用于体外测定肉毒神经毒素活性的BINACLE检测法协作研究

肉毒神经毒素（BoNT）A型和B型的肌肉松弛作用已广泛应用于临床医学和美容医学领域。尽管小鼠生物测定仍是评价药用BoNT制剂效价的金标准，但为遵循《欧洲联盟指令2010/63/EU》，采用非动物替代方法更为理想。结合与切割（Binding and Cleavage，BINACLE）测定基于毒素的受体结合特性和蛋白水解特性对BoNT活性进行测量，因而成为一种前景良好的替代方法。既往研究表明，该方法能够可靠且灵敏地测定活性。在本研究中，我们介绍了一项由十家国际实验室参与的协作研究，旨在表征BINACLE测定在药用BoNT产品效价检测中的适用性。结果表明，对于药用价值最为重要的BoNT/A，BINACLE测定能够实现具有良好重复性的相对效价测定，其变异性处于可接受范围内。对于BoNT/B，同样获得了可重复的相对效价计算结果；同时，相关数据也显示，通过进一步优化BoNT/B BINACLE测定方案，可进一步提升该方法的稳健性。总体而言，本研究证实了BINACLE测定作为一种可靠且灵敏的BoNT产品效价测定方法的实用性，从而进一步证明了其作为小鼠生物测定替代方法的适用性。

肉毒神经毒素（BoNT）A型和B型的肌肉松弛作用已广泛应用于临床医学和美容医学。尽管小鼠生物测定仍是评价药用BoNT制剂效价的金标准，但为符合欧洲指令2010/63/EU，采用非动物替代方法更为理想。结合与切割（Binding and Cleavage，BINACLE）测定法基于毒素的受体结合特性和蛋白水解特性对BoNT活性进行测量，是一种颇具前景的替代方法。既往研究表明，该方法能够可靠且灵敏地测定活性。在此，我们介绍一项由十家国际实验室参与的协作研究，旨在评价BINACLE测定法用于药用BoNT产品效价检测的适用性。结果表明，对于药用价值最为重要的BoNT/A血清型，BINACLE测定法能够实现具有良好重复性的相对效价测定，其变异性处于可接受范围内。研究还证实，该方法能够对BoNT/B进行重复性良好的相对效价计算；同时，相关数据也表明，通过进一步完善BoNT/B BINACLE操作方案，可进一步增强该方法的稳健性。总体而言，本研究证实了BINACLE测定法作为一种可靠且灵敏的BoNT产品效价测定方法的实用价值，从而进一步证明了其作为小鼠生物测定替代方法的适用性。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.09.01.748470v1?rss=1

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