鉴定出一种特异性结合C3b、不结合C3并阻断替代途径转化酶的纳米抗体

人补体系统是存在于血液及其他体液中的蛋白质网络，能够抵御入侵病原体，并参与维持机体稳态。补体级联反应中的一个核心步骤，是由转化酶将补体蛋白C3转化为C3b。C3被切割后，新生的C3b分子会发生大幅度构象变化，从而暴露新的表位。能够区分C3b与C3的分子，有望成为一种强有力的工具，用于选择性结合固定于细胞表面的补体激活产物，同时避免结合循环中的前体分子。在本研究中，我们利用经纯化C3b和表面结合型C3b免疫的美洲驼制备噬菌体文库，开发了C3b特异性纳米抗体。我们将UNbC3b-1描述为一种高亲和力结合分子，能够识别可溶性和表面结合型C3b分子，但不结合处于天然状态的C3。通过冷冻电子显微镜解析得到的4.2 Å分辨率UNbC3b-1:C3b复合物结构显示，UNbC3b-1结合于C3b的MG3、MG4和MG6结构域界面，其结合位点与补体受体免疫球蛋白（CRIg）的结合位点重叠。在功能上，我们证明UNbC3b-1能够抑制替代途径（AP）的补体活性，这可能是由于其阻止了底物C3与AP C3转化酶（C3bBb）之间的结合。总之，纳米抗体UNbC3b-1是一种具有重要价值的工具，可用于特异性结合C3b分子，并选择性抑制补体系统的AP转化酶。

人类补体系统是存在于血液及其他体液中的蛋白质网络，能够抵御入侵病原体，并参与维持机体稳态。补体级联反应中的一个核心步骤是由转化酶将补体蛋白C3转化为C3b。C3被裂解后，新生的C3b分子会发生大幅度的构象变化，从而暴露出新的表位。能够区分C3b与C3的分子可作为一种强有力的工具，用于选择性结合表面结合的补体活化产物，同时避免结合循环中的前体分子。在本研究中，我们使用经纯化C3b和表面结合C3b免疫的美洲驼制备噬菌体文库，开发了C3b特异性纳米抗体。我们将UNbC3b-1描述为一种高亲和力结合分子，能够识别可溶性及表面结合的C3b分子，但不结合天然状态下的C3。通过冷冻电子显微镜获得的分辨率为4.2 Å的UNbC3b-1:C3b复合物结构显示，UNbC3b-1结合于C3b的MG3、MG4和MG6结构域交界处，与补体受体免疫球蛋白（CRIg）的结合位点重叠。在功能方面，我们证明UNbC3b-1能够抑制替代途径（AP）中的补体活性，这可能是由于其阻止了底物C3与AP C3转化酶（C3bBb）之间的结合。总之，纳米抗体UNbC3b-1是一种有价值的工具，可用于特异性结合C3b分子，并选择性抑制补体系统中的AP转化酶。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.30.748118v1?rss=1

🏷️ 补体系统 C3b特异性纳米抗体 替代途径转化酶 冷冻电镜结构 补体抑制