解析听觉神经祖细胞干性以实现大规模神经元筛选

内容形式：摘要译文

感音神经性听力损失可由感觉毛细胞、听觉神经元或其突触连接受损引起；听觉神经病变和耳蜗突触病变凸显了神经完整性对于听觉的重要性。哺乳动物耳蜗再生丢失的听觉神经元的能力有限。阐明维持耳蜗祖细胞扩增和神经发生能力的分子程序，有望促进神经元再生，并为听觉药物研发提供可持续的模型。我们此前已证实，WNT激活联合双重SMAD抑制（CHIR-DS）可支持小鼠听觉神经祖细胞（ANPGs）的规模化扩增及神经元分化。在本研究中，我们对与该诱导状态相关的转录、染色质和代谢变化进行了表征。RNA测序和ATAC测序显示，Id1和Id2表达降低，前神经元碱性螺旋-环-螺旋基序处的染色质可及性增加；与此同时，翻译、mTOR和葡萄糖代谢程序在转录水平上得到富集。与生长因子对照组相比，CHIR-DS处理的ANPGs在早期传代时糖酵解略有增强。然而，在长期扩增后，糖酵解和线粒体呼吸均显著增强。人胎儿ANPGs同样对CHIR-DS产生响应，表现为球体生长增加，并保持神经分化能力，从而为该体系超越小鼠系统的可行性提供了概念验证。最后，由干性诱导的ANPGs（siANs）产生的神经元支持384孔报告基因检测以及包含2,560种化合物的初步筛选，并筛选出若干候选神经突起生长增强剂。综上，这些研究结果验证了ANPG干性诱导的通路基础，表征了由此产生的分子和代谢状态，并证明了其在人类体系中的可行性以及一个

神经元筛选应用程序

关键词：听觉神经祖细胞 · 细胞干性 · 神经发生 · Wnt信号通路 · 双重SMAD抑制 · 高通量药物筛选

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.09.757611v1?rss=1