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透射电子显微镜（TEM）广泛用于观察植物细胞超微结构，但由于多糖含量丰富的细胞壁、大型液泡及复杂的膜系统会影响染色效果和结构保存，样品制备仍面临挑战。在此，我们建立了一种适用于植物样品的TEM制备方法，该方法基于改良的锇酸–硫代碳酰肼–锇酸（OTO）染色流程，并结合优化的洗涤、脱水和树脂浸透步骤。以番茄根和叶为材料，我们发现，与传统制备方法相比，优化后的方法能够获得更洁净的背景、更清晰的细胞边界，并更好地 պահպան存细胞形态。包括线粒体嵴、叶绿体基粒和基质片层、核膜及其他内膜系统结构在内的精细膜相关结构均得到了更清晰的分辨，同时染色相关沉淀和弥散性背景伪影也有所减少。该方法为植物组织的高对比度TEM成像以及植物细胞和细胞器的超微结构分析提供了一种实用方案。
植物适配型 OTO 染色可通过透射电子显微镜改善超微结构成像 | bioRxiv
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# 植物适配型 OTO 染色可通过透射电子显微镜改善超微结构成像
Huiping Yao， 查看 ORCID 资料 Xianhao Jin， Mengsi Sun， Haijing Cheng， Yuke Liao， Yantong Jiang， Huijuan Zhao， Hua Zhou
doi： https://doi.org/10.64898/2026.09.08.750243
Huiping Yao 1 植物与环境互作研究实验室，钱塘高等研究院，中国杭州 310024； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Xianhao Jin 2 细胞与发育生物学系，约翰·英尼斯中心，诺里奇研究园，诺里奇 NR4 7UH，英国； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者 Xianhao Jin 的 ORCID 记录
Mengsi Sun 3 植物与环境互作研究实验室，钱塘高等研究院，中国杭州 310024； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Haijing Cheng 4 园艺与景观学院，湖南农业大学，中国长沙 410128； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Yuke Liao 5 深圳湾实验室，广东省深圳市光明区 518055，中国 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Yantong Jiang 5 深圳湾实验室，广东省深圳市光明区 518055，中国 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Huijuan Zhao 5 深圳湾实验室，广东省深圳市光明区 518055，中国 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
Hua Zhou 1 植物与环境互作研究实验室，钱塘高等研究院，中国杭州 310024； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在本网站搜索该作者
通讯作者： hzhou{at}tias.ac.cn
## 摘要
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## 摘要
透射电子显微镜（TEM）广泛用于观察植物细胞超微结构，但由于富含多糖的细胞壁、大型液泡以及复杂的膜系统会影响染色效果和结构保存，样品制备仍然具有挑战性。在本研究中，我们开发了一种植物适配型 TEM 制样方法，该方法基于改良的四氧化锇–硫代碳酰肼–四氧化锇（OTO）染色流程，并结合优化的清洗、脱水和树脂浸透步骤。以番茄根和叶为材料，我们表明，与常规制样方法相比，优化后的方法能够获得更洁净的背景、更清晰的细胞边界以及更好的细胞形态保存效果。包括线粒体嵴、叶绿体基粒和基质片层、核膜及其他内膜系统结构在内的精细膜相关结构均得到更加清晰的分辨，同时染色相关沉淀和弥散性背景伪影也有所减少。该方法为植物组织的高对比度 TEM 成像以及植物细胞和细胞器的超微结构分析提供了一种实用方案。
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发布于 2026 年 9 月 11 日。
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植物适配型 OTO 染色可通过透射电子显微镜改善超微结构成像
Huiping Yao， Xianhao Jin， Mengsi Sun， Haijing Cheng， Yuke Liao， Yantong Jiang， Huijuan Zhao， Hua Zhou
bioRxiv 2026.09.08.750243； doi： https://doi.org/10.64898/2026.09.08.750243
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Huiping Yao， Xianhao Jin， Mengsi Sun， Haijing Cheng， Yuke Liao， Yantong Jiang， Huijuan Zhao， Hua Zhou
bioRxiv 2026.09.08.750243； doi： https://doi.org/10.64898/2026.09.08.750243
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.08.750243v1?rss=1
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