糖原合酶激酶-3β调节细胞朊蛋白水平

正常细胞朊蛋白（PrP^C）是所有类型朊病毒病中的关键底物，同时也是阿尔茨海默病中Aβ寡聚体的受体。然而，细胞如何调控PrP^C水平目前尚未被完全阐明。最近，我们在一项全基因组敲除筛选中鉴定出糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）可能是PrP^C水平的调控因子。在本文中，我们表明，通过siRNA介导的Gsk3b（而非Gsk3a）敲低，或通过CRISPR介导的Gsk3b敲除，均可降低细胞表面和细胞总PrP^C水平。全细胞质谱分析显示，与野生型细胞相比，在Gsk3b敲除细胞中，PrP^C是在检测到的7227种总蛋白中显著性下降程度排名第60的蛋白。两种不同的GSK-3抑制剂——laduviglusib（CHIR-99021）和AZD-1080——均可降低小鼠CAD5细胞和人BE(2)-C细胞中PrP^C的水平，且这种作用在未分化和已分化状态下均可观察到。在Gsk3b敲除细胞和WT细胞中，环己酰亚胺处理均以类似程度降低了PrP^C水平，这表明GSK-3β是通过翻译后机制调控PrP^C水平的。最后，使用laduviglusib或AZD-1080处理感染了三种不同啮齿类朊病毒毒株的CAD5细胞，均可降低PrP^Sc水平。总体而言，这些结果表明，GSK-3β活性控制活细胞中的PrP^C水平，揭示了一种新的调控机制和一个有前景的治疗靶点。

正常细胞型朊蛋白（PrP^C）是所有类型朊病毒疾病中的关键底物，也是阿尔茨海默病中Aβ寡聚体的受体。然而，细胞如何调控PrP^C水平尚未被完全阐明。近期，我们在一项全基因组敲除筛选中鉴定出糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）可能是PrP^C水平的调控因子。在本研究中，我们表明，无论通过siRNA介导的Gsk3b（而非Gsk3a）敲低，还是通过CRISPR介导的Gsk3b敲除，均可降低细胞表面和总PrP^C水平。全细胞质谱分析显示，与野生型细胞相比，在Gsk3b敲除细胞中，PrP^C是在检测到的7227种蛋白质中显著下调程度排名第60位的蛋白质。两种不同的GSK-3抑制剂——laduviglusib（CHIR-99021）和AZD-1080——均可降低小鼠CAD5细胞和人BE(2)-C细胞中PrP^C的水平，且这种作用在未分化和已分化状态下均可观察到。在Gsk3b敲除细胞和野生型细胞中，环己酰亚胺处理对PrP^C水平的降低作用相似，这表明GSK-3β是通过翻译后机制调控PrP^C水平的。最后，使用laduviglusib或AZD-1080处理感染了三种不同啮齿类朊病毒毒株的CAD5细胞，均可降低PrP^Sc水平。总体而言，这些结果揭示了GSK-3β活性能够调控活细胞中的PrP^C水平，提示了一种新的调控机制和有前景的治疗靶点。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.21.746199v1?rss=1

🏷️ 朊蛋白 GSK-3β 翻译后调控 朊病毒病 CRISPR敲除