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非小细胞肺癌（NSCLC）的诊断面临挑战，原因在于亟需可靠且无创的生物标志物。循环细胞游离微小RNA（ccf-miRNAs）是极具前景的候选标志物，但其在血液中的含量较低且序列较短，给检测带来了困难。本研究开发了一种新型纳米杂合荧光阵列，用于快速、灵敏地识别与NSCLC相关的ccf-miRNAs。该阵列由经poly(T)修饰、具有荧光信号的纳米聚苯乙烯微球组成，用于捕获目标miRNA；同时采用荧光团标记的序列特异性锁核酸（LNA）探针进行检测。该设计可与目标miRNA形成三明治结构。通过纳米细胞计量术和荧光显微镜分别评估其捕获能力和检测特异性。研究以血浆样本中的miR-16-5p和U6为检测对象，对该方法的选择性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示，经poly(T)修饰的微球能够高效捕获目标miRNA，LNA探针则可准确区分不同序列。该检测方法无需扩增即可直接检测血浆中的miR-16-5p和U6，并表现出较高的选择性、灵敏度和重复性。通过将纳米聚苯乙烯微球富集技术与序列特异性LNA探针相结合，该方法解决了ccf-miRNA检测中的主要难题，即其丰度低和序列长度短。鉴于ccf-miRNAs与NSCLC进展相关，该方法有望用于早期诊断、疾病监测以及治疗反应评估。poly(T)捕获层不依赖于特定靶标，仅需更换LNA探针即可针对新的miRNA进行校准，因此适用于临床环境中的多重检测。然而，在应用于常规临床实践之前，仍需开展进一步的临床前研究和临床研究。该纳米杂合荧光阵列为检测血浆中低丰度ccf-miRNAs提供了一种快速、可靠的方法。其令人鼓舞的性能和灵活的设计显示出其在NSCLC诊断与监测中的潜在应用价值，但仍有待进一步验证。
荧光球辅助纳米生物传感器用于检测非小细胞肺癌中的循环 microRNA | bioRxiv
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荧光球辅助纳米生物传感器用于检测非小细胞肺癌中的循环 microRNA
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Pradyumna Kumar Mishra
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Arpit Bhargava
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Pooja Ratre
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Vikas Gurjar
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Olga Goryacheva
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Rajnarayan Tiwari
，
Irina Yu Goryacheva
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.28.754875
Pradyumna Kumar Mishra 1 印度医学研究委员会环境卫生国家研究所；
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非小细胞肺癌（NSCLC）的诊断面临挑战，原因在于临床需要可靠且无创的生物标志物。循环细胞游离 microRNA（ccf-miRNA）是具有前景的候选标志物，但其在血液中的含量较低且序列较短，使检测变得复杂。本研究开发了一种新型纳米杂化荧光阵列，可实现对 NSCLC 相关 ccf-miRNA 的快速、高灵敏度识别。该阵列由用于捕获目标 miRNA 的聚（T）修饰荧光纳米聚苯乙烯微球，以及用于检测目标 miRNA 的荧光团标记、序列特异性锁核酸（LNA）探针组成。该设计与目标 miRNA 形成夹心结构。采用纳米细胞计量术和荧光显微镜对捕获效果及检测特异性进行了评估。研究以 miR-16-5p 和 U6 为检测对象，对该检测方法在血浆样本中的选择性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示，聚（T）修饰微球能够高效捕获目标 miRNA，而 LNA 探针能够准确区分不同序列。该检测方法无需扩增即可直接检测血浆中的 miR-16-5p 和 U6，并表现出较高的选择性、灵敏度和重复性。通过将纳米聚苯乙烯微球富集技术与序列特异性 LNA 探针相结合，该方法解决了 ccf-miRNA 检测中的主要难题，即其丰度低和序列长度短。鉴于 ccf-miRNA 与 NSCLC 的进展相关，该方法有望用于早期诊断、疾病监测及治疗反应评估。聚（T）捕获层不依赖于特定靶标，因此只需更换 LNA 探针即可方便地针对新的 miRNA 进行校准，使其适用于临床环境中的多重检测。然而，在应用于常规临床实践之前，仍需开展进一步的临床前研究和临床研究。该纳米杂化荧光阵列为检测血浆中低丰度 ccf-miRNA 提供了一种快速、可靠的方法。其令人鼓舞的性能和灵活的设计显示出其未来应用于 NSCLC 诊断与监测的潜力，但仍有待进一步验证。
利益冲突声明
基金资助信息声明
印度医学研究委员会环境卫生国家研究所，
https://ror.org/008bp5f48
，5/13/1/PKM/ICRC/2020/NCD-III
版权
本预印本的。
该预印本依据
CC-BY 4.0 国际许可协议
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发布于 2026 年 9 月 28 日。
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Olga Goryacheva
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，
Irina Yu Goryacheva
bioRxiv
2026.09.28.754875；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.28.754875
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Irina Yu Goryacheva
bioRxiv
2026.09.28.754875；
doi：
https://doi.org/10.64898/2026.09.28.754875
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.28.754875v1?rss=1
🏷️ 非小细胞肺癌 循环微RNA 纳米生物传感器 荧光微球 锁核酸探针 液体活检