绘制毒力相关蛋白质相互作用网络揭示新型隐球菌耐热性的调控因子

蛋白质–蛋白质相互作用（PPIs）影响病原微生物中的关键生物学过程，例如人类真菌病原体新型隐球菌（Cryptococcus neoformans）中的相关过程。真菌的耐热性和应激反应通路是关键的毒力决定因素，能够直接影响病原体的适应与存活以及感染过程。为建立新型隐球菌中蛋白质–蛋白质相互作用的全面基线，并通过探索这些相互作用推断未表征蛋白的功能作用，我们采用体积排阻色谱联用质谱技术，对该真菌的分泌蛋白质组和细胞蛋白质组进行了分析。结果显示，在24个分泌组组分和蛋白质组组分中，分别鉴定出216种和1699种独特蛋白。预测的分泌组网络包含与囊泡和毒力相关的预期蛋白，表明其在细胞外防御中发挥作用。相比之下，隐球菌蛋白质组揭示了具有明确真菌毒力功能的蛋白质之间的相互作用，这些蛋白参与蛋白质稳定性和耐热性调控，其中包括两个此前尚未表征的蛋白CNAG_00287和CNAG_05199，它们可能参与与热休克蛋白（HSP）形成复合物。基于序列和结构同源性，我们推测CNAG_00287是一种含有四肽重复序列的共伴侣蛋白，可调节Hsp70的活性，而CNAG_05199则发挥Hsp70的功能。我们验证了CNAG_00287在热相关应激中的耐热性作用：在37 ℃、营养受限的培养基中，缺失该蛋白会显著削弱真菌的生长能力。总体而言，本研究解析了新型隐球菌中与毒力相关的蛋白质–蛋白质相互作用，并揭示了支撑真菌致病性的新的耐热性分子调控因子。

蛋白质-蛋白质相互作用（PPIs）影响病原微生物中的关键生物学过程，例如人类真菌病原体新型隐球菌（Cryptococcus neoformans）中的相关过程。真菌的耐热性和应激反应通路是关键的毒力决定因素，直接影响病原体的适应与存活以及感染过程。为建立新型隐球菌中蛋白质-蛋白质相互作用的综合基线，并探索这些相互作用以推断未表征蛋白的功能作用，我们将尺寸排阻色谱与质谱联用，分析了该真菌的分泌组和细胞蛋白质组。结果显示，在24个分泌组和蛋白质组组分中，分别鉴定出216种和1699种独特蛋白质。预测的分泌组网络包含预期的囊泡相关蛋白和毒力相关蛋白，表明其可能参与胞外防御。隐球菌蛋白质组则揭示了在蛋白质稳定性和耐热性方面具有明确真菌毒力作用的蛋白质之间的相互作用，其中包括两个此前未表征的蛋白质CNAG_00287和CNAG_05199；这两种蛋白质可能参与与热激蛋白（HSP）形成复合物。基于序列和结构同源性，我们提出，CNAG_00287是一种含四肽重复序列的共伴侣蛋白，可调节Hsp70的活性，而CNAG_05199则发挥Hsp70的功能。我们验证了CNAG_00287在热相关应激中的耐热性作用：在37 ℃的营养受限培养基中，缺失该蛋白会显著削弱真菌的生长。综上，本研究厘清了新型隐球菌内与毒力相关的蛋白质-蛋白质相互作用，并揭示了支撑真菌致病性的耐热性新型分子调控因子。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.25.754343v1?rss=1

🏷️ 新型隐球菌 蛋白质–蛋白质相互作用 真菌毒力 耐热性 热休克蛋白 蛋白质组学