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荧光显微镜越来越多地被用于测量分子组织在不同长度尺度上的特征，而在这些尺度上，标记、光物理特性和样品制备往往会主导定量精度。因此，亟需能够同时具备明确纳米尺度几何结构、类蛋白环境以及与生物成像兼容性的参考标准。在此，我们提出环状串联重复蛋白（circular tandem repeat protein, cTRP）作为可编程蛋白标准，用于基准测试亚10纳米荧光显微成像。 通过遗传密码子扩展和生物正交标记，我们构建了携带多达六个标记位点的紧凑型蛋白环。光开关指纹分析揭示了依赖几何结构的定位累积和闪烁动力学，表明短程荧光团相互作用可以作为可测量的基准参数进行评估。DNA-PAINT在单颗粒水平证实了可及的对接位点和预设的化合价。我们进一步建立了重组系链连接和遗传编码的膜展示方法，将这些标准扩展至细胞环境中。cTRP PicoRulers 同样与扩增显微镜兼容。综上，cTRP提供了一个模块化的蛋白质基础平台，可用于在纯化环境和细胞环境中评估分子尺度成像性能。
用于评测亚10纳米荧光显微镜的可编程蛋白质参考标准 | bioRxiv
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用于评测亚10纳米荧光显微镜的可编程蛋白质参考标准
查看 ORCID 个人资料 Made Budiarta， 查看 ORCID 个人资料 Dominic Helmerich， Marcel Streit， 查看 ORCID 个人资料 Marvin Jungblut， 查看 ORCID 个人资料 Soeren Doose， 查看 ORCID 个人资料 Philip Kollmannsberger， 查看 ORCID 个人资料 Markus Sauer， 查看 ORCID 个人资料 Gerti Beliu
doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.27.740971
Made Budiarta 1 维尔茨堡大学； 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY 4.0 国际许可协议 发布。
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发布于 2026 年 7 月 27 日。 下载 PDF 补充材料 电子邮件
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