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噬斑实验是定量感染性病毒的金标准,但噬斑计数目前仍通常采用人工方式完成,使病毒滴度测定耗时、具有主观性,并且难以在不同分析人员和实验室之间实现标准化。现有自动化方法主要针对单个任务,例如噬斑分割或计数,但无法提供从平板图像到生物学定量的集成工作流程。本文提出了 Titra,一种基于标准噬斑实验平板照片、用于自动开展细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)病毒滴度测定的端到端工作流程。该流程在单一的基于网络的平台中,集成了孔位自动检测、噬斑分割、用于实例分离的后处理、噬斑计数以及每毫升噬斑形成单位(plaque-forming units per millilitre,PFU/mL)估算,同时支持实验管理和专家复核。 该方法采用来自三种病毒(Mayaro 病毒、柯萨奇病毒 B3 型和痘苗病毒)、两种平板规格(6 孔和 12 孔)以及多种异质图像采集条件下的图像进行评估,其中包括一个新近整理的数据集和公开的 VACVPlaque 数据集。自动噬斑计数结果与人工标注高度一致(MAYV/CVB3 的 Pearson 相关系数为 0.98,VACV 为 0.88),而对于 MAYV/CVB3 数据集,PFU/mL 估算值与人工计算结果也高度吻合(Pearson r=0.975)。与 U-Net、StarDist、HSD-WBR 和 PyPlaque 的对比实验表明,该方法在分割和计数方面具有较强的竞争力,并且在公开的 VACVPlaque 数据集上取得了最高的 Dice 系数和平均精度均值(mAP)。
基于深度学习从实验室培养皿图像端到端完成蚀斑计数与病毒滴定 | bioRxiv
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Eugenia Moris,Alicia Costáble,Sebastián Rey,Irene Ferreiro,Joaquín Hurtado,Matías Villagrán,Lizandra Lissette Luciano,Aisha Espino Vázquez,Jomari Ramos,Isadora Monteiro,María Victoria de Santiago,Pilar Moreno,Gonzalo Moratorio,José Ignacio Orlando
DOI:
https://doi.org/10.64898/2026.09.04.749375
Eugenia Moris 1 Arionkoder;
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ORCID 记录:Eugenia Moris
通讯作者:
eugenia.moris{at}arionkoder.com
Alicia Costáble 2 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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Sebastián Rey 2 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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Irene Ferreiro 2 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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Joaquín Hurtado 3 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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Matías Villagrán 1 Arionkoder;
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Lizandra Lissette Luciano 4 Arionkoder 有限责任公司
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Aisha Espino Vázquez 4 Arionkoder 有限责任公司
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Jomari Ramos 4 Arionkoder 有限责任公司
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Isadora Monteiro 4 Arionkoder 有限责任公司
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María Victoria de Santiago 4 Arionkoder 有限责任公司
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Pilar Moreno 3 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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Gonzalo Moratorio 3 蒙得维的亚巴斯德研究所;
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蚀斑实验是定量感染性病毒的金标准,但蚀斑计数目前仍通常由人工完成,这使得病毒滴定过程劳动强度高、主观性强,并且难以在不同分析人员和实验室之间实现标准化。现有自动化方法主要针对蚀斑分割或计数等单项任务,尚不能提供从培养皿图像到生物学定量结果的完整一体化流程。本文提出了 Titra,这是一种基于标准蚀斑实验培养皿照片、用于自动化细胞病变效应(CPE)病毒滴定的端到端工作流程。该流程在单一基于 Web 的平台中整合了孔的自动检测、蚀斑分割、用于实例分离的后处理、蚀斑计数以及每毫升蚀斑形成单位(PFU/mL)估算,同时支持实验管理和专家审核。研究使用来自3种病毒(马亚罗病毒、柯萨奇病毒 B3 型和牛痘病毒)、2种培养板规格(6孔和12孔)以及异质性图像采集条件的图像对该方法进行了评估,其中包括一个新整理的数据集和公开的 VACVPlaque 数据集。自动蚀斑计数与人工标注结果表现出高度一致性(MAYV/CVB3 的 Pearson 相关系数为0.98,VACV 为0.88),而对于 MAYV/CVB3 数据集,PFU/mL 估算值与人工计算结果高度吻合(Pearson r=0.975)。与 U-Net、StarDist、HSD-WBR 和 PyPlaque 的比较实验表明,该方法在分割和计数性能方面具有竞争力;在公开的 VACVPlaque 数据集上,所提出的方法取得了最高的 Dice 系数和 mAP。
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发布于2026年9月8日。
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bioRxiv
2026.09.04.749375;
DOI:
https://doi.org/10.64898/2026.09.04.749375
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2026.09.04.749375;
DOI:
https://doi.org/10.64898/2026.09.04.749375
📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.04.749375v1?rss=1
🏷️ 深度学习 噬斑计数 病毒滴度测定 图像分割 计算生物学