时间邻近蛋白质组学揭示ANP32A在复制叉推进和末端连接中的作用

酸性核磷蛋白32家族成员A（ANP32A）调控染色质和组蛋白稳态，但其对DNA复制与修复的作用尚不明确。采用时间分辨的AirID邻近标记结合非依赖数据采集质谱技术，研究发现，在羟基脲诱导的复制压力下，ANP32A邻近蛋白组发生了分阶段重塑。早期压力状态富集了包括FEN1、XRCC5/Ku80和XRCC6/Ku70在内的DNA复制与修复因子，而持续处理则使该网络转向检查点和细胞周期调控因子。正交邻近连接实验显示，ANP32A与FEN1的邻近关系持续存在，而ANP32A与XRCC5的邻近性呈短暂性增强。激光微辐照后，ANP32A被动态募集至γH2AX标记的损伤位点；羟基脲处理后，ANP32A与γH2AX的邻近性也有所增加。ANP32A缺失损害细胞增殖和G1/S期进程，并使复制叉速度中度下降。然而，ANP32A缺失并未促进停滞复制叉处新生链的降解，也未显著改变同源重组报告系统的活性。相比之下，ANP32A缺失降低了非同源末端连接报告系统的活性，这与其在应激诱导下与Ku蛋白的邻近关系相一致。这些发现表明，ANP32A是一种染色质相关因子，支持复制叉推进和末端连接，但对于停滞复制叉的保护并非必需，从而将ANP32A依赖的染色质调控与基因组维护联系起来。

酸性核磷蛋白32家族成员A（ANP32A）调控染色质和组蛋白稳态，但其对DNA复制与修复的贡献仍不明确。采用时间分辨的AirID邻近标记结合非依赖数据采集质谱分析，发现羟基脲诱导的复制压力期间，ANP32A邻近蛋白质组发生分阶段重塑。早期应激阶段富集了DNA复制与修复因子，包括FEN1、XRCC5/Ku80和XRCC6/Ku70；而随着处理时间延长，该网络则转向检查点及细胞周期调控因子。正交邻近连接实验显示，ANP32A与FEN1之间的邻近关系持续存在，而ANP32A与XRCC5之间的邻近关系则短暂增强。激光微辐照后，ANP32A被动态募集至由γH2AX标记的损伤位点；羟基脲处理后，ANP32A与γH2AX之间的邻近性也有所增强。ANP32A缺失会损害细胞增殖和G1/S期进程，并使复制叉速度中度降低。然而，ANP32A缺失并不会促进停滞复制叉处新生链的降解，也不会显著改变同源重组报告系统的活性。相较之下，ANP32A缺失降低了非同源末端连接报告系统的活性，这与其在应激诱导下与Ku蛋白产生邻近关系相一致。这些发现表明，ANP32A是一种与染色质相关的因子，支持复制叉推进和末端连接，但对于停滞复制叉的保护并非必需；该研究将ANP32A依赖的染色质调控与基因组维护联系起来。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.11.750924v1?rss=1

🏷️ ANP32A DNA复制叉推进 非同源末端连接 复制压力 邻近蛋白质组学