在眼形成过程中并非必需。eLife 8，e40093。doi：10.7554/eLife.40093。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- ↵ Brown，N.L.，Kanekar，S.，Vetter，M.L.，Tucker，P.K.，Gemza，D.L.，以及 Glaser，T.（1998）。Math5 编码一种在视网膜神经发生早期阶段表达的小鼠碱性螺旋-环-螺旋转录因子。Development 125，4821–4833。doi：10.1242/dev.125.23.4821。OpenUrl；Abstract
- ↵ Poggi，L.，Vitorino，M.，Masai，I.，以及 Harris，W.A.（2005）。体内斑马鱼视网膜中对神经谱系和分裂方式的影响。J. Cell Biol. 171，991–999。doi：10.1083/jcb.200509098。OpenUrl；Abstract；/FREE Full Text
- ↵ Zolessi，F.R.，Poggi，L.，Wilkinson，C.J.，Chien，C.-B.，以及 Harris，W.A.（2006）。体内视网膜神经节细胞的极化与定向。Neural Develop. 1，2。doi：10.1186/1749-8104-1-2。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- ↵ Icha，J.，Weber，M.，Waters，J.C.，以及 Norden，C.（2017）。活体荧光显微镜中的光毒性及其避免方法。BioEssays 39，1700003。doi：10.1002/bies.201700003。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- ↵ Rocha-Martins，M.，Nerli，E.，Kretzschmar，J.，Weigert，M.，Icha，J.，Myers，E.W.，以及 Norden，C.（2023）。神经元迁移避免了视网膜形态发生过程中的空间竞争。Nature 620，615–624。doi：10.1038/s41586-023-06392-y。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- ↵ Nerli，E.（2023）。斑马鱼视网膜神经发生过程中祖细胞谱系及其调控机制的研究。
- ↵ Vitorino，M.，Jusuf，P.R.，Maurus，D.，Kimura，Y.，Higashijima，S.，以及 Harris，W.A。
（2009）。斑马鱼视网膜中的 Vsx2：通过去抑制形成受限谱系。*神经发育*。4，14。doi：10.1186/1749-8104-4-14。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- Clark，A.J.，Iwobi，M.，Cui，W.，Crompton，M.，Harold，G.，Hobbs，S.，Kamalati，T.，Knox，R.，Neil，C.，Yull，F.，等（1997）。表达大肠杆菌硝基还原酶的转基因小鼠中的选择性细胞消融。*基因治疗*。4，101–110。doi：10.1038/sj.gt.3300367。OpenUrl；CrossRef；PubMed
- Curado，S.，Stainier，D.Y.R.，以及 Anderson，R.M.（2008）。斑马鱼中由硝基还原酶介导的细胞/组织消融：一种具有时空控制特性的消融方法及其在发育与再生研究中的应用。*自然实验方法*。3，948–954。doi：10.1038/nprot.2008.58。OpenUrl；CrossRef；PubMed；Web of Science
- Almeida，A.D.，Boije，H.，Chow，R.W.，He，J.，Tham，J.，Suzuki，S.C.，以及 Harris，W.A.（2014）。命运谱：研究发育中的斑马鱼视网膜的新方法。*发育*。141，1971–1980。doi：10.1242/dev.104760。OpenUrl；摘要/免费全文
- Prakash，B.A.，以及 Toro，C.P.（2019）。调节斑马鱼伪装反应通路，以阐明神经内分泌对一种稳健且可量化行为的控制。*本科生神经科学教育杂志*。18，A57–A64。OpenUrl
- Slanchev，K.，Laurell，E.，Arnold-Ammer，I.，Kuehn，E.，Pandiarajan，U.，以及 Baier，H.（2025）。斑马鱼中依赖视网膜的光神经内分泌通路的分子界定。*当代生物学*。doi：10.1016/j.cub.2025.10.025。OpenUrl；CrossRef
- Gomes，F.L.A.F.，Zhang，G.，Carbonell，F.，Correa，J.A.，Harris，W.A.，Simons，B.D.，以及 Cayouette，M.（2011）。大鼠视网膜祖细胞的重建。
体外细胞谱系研究揭示了细胞命运决定具有出乎意料的随机性。
《发育》
138
，227
–
235
。
doi：
10.1242/dev.059683
。
OpenUrl
摘要
/
免费全文
69.
↵
Iribarne
，
M.
，
Hyde
，
D.R.
，和
Masai
，
I
。（
2019
）。
TNFα诱导穆勒胶质细胞从非增殖性胶质增生转变为再生反应：突变斑马鱼呈现慢性光感受器变性
。
《细胞与发育生物学前沿》
。
7
。
doi：
10.3389/fcell.2019.00296
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
70.
↵
Nelson
，
C.M.
，
Ackerman
，
K.M.
，
O’Hayer
，
P.
，
Bailey
，
T.J.
，
Gorsuch
，
R.A.
，和
Hyde
，
D.R
。（
2013
）。
肿瘤坏死因子-α由死亡的视网膜神经元产生，并且是斑马鱼视网膜再生过程中穆勒胶质细胞增殖所必需的
。
《神经科学杂志》
。
33
，6524
–
6539
。
doi：
10.1523/JNEUROSCI.3838-12.2013
。
OpenUrl
摘要
/
免费全文
71.
↵
Kawaue
，
T.
，
Yow
，
I.
，
Pan
，
Y.
，
Le
，
A.P.
，
Lou
，
Y.
，
Loberas
，
M.
，
Shagirov
，
M.
，
Teng
，
X.
，
Prost
，
J.
，
Hiraiwa
，
T.
，
等
。（
2023
）。
不均一的机械转导决定了凋亡诱导的代偿性增殖的空间模式
。
《发育细胞》
58
，267
–
277
.e5
。
doi：
10.1016/j.devcel.2023.01.005
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
72.
↵
Cavone
，
L.
，
McCann
，
T.
，
Drake
，
L.K.
，
Aguzzi
，
E.A.
，
Oprişoreanu
，
A.-M.
，
Pedersen
，
E.
，
Sandi
，
S.
，
Selvarajah
，
J.
，
Tsarouchas
，
T.M.
，
Wehner
，
D.
，
等
。（
2021
）。
独特的巨噬细胞亚群直接向祖细胞发出信号，促进斑马鱼脊髓中的再生性神经发生
。
《发育细胞》
56
，1617
–
1630
.e6
。
doi：
10.1016/j.devcel.2021.04.031
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
73.
↵
Fogarty
，
C.E.
，
Diwanji
，
N.
，
Lindblad
，
J.L.
，
Tare
，
M.
，
Amcheslavsky
，
A.
，
Makhijani
，
K.
，
Brückner
，
K.
，
Fan
，
Y.
，和
Bergmann
，
A
。（
2016
）。
细胞外活性氧通过果蝇巨噬细胞驱动凋亡诱导的增殖
。
Curr. Biol
。
26
，
575
–
584
。
doi：
10.1016/j.cub.2015.12.064
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
74.
↵
Mellén
，
M.A.
，de la Rosa
，
E.J.
，和
Boya
，
P.
（
2008
）。
自噬机制对于清除发育中视网膜神经上皮中的细胞尸体是必需的
。
Cell Death Differ
。
15
，
1279
–
1290
。
doi：
10.1038/cdd.2008.40
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
75.
↵
Wang
，
M.
，Du
，
L.
，Lee
，
A.C.
，Li
，
Y.
，Qin
，
H.
，和
He
，
J
。（
2020
）。
不同的谱系背景引导共同的促神经因子指定不同的视网膜细胞亚型
。
J. Cell Biol
。
219
，
e202003026
。
doi：
10.1083/jcb.202003026
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
76.
↵
Gibson
，
G.
，和
Dworkin
，
I
。（
2004
）。
揭示隐性遗传变异
。
Nat. Rev. Genet
。
5
，
681
–
690
。
doi：
10.1038/nrg1426
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
77.
Hayden
，
E.J.
，Ferrada
，
E.
，和
Wagner
，
A
。（
2011
）。
隐性遗传变异促进RNA酶的快速进化适应
。
Nature
474
，
92
–
95
。
doi：
10.1038/nature10083
。
OpenUrl
CrossRef
PubMed
Web of Science
78.
↵
Zheng
，
J.
，Payne
，
J.L.
，和
Wagner
，
A
。（
2019
）。
隐性遗传变异通过开放通往多样适应性峰的路径加速进化
。
Science
365
，
347
–
353
。
doi：
10.1126/science.aax1837
。
OpenUrl
Abstract
/
FREE
Full Text
79.
↵
Icha
，
J.
，Kunath
，
C.
，Rocha-Martins
，
M.
，和
Norden
，
C
。（
2016
）。
神经节细胞的独立迁移模式确保斑马鱼视网膜的正确分层
。
J. Cell Biol
。
215
，
259
–
275
。
doi：
10.1083/jcb.201604095
。
OpenUrl
Abstract
/
FREE
Full Text
80.
↵
Kay
，
J.N.
，Link
，
B.A.
，和
Baier
，
H
。（
2005
）。
ath5的交错细胞内在时序‑
该基因的表达是斑马鱼视网膜神经节细胞神经发生浪潮的基础。
《Development》132，2573–2585。doi: 10.1242/dev.01831。开放链接；摘要／免费全文
- Kimmel, C.B., Ballard, W.W., Kimmel, S.R., Ullmann, B., 和 Schilling, T.F.（1995）。斑马鱼胚胎发育阶段。《Developmental Dynamics》203，253–310。doi: 10.1002/aja.1002030302。开放链接；CrossRef；PubMed；Web of Science。
- Kwan, K.M., Fujimoto, E., Grabher, C., Mangum, B.D., Hardy, M.E., Campbell, D.S., Parant, J.M., Yost, H.J., Kanki, J.P., 和 Chien, C.-B.（2007）。Tol2kit：用于构建 Tol2 转座子转基因构建体的多位点 Gateway 试剂盒。《Developmental Dynamics》236，3088–3099。doi: 10.1002/dvdy.21343。开放链接；CrossRef；PubMed；Web of Science。
- Martinez-Morales, J.R., Rembold, M., Greger, K., Simpson, J.C., Brown, K.E., Quiring, R., Pepperkok, R., Martin-Bermudo, M.D., Himmelbauer, H., 和 Wittbrodt, J.（2009）。ojoplano 介导的基底部收缩是视杯形态发生所必需的。《Development》136，2165–2175。doi: 10.1242/dev.033563。开放链接；摘要／免费全文
- Villefranc, J.A., Amigo, J., 和 Lawson, N.D.（2007）。用于分析斑马鱼基因功能的 Gateway 兼容载体。《Developmental Dynamics》236，3077–3087。doi: 10.1002/dvdy.21354。开放链接；CrossRef；PubMed；Web of Science。
- Icha, J., Schmied, C., Sidhaye, J., Tomancak, P., Preibisch, S., 和 Norden, C.（2016）。使用光片荧光显微镜对斑马鱼眼发育进行成像。《Journal of Visualized Experiments（JoVE）》，53966。doi: 10.3791/53966。开放链接；CrossRef；PubMed。
- Soans, K.G., Ramos, A.P., Sidhaye, J., Krishna, A., Solomatina, A., Hoffmann, K.B., Schlüßler, R., Guck, J., …
Sbalzarini，I.F.，Modes，C.D.，等（2022）。视杯形成期间的集体细胞迁移表现出不断变化的细胞-基质相互作用，并与基质拓扑结构相关。《当代生物学》32，4817–4831.e9。doi：10.1016/j.cub.2022.09.034。
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Catarina Figueiredo、Greta Tellkamp、Caren Norden、Mauricio
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