组织培养人参不定根来源的外泌体样纳米囊泡的分离、提取及理化特性表征

内容形式：摘要译文

本研究旨在建立从人参不定根及其培养上清液中分离类外泌体纳米囊泡的方法，探究茉莉酸甲酯（MeJA）诱导对囊泡产量及组成的影响，并为人参来源类外泌体纳米囊泡的规模化生产提供实验依据。采用低速离心结合搅拌式超滤的方法，从人参不定根及其培养上清液中分离类外泌体纳米囊泡。利用透射电子显微镜（TEM）、纳米颗粒跟踪分析（NTA）、Zeta电位分析和Q-ToF LC-MS脂质组学对其理化性质进行表征。以200 M MeJA处理人参不定根，评价诱导前后囊泡颗粒浓度、总蛋白、总皂苷及miRNA表达的变化。采用石蜡切片荧光染色观察不定根组织中囊泡相关信号的分布。结果显示，从人参不定根及其培养上清液中均可分离获得具有典型双层膜结构的类外泌体纳米囊泡。囊泡粒径范围为77.333～171.733 nm，颗粒浓度范围为2.1E+8～7.6E+10 /mL。囊泡中含有甘油脂、磷脂和鞘脂等脂质成分。经200 M MeJA诱导后，囊泡颗粒浓度和总蛋白含量均有所增加；不定根来源囊泡中的总皂苷水平显著上调，且囊泡的miRNA表达模式发生改变。组织切片荧光观察显示，液泡标志物信号与膜性囊泡染料信号存在重叠。低速离心结合

超滤可有效制备人参来源的类外泌体纳米囊泡。MeJA 诱导可调节囊泡产量及活性成分，为此类囊泡的规模化工艺开发提供基础数据。

关键词：人参不定根 · 外泌体样纳米囊泡 · 纳米囊泡分离 · 理化特性表征 · 茉莉酸甲酯诱导 · 脂质组学

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.12.758673v1?rss=1