线粒体信号传导：细胞色素c氧化酶合成一氧化氮及其氧敏感性受腺嘌呤核苷酸调节

亚硝酸盐可被多种含血红素和含钼蛋白还原为一氧化氮（NO），包括线粒体细胞色素c氧化酶（Cco）。这一活性被命名为Cco/NO，已被认为参与缺氧信号传导，但其调控机制及相对于其他NO生成系统的定量意义仍不明确。我们使用去污剂可溶化的酵母和小鼠脑线粒体进行研究，这些样品在1 mM亚硝酸盐以及抗坏血酸/TMPD/细胞色素c供电子系统条件下进行测定，考察腺嘌呤核苷酸对其调节作用。ADP和ATP对Cco/NO活性具有不同的调控效应，且ADP可使可测得的NO生成在所测试的整个氧浓度范围内持续存在，直至测定上限175 μM O2。核苷酸调控亦具有同工型依赖性：在无氧条件下，ATP轻度抑制含Va的Cco，但强烈刺激含Vb的Cco。按细胞色素aa3归一化后的速率表明，在这些底物驱动的测定条件下，亚硝酸盐还原酶具有多周转能力。缺氧转变后，细胞ADP/ATP比值及随后测得的Cco/NO活性均短暂升高。这些发现确立了Cco/NO催化能力受代谢状态和同工型依赖性门控的事实；但并未证明其对细胞内总NO的相对贡献，亦未证明其在完整、偶联线粒体中于生理性亚硝酸盐浓度下的运作。

亚硝酸盐可被多种含血红素和钼的蛋白质还原为一氧化氮（NO），其中包括线粒体细胞色素c氧化酶（Cco）。这一活性被称为Cco/NO，已被认为参与缺氧信号传导，但其调控机制及相对于其他NO生成系统的定量意义仍不明确。我们考察了腺苷核苷酸对其的调节作用，实验采用去垢剂溶解的酵母和小鼠脑线粒体，并提供1 mM亚硝酸盐及抗坏血酸/TMPD/细胞色素c电子供体体系。ADP和ATP对Cco/NO活性表现出差异性调节；ADP使可测得的NO生成在所测试的整个氧浓度范围内持续存在，直至检测上限175 μM O2。核苷酸调控还具有同工型依赖性：在无氧条件下，ATP轻度抑制含Va的Cco，但强烈刺激含Vb的Cco。按细胞色素aa3归一化的速率表明，在这些由底物驱动的测定条件下，亚硝酸盐还原酶具有多周转能力。在发生缺氧转变后，细胞ADP/ATP比值及随后测得的Cco/NO活性均短暂升高。这些结果确立了Cco/NO催化能力受代谢状态和同工型的门控调节；但并不能证明其对细胞内总NO的分数贡献，亦不能证明其在完整、偶联线粒体中于生理性亚硝酸盐浓度下的运作。

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🏷️ 线粒体信号传导 细胞色素c氧化酶 一氧化氮生成 腺嘌呤核苷酸调控 缺氧感应