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为探索利用 SYTO-9 等染料将 qPCR 系统适配于终点核酸定量,我们在 384 孔 qPCR 设备上对浓度范围为 0.75–200 ng/l 的 DNA 和 RNA 标准品系列稀释液进行了定量。采用标准 SYBR Green 设置可成功测量 SYTO-9 荧光。扣除空白后的相对 SYTO-9 信号与 DNA/RNA 浓度呈对数依赖关系(R² > 0.95)。在不同孵育时间、最高达 95°C 的温度条件以及光漂白影响下,测量结果均表现出很高的稳定性。所述方法为高通量 DNA/RNA 分离提供了一种有价值的质量控制选择,并可进一步适配于核酸之外的其他荧光定量分析。
为了探索将qPCR系统适配为使用SYTO-9等染料进行终点核酸定量的方法,我们在384孔qPCR设备上对浓度范围为0.75–200 ng/l的DNA和RNA标准品系列稀释液进行了定量。使用标准SYBR Green设置成功测定了SYTO-9荧光。扣除空白后的相对SYTO-9信号显示出对DNA/RNA浓度的对数依赖关系(R² > 0.95)。在不同孵育时间、最高达95°C的温度以及光漂白条件下,测量结果均表现出很高的稳定性。所述方法是高通量DNA/RNA分离质量控制的一种有价值的选择,并且可进一步适配于核酸之外的其他荧光定量分析。
📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.01.742208v1?rss=1
🏷️ qPCR仪器 荧光定量 核酸定量 SYTO-9染料 高通量检测 质量控制
来源出处
使用 qPCR 仪器进行高通量荧光法核酸定量
https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.08.01.742208v1?rss=1