病毒驱动的邻近蛋白质组学鉴定p400为作用于入侵病毒基因组的限制因子

即刻早期病毒蛋白必须迅速对抗宿主针对进入病毒基因组的防御机制，然而介导这一过程的蛋白质相互作用网络仍未明晰。这一空白主要源于即刻早期蛋白在感染该阶段表达丰度较低，因而难以采用常规方法进行研究。本文提出一种病毒驱动的邻近蛋白组学框架，用于在真实感染情境中研究即刻早期阶段的病毒-宿主相互作用。等基因P2A对照病毒将miniTurbo生物素连接酶与待研究的病毒蛋白解除偶联，从而在匹配的感染背景下有效模拟诱饵丰度和背景变化。从感染最初数小时开始持续进行生物素标记，进一步放大了该阶段特有的瞬时、低丰度相互作用的检测信号。以腺病毒E1A枢纽蛋白为基准，我们回收了已知E1A相互作用蛋白中的大多数，并鉴定出150余个高置信度相互作用。将该策略应用于即刻早期阶段后，我们解析了E1A互作组，并鉴定p400染色质重塑复合体为其主要靶标。我们显示p400可与进入细胞的病毒基因组结合，抑制基因表达，并调控持续性感染。这些数据将p400鉴定为一种预置的宿主限制因子，并建立了一种可推广至其他即刻早期病毒蛋白的时间分辨邻近蛋白组学策略。

即刻早期病毒蛋白必须迅速抵消宿主针对入侵病毒基因组的防御，但介导这一过程的蛋白互作网络仍未明确。这一空白在很大程度上持续存在，是因为即刻早期蛋白在感染此阶段表达丰度较低，因而难以通过标准方法加以研究。在此，我们提出一种由病毒驱动的邻近蛋白质组学框架，用于在真实感染情境中研究即刻早期阶段的病毒-宿主互作。等基因的P2A对照病毒将miniTurbo生物素连接酶与所研究的病毒蛋白解除偶联，从而在匹配的感染背景下有效模拟诱饵蛋白丰度及背景变化。从感染最早数小时起持续进行生物素标记，可进一步放大该阶段典型的瞬时、低丰度互作的检测。以腺病毒E1A枢纽蛋白为基准，我们回收了已知E1A互作蛋白中的大多数，并鉴定出150余种高置信度互作。将该策略应用于即刻早期阶段后，我们解析了E1A互作组，并鉴定出p400染色质重塑复合体为其主要靶标。我们证明p400与进入细胞的病毒基因组相关联，抑制基因表达，并调控持续性感染。这些数据将p400鉴定为一种预置的宿主限制因子，并建立了一种可转移至其他即刻早期病毒蛋白的时间分辨邻近蛋白质组学策略。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.17.745356v1?rss=1

🏷️ 邻近蛋白质组学 病毒-宿主相互作用 腺病毒E1A p400复合体 宿主限制因子