新兴蜱传正内罗病毒的反向遗传学系统揭示了与蜱媒介中复制相关的Gn蛋白可非必需N端区域

近年来，在东亚与发热性疾病相关的、隶属于Sulina和Tamdy基因群的多种新发和再发蜱传正内罗病毒不断被发现。发热伴血小板减少综合征病毒（Yezo virus，YEZV）即为其中之一，其遗传特征不同于已得到充分表征的克里米亚—刚果出血热病毒。正内罗病毒糖蛋白（Gn和Gc）由单个糖蛋白前体（GPC）基因表达，并介导病毒与宿主细胞的相互作用；然而，YEZV糖蛋白的组织结构及功能在很大程度上仍未明确。为在感染背景下表征YEZV糖蛋白，我们建立了一套反向遗传学系统，可完全由克隆的cDNA拯救获得重组YEZV。重组野生型病毒在体外表现出与亲本分离株相当的生长特性，并在体内保持致病性。在哺乳动物细胞中产生的纯化病毒颗粒的蛋白质组学分析显示，GPC衍生产物的肽段覆盖始于第69位残基。因此，我们利用该反向遗传学系统考察了第69位残基上游GPC亚区段的功能重要性。缺失GPC第28至68位残基的突变体（rYEZV GPCΔ28–68）保留了预测的信号肽，并得以成功拯救，提示该亚区段对于产生感染性病毒并非必需。rYEZV GPCΔ28–68在哺乳动物细胞中的增殖水平与野生型病毒相当，并在小鼠模型中表现出相似的致病性。有趣的是，该突变体在蜱源ISE6细胞中以及体内蜱内达到的病毒滴度较低，这提示该N端亚区段可能有助于病毒在蜱体内复制。综上，这些发现证明，新建立的反向遗传学系统可用于解析YEZV糖蛋白在哺乳动物和蜱系统中的功能。

近年来，在东亚地区，与发热性疾病相关的、属于苏利纳（Sulina）和坦德（Tamdy）基因群的多种新发和再发蜱传正内罗病毒（orthonairovirus）相继被发现。Yezo病毒（YEZV）即为其中之一，其遗传特征不同于已得到充分表征的克里米亚-刚果出血热病毒。正内罗病毒糖蛋白（Gn和Gc）由单个糖蛋白前体（GPC）基因表达，并介导病毒与宿主细胞的相互作用；然而，YEZV糖蛋白的组织结构及功能在很大程度上仍未明确。为在感染背景下表征YEZV糖蛋白，我们建立了一套反向遗传学系统，能够完全基于克隆的互补DNA拯救获得重组YEZV。重组野生型病毒在体外表现出与亲本分离株相当的生长特性，并在体内保持致病性。对哺乳动物细胞中产生的纯化病毒颗粒进行蛋白质组学分析显示，GPC衍生产物的肽段覆盖始于第69位残基。因此，我们利用该反向遗传学系统，研究了GPC中第69位残基上游区域的功能重要性。成功拯救获得了一个缺失GPC第28至68位残基的突变体（rYEZV GPCΔ28-68）；该突变体保留了预测的信号肽，提示这一区域对于产生感染性病毒并非必需。rYEZV GPCΔ28-68在哺乳动物细胞中的增殖水平与野生型病毒相当，并在小鼠模型中表现出相似的致病性。有趣的是，该突变体在蜱源ISE6细胞中以及体内蜱内的病毒滴度较低，提示这一N端区域可能参与病毒在蜱体内的复制。综上，这些发现表明，新建立的反向遗传学系统可用于解析YEZV糖蛋白在哺乳动物和蜱类系统中的功能。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.28.755240v1?rss=1

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