缺血再灌注和酸中毒诱导小鼠脑中逆转座子去抑制

反转座子是通常通过表观遗传机制受到抑制的重复性DNA元件。在衰老和神经退行性疾病中，反转座子会发生异常激活并导致神经毒性。然而，缺血性卒中是否会诱导反转座子激活仍不清楚。在本研究中，我们考察了脑缺血是否会触发脑内反转座子失调。鉴于脑缺血会导致组织酸中毒，我们进一步检验了酸中毒是否促成这一反应。 我们对成年野生型小鼠实施45 min短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO），随后进行再灌注，并采用RT-qPCR检测同侧脑组织中反转座子LINE-1、IAP、ETn2和SINE B2的表达。逆转录病毒GAG蛋白的表达通过Western blotting进行检测。在体外实验中，我们将neuro-2a（N2A）细胞暴露于酸性细胞外pH条件（6.4或6.0），并分析反转座子转录本。 我们发现，缺血-再灌注在24 h时增加了同侧缺血性脑组织中IAPEz-gag和ETn2的表达；与梗死周边区相比，LINE-1 Orf1、IAPEz-gag和B2在梗死区脑组织中的诱导更为显著。Western blotting分析显示，GAG蛋白发生了动态变化：再灌注6 h时未检测到明显变化，而在24 h时前体Pr65和成熟衣壳p30产物的水平降低。在N2A细胞中，细胞外酸中毒诱导了LINE-1 Orf1、IAPEz-gag和B2转录本随时间依赖性的升高。这些发现表明，反转座子失调是缺血性脑损伤的一个分子特征，并为进一步研究其在卒中病理中的作用提供了框架。

反转座子是通常通过表观遗传机制受到抑制的重复性DNA元件。在衰老和神经退行性疾病中，会发生异常的反转座子激活，并导致神经毒性。然而，缺血性卒中是否会诱导反转座子激活仍不明确。在本研究中，我们探讨了脑缺血是否会触发脑内反转座子的失调。由于脑缺血会导致组织酸中毒，我们进一步考察了酸中毒是否促成这一反应。我们在成年野生型小鼠中实施了45 min短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO）并随后进行再灌注，然后采用RT-qPCR检测同侧脑组织中反转座子LINE-1、IAP、ETn2和SINE B2的表达。逆转录病毒GAG蛋白的表达通过Western blotting检测。在体外实验中，我们将neuro-2a（N2A）细胞暴露于酸性细胞外pH（6.4或6.0）条件下，并分析反转座子转录本。

我们发现，缺血-再灌注在24 h时增加了同侧缺血脑组织中IAPEz-gag和ETn2的表达，而在梗死区脑组织中，LINE-1 Orf1、IAPEz-gag和B2的诱导强于梗死周围区。Western blotting分析显示GAG蛋白发生动态变化：在再灌注6 h时未检测到明显变化，而在24 h时其前体Pr65和成熟衣壳产物p30水平均降低。在N2A细胞中，细胞外酸中毒诱导了LINE-1 Orf1、IAPEz-gag和B2转录本随时间依赖性的升高。这些发现表明，反转座子失调是缺血性脑损伤的一个分子特征，并为进一步研究其在卒中病理中的作用提供了框架。

📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.31.741803v1?rss=1

🏷️ 缺血再灌注 脑酸中毒 逆转座子去抑制 LINE-1 缺血性卒中