用于靶向基因组学的微生物细胞可逆固定

内容形式：摘要译文

基于系统发育或活性的微生物荧光标记结合荧光激活细胞分选（FACS），是一种从复杂群落中快速分离目标细胞、开展定向基因组学研究的有力方法。然而，由于标准的多聚甲醛或乙醇固定程序会妨碍核酸回收和/或样品的长期保存，该方法尚未得到广泛应用。在此，我们提出将二硫代双（琥珀酰亚胺基丙酸酯）（DSP）用作微生物细胞的可逆固定剂，从而实现荧光成像以及用于测序的DNA提取与扩增。DSP固定与广泛应用的荧光原位杂交（FISH）方法和生物正交非经典氨基酸标记兼容，并可应用于多种类型的样品；在这些应用中，其表现始终与多聚甲醛相当。此外，利用FISH-FACS从复杂样品中选择性分离单个或多个细菌细胞后，均获得了高质量基因组。因此，DSP是一种可兼用于微生物组成像与测序的固定剂，有助于改进定向微生物基因组学研究。

关键词：微生物可逆固定 · DSP固定剂 · 荧光原位杂交 · 荧光激活细胞分选 · 靶向基因组学 · 单细胞测序

原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.10.12.758561v1?rss=1