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背景 抗疟药物的疗效正受到耐药性发展的威胁。卢旺达既往已报告较高水平的耐药性，包括Pfk13基因中与青蒿素部分耐药相关的突变，这些突变可导致蒿甲醚-苯芴醇（AL）治疗后寄生虫清除延迟。因此，需要对耐药性分子标志进行持续监测。在此，我们报告了2018年于卢旺达采集样本中Pfcrt、Pfdhps和Pfdhfr基因的多态性。 方法 样本采自2018年开展的一项治疗疗效研究（TES）的三个研究点（Masaka、Rukara和Bugarama）。采用PCR对目标耐药基因进行扩增，并通过桑格测序对扩增产物进行测序。 结果 在10%的样本中发现了Pfcrt K76T突变，且仅见于Bugarama。对于Pfdhps，A437G、K540E和A581G突变分别在94%、94%和55%的样本中检出。对于Pfdhfr，N51I、S198N、C59R和I164L突变分别在99%、99%、88%和16%的样本中发现。最后一种突变仅在Masaka和Rukara检出。 结论 我们证实了该国对氯喹敏感性的缓慢且部分恢复。此前报告的所有Pfk13突变体均为Pfcrt野生型，因此可能是由AL选择所致。Pfdhps和Pfdhfr突变体（包括携带高度耐药性I164L突变的突变体）的流行率较高且仍在上升，尽管不存在药物压力。作为该国疟疾监测项目和耐药性缓解策略的一部分，必须密切监测AL及其他治疗方案的耐药性和疗效。
2018年卢旺达恶性疟原虫中氯喹和抗叶酸类药物耐药标记的流行率 | bioRxiv
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2018年卢旺达恶性疟原虫中氯喹和抗叶酸类药物耐药标记的流行率
Sara L. Cantoreggi，Aline Uwimana，Jean Damascene Niyonzima，Aimable Mbituyumuremyi，Christian Nsanzabana
doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.31.742040
Sara L. Cantoreggi 1 瑞士热带与公共卫生研究所； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在本站搜索该作者 Sara L. Cantoreggi 的 ORCID 记录
通讯作者： sara.cantoreggi{at}swisstph.ch
Aline Uwimana 2 卢旺达生物医学中心 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在本站搜索该作者
Jean Damascene Niyonzima 2 卢旺达生物医学中心 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在本站搜索该作者
Aimable Mbituyumuremyi 2 卢旺达生物医学中心 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在本站搜索该作者
Christian Nsanzabana 1 瑞士热带与公共卫生研究所； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在本站搜索该作者
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摘要
背景 抗疟药物的疗效受到耐药性产生的威胁。卢旺达过去曾报告较高水平的耐药性，包括Pfk13基因中与青蒿素部分耐药相关的突变，这些突变会导致蒿甲醚-苯芴醇（AL）治疗后寄生虫清除延迟。因此，有必要持续开展药物耐药标记的分子监测。在本研究中，我们报告了2018年在卢旺达采集样本中Pfcrt、Pfdhps和Pfdhfr基因的多态性。
方法 样本来自2018年开展的一项治疗疗效研究（TES）中的三个地点（Masaka、Rukara和Bugarama）。采用PCR对目标耐药基因进行特异性扩增，并通过桑格测序对扩增产物进行测序。
结果 在10%的样本中发现了Pfcrt K76T突变，且仅见于Bugarama。对于Pfdhps，分别在94%、94%和55%的样本中检测到A437G、K540E和A581G突变。对于Pfdhfr，分别在99%、99%、88%和16%的样本中发现N51I、S198N、C59R和I164L突变。后一种突变仅在Masaka和Rukara中检测到。
结论 我们证实了该国对氯喹敏感性的缓慢且部分恢复。此前报道的所有Pfk13突变体均为Pfcrt野生型，因此可能是由AL选择所致。Pfdhps和Pfdhfr突变体（包括带有高耐药性I164L突变的突变体）的流行率较高且仍在上升，尽管不存在药物压力。作为该国疟疾监测项目和耐药性缓解策略的一部分，必须密切监测AL及其他治疗方案的耐药性和疗效。
利益冲突声明 S.L.C.和C.N.曾为诺华公司提供基因分型服务。其他所有作者声明不存在竞争性利益。
已声明的资助信息 瑞士热带与公共卫生研究所， https://ror.org/03adhka07
版权 本预印本的。 本文依据CC-BY-NC-ND 4.0国际许可协议发布。
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发布于 2026年8月2日。
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Sara L. Cantoreggi，Aline Uwimana，Jean Damascene Niyonzima，Aimable Mbituyumuremyi，Christian Nsanzabana
bioRxiv 2026.07.31.742040； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.31.742040
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引文工具 2018年卢旺达恶性疟原虫中氯喹和抗叶酸类药物耐药标记的流行率
Sara L. Cantoreggi，Aline Uwimana，Jean Damascene Niyonzima，Aimable Mbituyumuremyi，Christian Nsanzabana
bioRxiv 2026.07.31.742040； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.31.742040
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.31.742040v1?rss=1
🏷️ 恶性疟原虫 抗疟药耐药 耐药分子标志 Pfcrt Pfdhfr/Pfdhps PCR与桑格测序