使用 CarboTrace 480 检测小球藻 Chlorella sorokiniana 色素缺陷突变体中的原生质体化

不断增长的世界人口需要新的可持续营养来源，这使得小球藻（Chlorella sorokiniana）因其丰富的营养组成和可持续的培养方式而具有吸引力。借助CRISPR/Cas9等遗传优化工具，作为营养来源的微藻还可进一步改良。然而，在转化之前，通常有必要降解微藻坚硬的细胞壁，从而制备原生质体；但对于像C. sorokiniana这样的球形单细胞生物，使用明场显微镜监测原生质体发育具有挑战性。研究测试了Carbotrace 480和630作为C. sorokiniana突变体细胞壁的荧光标记物用于原生质体检测，其中Carbotrace 480成功用于区分细胞悬液中的原生质体与正常细胞。研究还以不同组合测试了Driselase、Glucanex、Snailase和Saczyme等酶以降解该突变体的细胞壁，其中Snailase效果最佳，可获得约60%的原生质体。本研究为监测微藻C. sorokiniana原生质体发育提供了一种快速简便的工具，这是利用CRISPR/Cas9等遗传优化工具提升C. sorokiniana作为可持续营养来源的第一步。

不断增长的世界人口需要新的可持续营养来源，这使得衣藻属小球藻（Chlorella sorokiniana）因其丰富的营养组成和可持续培养方式而备受关注。借助CRISPR/Cas9等遗传优化工具，作为营养来源的微藻还可进一步改良。然而，在转化之前，通常有必要降解微藻坚硬的细胞壁，从而制备原生质体；但对于像C. sorokiniana这样的球形单细胞生物，使用明场显微镜监测原生质体的形成过程具有挑战性。为检测原生质体，测试了Carbotrace 480和630作为C. sorokiniana突变株细胞壁的荧光标记物，其中Carbotrace 480被成功用于在细胞悬液中区分原生质体与正常细胞。进一步测试了Driselase、Glucanex、Snailase和Saczyme等酶在不同组合下对该突变株细胞壁的降解效果，其中Snailase最为有效，可获得约60%的原生质体。本研究为监测微藻C. sorokiniana原生质体形成提供了一种快速且简便的工具，这是利用CRISPR/Cas9等遗传优化工具提升C. sorokiniana作为可持续营养来源的第一步。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.27.747479v1?rss=1

🏷️ 小球藻 原生质体 细胞壁降解 荧光标记 CRISPR/Cas9