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神经元内氯离子浓度决定了GABA\(_A\)受体介导抑制的极性和强度。ClC-2是一种由超极化激活的氯离子通道，被认为有助于氯离子外排，但其对EGABA及神经元氯离子稳态的急性作用仍未得到充分阐明。在本研究中，我们采用选择性ClC-2抑制剂AK-42，检验急性抑制ClC-2如何影响器官型海马脑片培养物中的GABA能氯离子信号。我们结合对表达stCoChR的GABA能中间神经元进行靶向单个中间神经元光遗传激活，以及gramicidin穿孔膜片钳记录，测量光遗传诱发的抑制性突触后电流并计算EGABA；同时采用SuperClomeleon成像测量神经元内氯离子浓度。AK-42使EGABA去极化；当刺激在电压阶跃开始后2 s而非100 ms施加时，其作用更为显著。这种依赖于延迟时间的效应与以下情况一致：在持续时间较长的电压阶跃期间，电压依赖性和时间依赖性的ClC-2活性参与程度更高。AK-42还消除了通常在2 s刺激延迟下测得的更负的EGABA，并使超极化指令电位下的基线保持电流发生偏移，但未引起估算的静息膜电位发生可测量的变化。SuperClomeleon成像显示，在TTX存在时，AK-42提高了神经元内氯离子浓度，支持ClC-2参与基础性氯离子调节的观点。综上，这些研究结果表明，急性抑制ClC-2可使EGABA去极化、增加神经元内氯离子浓度，并改变GABA能氯离子信号的时间动态，表明ClC-2是突触性GABA能氯离子信号的急性调节因子。
神经元内细胞内氯离子浓度决定了GABA\(_A\)受体介导抑制的极性和强度。ClC-2是一种由超极化激活的氯离子通道，被认为有助于氯离子外排，但其对E\(_{GABA}\)及神经元氯离子稳态的即时作用尚未得到充分阐明。在本研究中，我们采用选择性ClC-2抑制剂AK-42，检验急性抑制ClC-2如何影响器官型海马脑片培养物中的GABA能氯离子信号。我们将表达stCoChR的GABA能中间神经元进行靶向单个中间神经元光遗传激活，并结合gramicidin穿孔膜片钳记录，测量光遗传诱发的抑制性突触后电流并计算E\(_{GABA}\)；同时，我们采用SuperClomeleon成像测量神经元内细胞内氯离子浓度。AK-42使E\(_{GABA}\)发生去极化；与电压阶跃开始后100 ms进行刺激相比，在2 s后进行刺激时，这一效应更为显著。这种依赖于延迟时间的效应与以下情况一致：在持续时间更长的电压阶跃过程中，具有电压和时间依赖性的ClC-2活性得到了更充分的参与。AK-42还消除了通常在2 s刺激延迟下测得的较为超极化的E\(_{GABA}\)，并改变了超极化钳制电位下的基线保持电流，但未引起估计静息膜电位的可测量变化。SuperClomeleon成像显示，在TTX存在时，AK-42提高了神经元内细胞内氯离子浓度，支持ClC-2参与基础性氯离子调节的观点。综上，这些发现表明，急性抑制ClC-2可使E\(_{GABA}\)发生去极化、增加神经元内细胞内氯离子浓度，并改变GABA能氯离子信号的时间动力学，从而确认ClC-2是突触性GABA能氯离子信号的即时调节因子。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.24.753897v1?rss=1
🏷️ ClC-2氯离子通道 神经元氯离子稳态 GABA能信号 EGABA去极化 海马脑片 穿孔膜片钳