阴道毛滴虫N7 RNA帽甲基转移酶的表征及抑制剂发现

RNA帽形成对于真核生物基因表达至关重要，然而，在包括阴道毛滴虫（*Trichomonas vaginalis*）在内的许多真核寄生虫中，负责帽甲基化的酶仍缺乏充分表征。在本研究中，我们对来源于阴道毛滴虫的RNA鸟嘌呤-N7甲基转移酶（MTase）TvRNMT1和TvRNMT2进行了功能与结构表征。我们解析了TvRNMT1与S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）复合物的晶体结构，分辨率为1.6 Å，并进一步解析了其与抑制剂sinefungin和OBO101形成的复合物结构，从而明确了其活性位点的结构架构及配体识别特性。对SAH类似物的筛选鉴定出多种对这两个同源蛋白均具有亚微摩尔至低微摩尔活性的抑制剂。通过分子对接以及对加帽RNA结合模式的建模，我们进一步界定了TvRNMT1中的抑制剂结合区域和RNA结合区域，并鉴定出可能参与帽结构识别的关键残基。这些结果阐明了阴道毛滴虫RNA帽甲基转移酶配体识别的分子基础，并为靶向寄生虫RNA加帽过程建立了结构框架。

RNA加帽对于真核生物基因表达至关重要，然而，在包括阴道毛滴虫（*Trichomonas vaginalis*）在内的许多真核寄生虫中，负责帽结构甲基化的酶仍缺乏充分表征。在本研究中，我们对阴道毛滴虫来源的RNA鸟嘌呤-N7甲基转移酶（MTase）TvRNMT1和TvRNMT2进行了功能与结构表征。我们解析了1.6 Å分辨率下TvRNMT1与S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）复合物的晶体结构，并进一步解析了其与抑制剂sinefungin和OBO101形成的复合物结构，从而明确了其活性位点的构型及配体识别特性。对SAH类似物进行筛选后，鉴定出多种对这两个同源蛋白均具有亚微摩尔至低微摩尔活性的抑制剂。通过分子对接及加帽RNA结合建模，我们进一步 delineated 了TvRNMT1的抑制剂结合区域和RNA结合区域，并鉴定出可能参与帽结构识别的氨基酸残基。这些结果揭示了阴道毛滴虫RNA加帽甲基转移酶配体识别的分子基础，并为靶向寄生虫RNA加帽过程建立了结构框架。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.09.750033v1?rss=1

🏷️ 阴道毛滴虫 RNA帽甲基转移酶 晶体结构 酶抑制剂 RNA加帽 结构生物学