抑制BET蛋白BD2结构域促进SPOP介导的染色质相关BRD4/BRD4-NUT降解：NUT癌的一种治疗脆弱性

BET溴结构域抑制剂可阻断BET家族溴结构域1和2（BD1、BD2）与染色质的结合，并已在NUT癌（NC）这一由BRD-NUT融合驱动的癌症中显示出临床活性，但由BD1抑制所致的毒性限制了其疗效。我们研究了对BRD4溴结构域2（BD2）的选择性抑制是否能够在降低毒性的同时保留抗肿瘤活性。NC细胞对新型BRD4-BD2抑制剂DC-9476及其他BD2选择性抑制剂表现出独特敏感性，这些抑制剂可诱导分化并导致生长停滞。CRISPR敲除筛选鉴定出以BRD4为靶标的E3连接酶SPOP为首要耐药命中基因。BD2抑制，而非BD1选择性抑制或泛BET抑制，可触发依赖于SPOP的BRD4和BRD4-NUT蛋白酶体降解；SPOP缺失可阻止这种降解，并在很大程度上挽救由BD2抑制剂诱导的分化和生长停滞。出乎意料的是，在BD2抑制过程中，BRD4和BRD4-NUT仍保持与染色质相关，而BD1或泛BET抑制则使其从染色质上解离。结合异位表达BRD4-NUT可使BRD4对降解更为敏感的证据，这些发现支持一种模型：BRD4-NUT巨结构域在BD2抑制时形成了由BRD4和BRD4-NUT组成的高密度、具备降解能力的SPOP底物池，而泛BET抑制则使该底物池分散，从而限制高效降解。在NC临床前模型中，BD2选择性抑制较泛BET抑制实现了更强的肿瘤生长抑制和更显著的生存获益，揭示了一种治疗脆弱性。

BET溴结构域抑制剂可阻断BET家族溴结构域1和2（BD1、BD2）与染色质的结合，并已在NUT癌（NC）这一由BRD-NUT融合驱动的癌症中显示出临床活性，但由BD1抑制所致的毒性限制了其疗效。我们研究了选择性抑制BRD4溴结构域2（BD2）是否能够在降低毒性的同时保留抗肿瘤活性。NC细胞对新型BRD4-BD2抑制剂DC-9476及其他BD2选择性抑制剂表现出独特敏感性，这些抑制剂可诱导分化并导致生长停滞。CRISPR敲除筛选鉴定出以BRD4为靶标的E3连接酶SPOP为首要耐药命中基因。BD2抑制，而非BD1选择性抑制或泛BET抑制，可触发依赖于SPOP的BRD4和BRD4-NUT蛋白酶体降解；SPOP缺失可阻止这种降解，并在很大程度上挽救BD2抑制剂诱导的分化和生长停滞。出人意料的是，在BD2抑制期间，BRD4和BRD4-NUT仍保持与染色质相关，而BD1抑制或泛BET抑制则会使其从染色质上解离。结合异位表达BRD4-NUT可使BRD4对降解更为敏感这一证据，这些发现支持如下模型：BRD4-NUT巨结构域在BD2抑制时形成了一个高密度、具备降解能力的SPOP底物库，其中包含BRD4和BRD4-NUT；而泛BET抑制则会使这一底物库分散，从而限制高效降解。在NC临床前模型中，BD2选择性抑制较泛BET抑制实现了更强的肿瘤生长抑制和生存获益，揭示出一种治疗脆弱性。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.14.744905v1?rss=1

🏷️ BET蛋白BD2抑制 BRD4-NUT融合 SPOP介导降解 NUT癌 染色质相关蛋白降解 CRISPR敲除筛选