含有钙调节蛋白的细胞外囊泡抑制M2型巨噬细胞极化并减缓体内肿瘤进展

Regucalcin（RGN）在细胞生物学中发挥多种作用，凸显了其在生理和病理状态中的重要性。RGN表达较高的前列腺癌患者表现出显著更长的无病生存期。尽管RGN是一种细胞信号抑制因子，但其通过细胞间通讯在肿瘤微环境中介导肿瘤抑制的分子机制仍不清楚。本研究构建了稳定表达RGN或对照载体的PC3前列腺癌细胞系。采用差速超速离心法从这些细胞系中分离细胞外囊泡（EVs）。将分离得到的EVs处理小鼠巨噬细胞系J7441，并采用qRT-PCR和Western blot分析评估其对M2极化的影响。为评估EVs潜在的抗肿瘤效应，将PC3亲本细胞皮下注射至小鼠两处，随后向肿瘤内注射相应EVs，并监测肿瘤体积。获取的新鲜冷冻肿瘤组织进行CD206（M2巨噬细胞标志物）免疫荧光染色。结果显示，RGN可在来源于RGN表达细胞的EVs中检测到，且处理这些含RGN的EVs与体内外肿瘤生长减缓及M2巨噬细胞极化降低相关。此外，重组RGN蛋白可降低p-AKT1和p-ERK1/2水平。进一步地，含RGN EVs对M2巨噬细胞极化的抑制伴随着体外p-AKT1和p-ERK1/2水平下降。本研究描述了一种与EV相关的机制，可能有助于调控巨噬细胞极化，并提示含RGN的EVs值得作为癌症治疗候选策略进一步评估。未来研究仍需通过巨噬细胞耗竭或CD206敲低等方式进行因果验证，并在更多模型中加以评估。

Regucalcin（RGN）在细胞生物学中发挥多种作用，凸显了其在生理和病理条件下的重要性。RGN表达水平较高的前列腺癌患者显示出显著更长的无病生存期。尽管RGN是一种细胞信号抑制因子，但其通过细胞-细胞通讯在肿瘤微环境中介导肿瘤抑制的分子机制仍不明确。本研究构建了稳定表达RGN或对照载体的PC3前列腺癌细胞系。采用差速超速离心法从这些细胞系中分离细胞外囊泡（EVs）。将分离获得的EVs处理小鼠巨噬细胞系J7441，并通过qRT-PCR和Western blot分析评估其对M2极化的影响。为评估EVs的潜在抗肿瘤作用，将PC3亲本细胞每只小鼠皮下接种于两个部位，随后进行相应EVs的瘤内注射，并监测肿瘤体积。采集的新鲜冻存肿瘤组织进行了CD206（M2巨噬细胞标志物）的免疫荧光染色。结果显示，RGN存在于来源于RGN表达细胞的EVs中，且处理这些含RGN的EVs与体内外肿瘤生长减缓以及M2巨噬细胞极化降低相关。此外，重组RGN蛋白降低了p-AKT1和p-ERK1/2水平。而且，含RGN的EVs对M2巨噬细胞极化的抑制伴随着体外p-AKT1和p-ERK1/2的降低。本研究描述了一种与EVs相关的机制，可能有助于调控巨噬细胞极化，并提示含RGN的EVs值得作为癌症治疗候选策略进一步评估。未来研究仍需通过巨噬细胞耗竭或CD206敲低等方式进行因果验证，并在更多模型中加以评估。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.09.743746v1?rss=1

🏷️ 细胞外囊泡 钙调节蛋白RGN M2型巨噬细胞极化 肿瘤微环境 前列腺癌 AKT/ERK信号通路