通过CRISPR-Cas9介导编辑和逆转录病毒转导原代小鼠初始CD8 T细胞实现T细胞受体（TCR）替换的标准化方法

CD8 T细胞在针对感染和癌症的免疫应答中发挥核心作用。然而，T细胞受体（TCR）特异性的多样性使得研究调控T细胞激活、分化和效应功能的机制具有挑战性。除TCR转基因小鼠模型外，人们还采用了多种复杂的基因组编辑方法来克服这一挑战。然而，这些策略通常在技术上要求较高、耗时较长，且难以推广应用。对于希望在其所选实验条件下检测新生TCR的研究人员而言，一种标准化且易于获得的方法将大有裨益。在此，我们描述了一种将基于核糖核蛋白（RNP）的CRISPR-Cas9编辑与逆转录病毒转导相结合的方案，以实现对小鼠CD8 T细胞的高效遗传操作。我们表明，通过该方案工程化的T细胞能够以足够规模制备，用于后续体外实验和体内过继转移实验。我们预计，该方法将有助于需要以标准化且易于实施的方式研究TCR特异性如何影响CD8 T细胞应答的研究人员。

CD8 T细胞在针对感染和癌症的免疫应答中发挥核心作用。然而，T细胞受体（TCR）特异性的多样性使得研究调控T细胞活化、分化和效应功能的机制面临挑战。除TCR转基因小鼠模型外，研究人员还采用了多种复杂的基因组编辑方法来克服这一挑战。然而，这些策略通常在技术上要求较高、耗时较长，且难以推广应用。对于希望在其所选实验条件下检测新生TCR的研究者而言，一种标准化且易于获得的方法将大有裨益。在此，我们描述了一种将基于核糖核蛋白（RNP）的CRISPR-Cas9编辑与逆转录病毒转导相结合的方案，以实现对小鼠CD8 T细胞的高效遗传操作。我们表明，通过该方案工程化改造的T细胞能够以足够规模制备，用于后续体外检测和体内过继转移实验。我们预计，该方法将有助于需要以标准化且易于获得的方式研究TCR特异性如何影响CD8 T细胞应答的研究者。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.17.745264v1?rss=1

🏷️ CRISPR-Cas9编辑 T细胞受体替换 CD8 T细胞 逆转录病毒转导 原代小鼠T细胞