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抗菌药物耐药性（AMR）构成了全球重大公共卫生威胁，其中质粒携带的 mcr 基因驱动了多黏菌素耐药性的产生，并暴露出在人类、动物和环境储库之间“One-Health”监测方面存在的关键缺口。最常见的变体 mcr-1 由于缺乏快速、经济且可现场部署的分子工具，在资源有限环境中的监测仍然困难。 在本研究中，我们开发了 C12amcr，这是一种集成式分子工具箱，将预扩增 PCR 与针对 mcr-1 保守区域的荧光 CRISPR-Cas12a 检测方法，以及定制的低成本、手持式 3D 打印便携荧光计相结合。在优化条件下，该检测方法实现了 630 个细胞/mL 的检出限。在添加了 mcr-1 阳性大肠杆菌的家禽粪便样本中，C12amcr 可检测低至 1,800 个细胞/mL。 在对 22 株来源于社区的大肠杆菌分离株进行检测时，该方法在 mcr-1 检测方面与二代测序结果一致性达到 100%，并且与采用肉汤微量稀释法进行的多黏菌素表型药敏试验结果也完全一致。配套的便携式荧光计表现出与实验室微孔板读数仪相当的性能，同时支持与便携式 PCR 平台兼容的完全去中心化工作流程。通过整合本地生产的分子试剂、简明易行的操作流程以及易于获取、适用于现场的荧光读取设备，C12amcr 克服了去中心化 AMR 监测中的关键障碍，并为资源有限环境中的“One-Health”监测提供了一种实用且可扩展的解决方案。
1 生物分子实验室，健康科学学院，秘鲁应用科学大学，秘鲁利马 15023。 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可协议 发布。
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发表于 2026 年 7 月 27 日。 下载 PDF 电子邮件
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Maryhory Vargas-Reyes ， Roberto Alcantara ， Carlos Herrera ， Mia Townsend ， Kiara Flores-Jimenes ， Carlos Raymundo ， Pohl Milon
bioRxiv 2026.07.24.740582； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740582
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用于去中心化 One-Health mcr-1 监测的便携式荧光平台 Maryhory Vargas-Reyes ， Roberto Alcantara ， Carlos Herrera ， Mia Townsend ， Kiara Flores-Jimenes ， Carlos Raymundo ， Pohl Milon
bioRxiv 2026.07.24.740582； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740582
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.24.740582v1?rss=1
🏷️ 抗菌药物耐药性 mcr-1 CRISPR-Cas12a检测 便携式荧光平台 一体化现场监测