尼泊尔东部本土发酵食品 Kinema 中 Kinemakinase 溶栓活性的体外与计算评估

Kinema 是一种原产于尼泊尔和印度东喜马拉雅地区的传统发酵大豆食品。其发酵过程主要由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）介导，该菌可产生多种具有潜在治疗应用价值的生物活性化合物和酶。鉴于心血管疾病负担日益加重，以及溶栓治疗对高效纤溶剂的需求，本研究旨在从以白大豆制备的 kinema 中提取、部分纯化并评估 kinemakinase 的溶栓潜力。采用硫酸铵沉淀法对该酶进行部分纯化。通过体外人血凝块实验评估其溶栓活性，结果显示，三种不同稀释度的酶均表现出 66% 至 68% 的凝块溶解率，表明其具有显著的纤溶潜力。同时，还进行了计算机模拟分析，以研究该酶的结构和功能特征。从 UniProt 获取的三级结构采用 Robetta 服务器进行建模，并使用 GalaxyRefine 进行优化。利用 ClusPro 2.0 与纤维蛋白进行分子对接，并结合 iMODS 分子动力学模拟，证实了其具有良好的相互作用和结构稳定性，而二硫键工程进一步增强了蛋白质稳定性。研究结果表明，来源于 kinema 的 kinemakinase 有望成为一种具有前景的替代性溶栓剂，值得进一步开展生化特征鉴定和剂量优化研究。关键词：Kinema，Kinemakinase，溶栓活性，枯草芽孢杆菌，发酵

Kinema是一种原产于尼泊尔和印度东喜马拉雅地区的传统发酵大豆食品。发酵过程主要由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）介导，该菌可产生多种具有潜在治疗应用价值的生物活性化合物和酶。鉴于心血管疾病负担日益加重，以及溶栓治疗对有效纤溶剂的需求，本研究旨在从以白大豆制备的kinema中提取、部分纯化并评估kinemakinase的溶栓潜力。

采用硫酸铵沉淀法对该酶进行部分纯化。通过体外人血凝块实验评估其溶栓活性，结果显示，三种不同稀释度的酶均表现出66%至68%的凝块溶解率，表明其具有显著的纤溶潜力。此外，还进行了计算机模拟分析，以探究该酶的结构和功能特征。从UniProt获得的三级结构使用Robetta服务器进行建模，并通过GalaxyRefine进行优化。利用ClusPro 2.0与纤维蛋白进行分子对接，并采用iMODS进行分子动力学模拟，结果证实了其有利的相互作用和结构稳定性，而二硫键工程则进一步增强了蛋白质稳定性。

研究结果表明，来源于kinema的kinemakinase可能成为一种有前景的替代性溶栓剂，值得进一步开展生化表征和剂量优化研究。

关键词：Kinema，Kinemakinase，溶栓活性，枯草芽孢杆菌，发酵

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.11.744146v1?rss=1

🏷️ Kinema发酵食品 Kinemakinase 溶栓活性 枯草芽孢杆菌 纤维蛋白分子对接 蛋白稳定性