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背景：媒介虫媒病毒的白纹伊蚊（Aedes albopictus）对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性，已成为欧洲媒介控制项目面临的新兴威胁。已知有三种影响拟除虫菊酯靶标——电压门控钠通道——的击倒抗性（Kdr）突变可赋予抗性：V1016G、I1532T 和 F1534C。由于这些 Kdr 突变正在欧洲积极传播，因此对其进行监测对于抗性监测项目至关重要。然而，当前的 Kdr 基因分型方法劳动强度大且成本高，限制了其在大规模高通量监测中的应用。 方法学：本研究开发了新型数字液滴 PCR（ddPCR）TaqMan 检测方法，可对来自野外种群的混合蚊虫样本中的这些 Kdr 突变进行定量。通过使用已知基因型的蚊虫以及携带此前在野外尚未观察到的单倍型组合的合成 DNA 构建体，对这些检测方法的特异性进行了验证。通过比较混合蚊虫样本测得的 Kdr 频率与基于单个个体基因分型得出的频率，评估了这些检测方法的准确性。随后，在法国本土开展了一项试点监测研究，综合了溴氰菊酯生物测定、混合样本 Kdr 突变追踪以及媒介控制干预数据，并应用了这些检测方法。 结果：所开发的 ddPCR 检测方法表现出较高的准确性和特异性，混合样本与个体基因分型所得的 Kdr 突变频率一致。试点监测研究证实，在大多数法国种群中，Kdr V1016G 和 I1532T 突变的流行率较低，尽管某些种群对溴氰菊酯的敏感性表现出中度下降。溴氰菊酯喷洒强度与 Kdr I1532T 突变频率之间呈弱相关，而与溴氰菊酯敏感性之间未观察到相关性，这表明来自治疗性媒介控制活动的杀虫剂选择压力至多只是抗性形成的次要驱动因素。 结论：这些新型 ddPCR 检测方法为定量白纹伊蚊种群中 Kdr 突变频率提供了一种简便、经济且高通量的方法。将其应用于常规的全国性监测项目，将有助于加强新发抗性的检测，并为媒介控制策略提供依据，从而预防虫媒病毒性疾病传播。
背景：媒介虫媒病毒的白纹伊蚊（Aedes albopictus）对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性，正对欧洲的媒介控制项目构成新兴威胁。已知有3种影响拟除虫菊酯靶标——电压门控钠通道——的击倒抗性（Kdr）突变可赋予抗性：V1016G、I1532T和F1534C。由于这些Kdr突变正在欧洲积极传播，对其进行监测对于抗性监测项目至关重要。然而，当前的Kdr基因分型方法劳动密集且成本较高，限制了其在大规模高通量监测中的应用。
方法学：本研究开发了新型数字液滴PCR（ddPCR）TaqMan检测方法，可对来自野外种群的混合蚊虫样本中的这些Kdr突变进行定量。通过使用已知基因型的蚊虫以及携带此前在野外尚未观察到的单倍型组合的合成DNA构建体，对这些检测方法的特异性进行了验证。通过比较混合蚊虫样本测得的Kdr频率与个体基因分型所得频率，评估了这些检测方法的准确性。随后，这些检测方法被用于法国本土的一项试点监测研究，整合了溴氰菊酯生物测定、混合样本Kdr突变追踪以及媒介控制干预数据。
研究结果：所开发的ddPCR检测方法表现出较高的准确性和特异性，混合样本与个体基因分型所得的Kdr突变频率一致。该试点监测研究证实，在大多数法国种群中，Kdr V1016G和I1532T突变的流行率较低，尽管部分种群表现出对溴氰菊酯敏感性中度下降。溴氰菊酯喷洒强度与Kdr I1532T突变频率呈弱相关，而与对溴氰菊酯的敏感性未观察到相关性，这表明来自治疗性媒介控制活动的杀虫剂选择压力至多只是抗性形成的次要驱动因素。
结论：这些新型ddPCR检测方法为定量白纹伊蚊种群中Kdr突变频率提供了一种简便、经济且高通量的方法。将其应用于常规全国性监测项目，将有助于提升新发抗性的检出能力，并为媒介控制策略提供依据，从而预防虫媒病毒性疾病传播。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.06.743222v1?rss=1
🏷️ 白纹伊蚊 Kdr突变 ddPCR诊断 拟除虫菊酯抗性 高通量监测