卡亚萨努尔森林病病毒NS5甲基转移酶的结构学见解与抑制剂发现

卡萨努尔森林病病毒（Kyasanur Forest Disease Virus，KFDV）NS5甲基转移酶（methyltransferase，MTase）蛋白是一种关键酶，参与病毒RNA的帽结构甲基化、病毒复制以及免疫逃逸，因此是抗病毒研究和药物设计中值得重点关注的重要蛋白。 在本研究中，我们成功解析了KFDV NS5 MTase分别与SAH和GTP共结晶的三维晶体结构，其分辨率分别为2.2 Å和2.6 Å。在既往研究中，HC（Herbacetin）和CAPE（咖啡酸苯乙酯，Caffeic acid phenethyl ester）已显示出对SAM依赖性病毒MTase的抑制活性。为评估HC和CAPE对KFDV NS5 MTase的抑制潜力，我们采用等温滴定量热法（isothermal titration calorimetry，ITC）和色氨酸荧光光谱法（tryptophan fluorescence spectroscopy，TFS）验证蛋白与目标化合物之间的相互作用。MTase抑制实验采用毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）法进行。此外，荧光偏振（fluorescence polarisation，FP）实验进一步证实了CAPE和HC对RNA结合的抑制作用。综上，这些实验结果表明，HC和CAPE是KFDV NS5 MTase的有前景抑制剂，并有望作为先导化合物用于设计广谱抗正黄病毒属（Orthoflavivirus）药物。

卡萨努尔森林病病毒（Kyasanur Forest Disease Virus，KFDV）NS5甲基转移酶（methyltransferase，MTase）蛋白是一种关键酶，参与病毒RNA帽结构甲基化、病毒复制以及免疫逃逸，因此是抗病毒研究和药物设计中的重要靶蛋白。

在本研究中，我们成功解析了KFDV NS5 MTase分别与SAH和GTP共结晶的三维晶体结构，其分辨率分别为2.2 Å和2.6 Å。在既往研究中，HC（Herbacetin）和CAPE（咖啡酸苯乙酯，Caffeic acid phenethyl ester）已显示出对SAM依赖性病毒MTase的抑制活性。为评估HC和CAPE对KFDV NS5 MTase的抑制潜力，我们采用等温滴定量热法（ITC）和色氨酸荧光光谱法（TFS）验证了蛋白质与靶向化合物之间的相互作用。MTase抑制实验采用毛细管电泳（CE）法进行。此外，荧光偏振（FP）实验进一步证实了CAPE和HC对RNA结合的抑制作用。

综合上述实验结果表明，HC和CAPE是KFDV NS5 MTase的有前景抑制剂，并有望作为先导化合物用于设计广谱抗正黄病毒属（Orthoflavivirus）药物。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.14.744817v1?rss=1

🏷️ KFDV NS5甲基转移酶 晶体结构 抑制剂筛选 抗病毒药物