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在含有活体哺乳动物细胞的生物样品中监测 pH 和细胞外酸化速率(ECA),可为细胞的糖酵解活性和生物能量状态提供有价值的信息。与 pH 电极相比,光化学 pH 传感器更具优势,因为它们能够对多个样品进行快速、无创的平行分析,并实现稳定的 pH 读数。 我们开发了新型荧光 pH 传感器,其基于疏水性可质子化的无金属卟啉 OEP 和 OEPK,并将其嵌入含有质子转移剂的增塑 PVC 基质中。这些 pH 传感器可在比率荧光强度检测模式和基于寿命的检测模式下,实现内参比、免校准操作。传感器的开发包括对指示染料及其光物理特性的优化、对不同质子转移剂的筛选以尽量降低传感器毒性、对质子化范围和 pKa 的调控,以及长期储存稳定性和响应时间的研究。 随后,将优化后的 pH 传感器涂层沉积于塑料基底(96 孔微孔板)上,并用于在标准实验室设备(多功能酶标仪和共聚焦 FLIM 显微镜)上实时监测培养癌细胞和三维球状体结构的细胞外酸化速率(ECAR)。这种针对生物样品使用而定制的先进 pH 传感器在细胞分析及相关应用中具有很高的应用潜力。
监测含有活哺乳动物细胞的生物样品中的pH和细胞外酸化速率(ECA)可为细胞的糖酵解活性和生物能状态提供有价值的信息。与pH电极相比,光化学pH传感器更具优势,因为它们能够对多个样品进行快速、无创的并行分析,并稳定读取pH值。我们开发了新型荧光pH传感器,其基于疏水性可质子化无金属卟啉OEP和OEPK,并嵌入含有质子转移剂的增塑PVC基质中。这些pH传感器可实现内参照、免校准操作,既可采用比率型强度检测模式,也可采用基于寿命的检测模式。传感器的开发包括:对指示染料及其光物理特性进行优化,筛选不同的质子转移剂以降低传感器毒性,调控质子化范围和pKa,研究长期储存稳定性以及响应时间。随后,将优化后的pH传感器涂层沉积于塑料基底(96孔微孔板)上,并在标准实验室设备(多标签板读数仪和共聚焦FLIM显微镜)上用于实时监测培养癌细胞及3D球体结构的细胞外酸化速率(ECAR)。这种针对生物样品应用而定制的先进pH传感器在细胞分析及相关应用中具有很高的潜力。
📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.04.742867v1?rss=1
🏷️ 荧光pH传感器 细胞外酸化率 细胞代谢分析 卟啉探针 微孔板检测
来源出处
用于细胞分析的新型固态光学 pH 传感器
https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.04.742867v1?rss=1