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小球藻(Chlorella sorokiniana)是一种具有重要工业价值的微藻,但其遗传操作仍受到转化效率低下的限制。尽管已有研究提出了若干相关障碍,但细胞内核酸酶活性的作用却鲜有关注。在本研究中,我们比较了转化难感受微藻(小球藻 Chlorella sorokiniana 和四尾栅藻 Tetradesmus obliquus)与转化能力较强微藻(海洋原甲藻 Phaeodactylum tricornutum、加氏微拟球藻 Microchloropsis gaditana 和海洋微拟球藻 Nannochloropsis oceanica)全细胞裂解物对外源双链DNA的降解情况。小球藻能够快速降解线性DNA和质粒DNA,而四尾栅藻表现出中等程度的降解活性。相比之下,在转化能力较强的物种中未观察到可检测的DNA降解现象。小球藻中的DNA降解在数分钟内即可发生,且两种转化难感受微藻中的核酸酶活性均可被EDTA和Zn²⁺抑制,这与金属离子依赖性内切核酸酶的特征一致。这些发现表明,细胞内核酸酶活性可能是影响转化过程中外源DNA稳定性的一个尚未得到充分研究的障碍,并为提高难转化微藻的遗传转化效率提供了潜在靶点。
Chlorella sorokiniana 是一种具有重要工业价值的微藻,但其遗传操作仍受到转化效率低下的限制。尽管已有研究提出了多种障碍因素,但细胞内核酸酶活性的作用却鲜有关注。在本研究中,我们比较了来自转化难处理微藻(Chlorella sorokiniana 和 Tetradesmus obliquus)以及易于转化微藻(Phaeodactylum tricornutum、Microchloropsis gaditana 和 Nannochloropsis oceanica)的全细胞裂解液对外源双链 DNA 的降解作用。C. sorokiniana 能够快速降解线性 DNA 和质粒 DNA,而 T. obliquus 则表现出中等程度的降解活性。相比之下,在易于转化的微藻物种中未观察到可检测的 DNA 降解现象。C. sorokiniana 中的 DNA 降解可在数分钟内发生,且两种转化难处理微藻中的核酸酶活性均受到 EDTA 和 Zn²⁺ 的抑制,这与金属离子依赖性内切核酸酶的特征一致。这些发现表明,细胞内核酸酶活性可能是外源 DNA 在转化过程中保持稳定性的一个尚未得到充分研究的障碍,并为提高转化难处理微藻的遗传转化效率提供了潜在靶点。
📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.23.753703v1?rss=1
🏷️ 微藻遗传转化 外源DNA降解 核酸酶活性 金属离子依赖性内切核酸酶 转化效率
来源出处
简短通讯:微藻细胞裂解液中外源DNA的差异性降解
https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.23.753703v1?rss=1