Meso2EM：连接中尺度功能成像与靶向电子显微镜的跨尺度 CLEM 工作流程

Meso2EM是一种相关性光学与电子显微镜工作流程，可将从中尺度功能成像中选定的神经元转移至靶向电子显微镜分析。我们在清醒小鼠中记录了连续3 × 3 mm皮层视野内第2/3层神经元的Ca²⁺信号，并在固定和切向切片后重新识别出一个选定的神经元。凝集素标记的血管结构作为贯穿体内双光子成像、共聚焦显微镜、树脂包埋组织的实验室微型CT以及块表面扫描电子显微镜的共享标志，引导聚焦离子束扫描电子显微镜定位至目标细胞体。同样的渐进式靶向原则还支持对体内追踪的树突进行连续ATUM-SEM重建，以及对经膜片钳记录的马丁诺蒂细胞中光学选定的树突开展连续透射电子显微镜分析。因此，Meso2EM提供了一种实用途径，能够在样本尺度和状态发生较大变化的情况下保持目标身份，同时将电子显微镜采集限制在选定区域内。

Meso2EM是一种关联光学与电子显微镜的工作流程，可将从中尺度功能成像中选定的神经元转移至靶向电子显微镜分析。我们在清醒小鼠中，对连续的3 × 3 mm皮层视野内第2/3层神经元的Ca²⁺信号进行了记录，并在固定和切向切片后重新鉴定出其中一个选定神经元。凝集素标记的血管结构作为贯穿体内双光子成像、共聚焦显微镜、树脂包埋组织的实验室微型CT以及块面扫描电子显微镜的共同地标，引导聚焦离子束扫描电子显微镜定位至目标细胞体。同样的渐进式靶向原则还支持对体内追踪的树突进行连续ATUM-SEM重建，以及对经膜片钳记录的马丁诺蒂细胞中光学选定的树突开展连续透射电子显微镜分析。因此，Meso2EM为在样本尺度和状态发生大幅变化的情况下保持目标身份提供了一条切实可行的途径，同时将电子显微镜采集限制在选定区域内。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.25.746890v1?rss=1

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