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背景 杜氏肌营养不良症（DMD）心肌病的特征是进行性微管重塑、连接蛋白43（Cx43）失调以及室性心律失常。我们此前已证明，βIII-微管蛋白S172E磷酸模拟敲入可维持微管组织并减轻mdx小鼠的心脏病理改变。然而，采用具有临床相关性的基因递送策略是否能够再现这些保护作用，仍尚不清楚。 方法与结果 我们构建了一个心肌细胞特异性的9型腺相关病毒（AAV9）载体，在心肌肌钙蛋白T启动子驱动下表达磷酸模拟型βIII-微管蛋白（Tubb3-S172E），并将其递送至4–5月龄野生型和mdx小鼠体内。通过定量qPCR和免疫印迹证实了心脏中Tubb3-S172E的表达。在mdx小鼠中，AAV9介导的Tubb3-S172E表达显著减少了单核炎性细胞浸润，恢复了Cx43在闰盘处的定位，并减弱了异丙肾上腺素诱导的心律失常易感性。相比之下，心脏纤维化、Nav1.5蛋白表达以及峰值钠电流密度均未见显著改善。在健康心脏中过表达野生型βIII-微管蛋白会增加Cx43侧向化并提高心律失常易感性，这表明决定其保护功能的是βIII-微管蛋白的磷酸化状态，而非蛋白丰度。 结论 心肌细胞靶向递送磷酸模拟型βIII-微管蛋白可部分重现遗传性S172E敲入模型中观察到的保护作用。这些发现表明，βIII-微管蛋白Ser172磷酸化是微管依赖性电重构的关键调控因子，并支持将该通路的治疗性调控应用于杜氏肌营养不良症心肌病。
背景 杜氏肌营养不良症（DMD）心肌病的特征是进行性微管重塑、连接蛋白43（Cx43）失调以及室性心律失常。我们此前证实，{beta}III-微管蛋白S172E磷酸化模拟敲入可维持mdx小鼠的微管组织并减轻心脏病理改变。然而，采用具有临床相关性的基因递送策略是否能够重现这些保护作用，尚不清楚。
方法与结果 我们构建了一种心肌细胞特异性的腺相关病毒9型（AAV9）载体，在心肌肌钙蛋白T启动子驱动下表达磷酸化模拟{beta}III-微管蛋白（Tubb3-S172E），并将其递送至4–5月龄的野生型和mdx小鼠。通过定量qPCR和免疫印迹证实了心脏中Tubb3-S172E的表达。在mdx小鼠中，AAV9介导的Tubb3-S172E表达显著减少了单核炎性细胞浸润，恢复了Cx43在闰盘处的定位，并降低了异丙肾上腺素诱导的心律失常易感性。相比之下，心脏纤维化、Nav1.5蛋白表达以及钠电流峰值密度均未见显著改善。在健康心脏中过表达野生型{beta}III-微管蛋白会增加Cx43侧向化并提高心律失常易感性，这表明决定其保护功能的是{beta}III-微管蛋白的磷酸化状态，而非蛋白丰度。
结论 心肌细胞靶向递送磷酸化模拟{beta}III-微管蛋白，部分重现了遗传性S172E敲入模型中观察到的保护作用。这些发现表明，{beta}III-微管蛋白Ser172磷酸化是微管依赖性电重构的关键调控因素，并支持在杜氏肌营养不良症心肌病中对该通路进行治疗性调控。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.04.742904v1?rss=1
🏷️ 杜氏肌营养不良症 AAV9基因递送 βIII-微管蛋白 心律失常重构 连接蛋白43 心肌炎症