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冷冻电子叠层成像术是一种用于研究辐射敏感生物样品的新兴技术，源自四维透射电子显微镜（4D-STEM）。尽管叠层成像术对于抗辐射样品已实现超越传统透射电子显微镜极限的超高分辨率，但其在冷冻水合生物样品中的应用目前仍停留在亚纳米分辨率。本文通过结合混合像素探测器实现电子计数，克服了这一限制，并为近原子分辨率冷冻电子叠层成像奠定了关键技术基础。这种计数方法显著提升了会聚束电子衍射中弱信号的探测能力，使得在低于 1 e-/A^2 剂量下进行叠层重构成为可能。此外，我们发现束致运动在单次扫描过程中可被有效消除，这表明传统冷冻电镜的剂量分帧方法可能需要重新评估。通过展示其在低剂量和倾斜条件下均具有高对比度，并实现约 700 kDa 的 T20S 蛋白酶体 3.59 A 分辨率重构，我们证实了冷冻电子叠层成像术作为一种可行的通用成像模式，能够补充甚至超越传统相位衬度冷冻电镜方法。
电子计数使冷冻电子拼接成像能够实现近原子分辨率冷冻电子显微镜 | bioRxiv
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电子计数使冷冻电子拼接成像能够实现近原子分辨率冷冻电子显微镜
Shouqing Li， Bo Shen， Zhaoyi Yan， Junjiang Liu， Chenxi Tang， Zhao Wang， Zhi Deng， Xueming Li
doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.25.736262
Shouqing Li 1 清华大学生命科学学院，北京 100084，中国； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 保留所有权利。未经许可不得重复使用。
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发布于 2026 年 7 月 28 日。
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Shouqing Li， Bo Shen， Zhaoyi Yan， Junjiang Liu， Chenxi Tang， Zhao Wang， Zhi Deng， Xueming Li
bioRxiv 2026.07.25.736262； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.25.736262
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电子计数使冷冻电子拼接成像能够实现近原子分辨率冷冻电子显微镜
Shouqing Li， Bo Shen， Zhaoyi Yan， Junjiang Liu， Chenxi Tang， Zhao Wang， Zhi Deng， Xueming Li
bioRxiv 2026.07.25.736262； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.25.736262
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.25.736262v1?rss=1
🏷️ 冷冻电子显微镜 电子计数 叠层成像 近原子分辨率 蛋白酶体重构