编码 NanoLuc 荧光素酶的猫杯状病毒作为评估抗体中和作用和抗病毒药物的工具

猫杯状病毒（feline calicivirus，FCV）是全球范围内感染猫最常见的病毒之一，其流行率估计为10%至90%，具体取决于所抽样的人群。典型的FCV感染表现为口腔溃疡和发热，在某些病例中还可导致肺炎或“跛行综合征”等临床症状。然而，已有一些FCV毒株从表现出高毒力全身性（virulent systemic，VS）疾病的猫中分离获得，该疾病与较高的发病率和死亡率相关。已在接种疫苗的猫中记录到突破性VS-FCV感染，因此，人们对开发可用于应对VS-FCV暴发的新型治疗药物具有相当浓厚的兴趣。 然而，要设计有效的治疗药物，需要建立一种易于操作的系统，以系统性评估新型疫苗候选物或抗病毒药物的有效性。在本研究中，我们利用反向遗传学构建了一种FCV报告病毒，将NanoLuc荧光素酶插入FCV-Urbana（FCV-UrbanaNL）的LC蛋白中。我们表征了FCV-UrbanaNL相较于其亲本病毒的复制动力学，并评估了该报告基因在连续多代传代过程中的稳定性。随后，我们建立了病毒中和实验，以评估一系列可识别FCV Urbana的单克隆抗体。接着，我们通过将FCV Urbana的主要衣壳蛋白VP1分别替换为疫苗株F9和VS-FCV毒株NSW-E1的VP1，评估了中和作用的广谱性。最后，我们评估了FCVNL报告系统在筛选候选抗病毒化合物中的应用价值，并鉴定出GS-441524（母体核苷类药物瑞德西韦的活性代谢物）具有抗FCV的治疗潜力。这些发现凸显了该报告病毒作为一种强有力的分子工具，在加速新型治疗药物发现与开发方面所具有的潜力。

猫杯状病毒（FCV）是全球范围内感染猫最常见的病毒之一，其流行率估计为10–90%，具体取决于所采样的种群。典型的FCV感染表现为口腔溃疡和发热，在某些情况下还可导致肺炎或“跛行综合征”等临床症状。然而，一些FCV毒株是从表现出高毒力系统性（VS）疾病的猫中分离得到的，而该类疾病与较高的发病率和死亡率相关。已在接种疫苗的猫中记录到突破性VS-FCV感染，因此，人们对开发可用于应对VS-FCV暴发的新型治疗手段具有相当大的兴趣。然而，为了设计有效的治疗策略，需要建立一种可操作的系统，以系统性评估新型疫苗候选物或抗病毒药物的效力。

在本研究中，我们利用反向遗传学构建了一种FCV报告病毒，将NanoLuc荧光素酶插入FCV-Urbana（FCV-UrbanaNL）的LC蛋白中。我们表征了FCV-UrbanaNL与其亲本病毒相比的复制动力学，并评估了该报告基因在连续多代传代过程中的稳定性。随后，我们建立了病毒中和实验，以评估一系列可识别FCV Urbana的单克隆抗体。接着，我们通过将FCV Urbana的主要衣壳蛋白VP1分别替换为疫苗株F9和VS-FCV毒株NSW-E1的VP1，评估了中和作用的广谱性。最后，我们评估了FCVNL报告系统在筛选候选抗病毒化合物方面的应用价值，并鉴定出GS-441524（母体核苷类药物瑞德西韦的活性代谢物）对FCV具有治疗潜力。这些发现凸显了该报告病毒作为一种强有力分子工具的潜力，可加速新型治疗手段的发现与开发。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.20.745972v1?rss=1

🏷️ 猫杯状病毒 报告病毒 NanoLuc荧光素酶 病毒中和实验 抗病毒药物筛选 反向遗传学