能够在植物和大肠杆菌中实现高水平组成型基因表达的启动子的开发

内容形式：摘要译文

植物中遗传组分的功能验证通常需要分别将其克隆至植物和细菌表达载体中，这一过程既耗时又费力。本研究旨在通过开发可在两种宿主中驱动高水平组成型表达的植物—细菌双宿主启动子系统，简化这一流程。为此，研究人员将氯霉素乙酰转移酶启动子（PCAT）的两个变体——一种依赖细菌 σ 因子的启动子——整合至花椰菜花叶病毒 35S 启动子（P35S）中，并以潮霉素磷酸转移酶（HPT）-GFP 融合报告基因评估其性能。其中一个变体 PCAT1 可使大肠杆菌（DH5 和 BL21 (DE3)）获得潮霉素抗性，并在洋葱表皮细胞中维持与原始 P35S 相当的高水平表达。由 P35S 增强子与 PNOS 启动子构成的杂合系统也可使大肠杆菌获得潮霉素抗性，但其在洋葱细胞中诱导 GFP 信号的活性仍低于 P35S。PCAT1 仅 89 bp，且效率较高，可作为模块将常规植物载体改造为双宿主系统，从而加快基因功能表征并推动新型基因工具的开发。

关键词：双宿主启动子 · 组成型基因表达 · 植物基因表达 · 大肠杆菌表达 · 启动子工程 · 基因功能验证

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.17.725692v1?rss=1