一种基于高效液相色谱的快速方法,用于测定微生物中 NAD(P)(H) 和 NMN 氧化还原辅因子的浓度及其比值

由 root 提交于 周六, 07/25/2026 - 08:47
氧化还原辅因子是细胞生理过程中的关键组成部分,因为它们参与了大多数代谢通路,且其比值与细胞稳健性相关。然而,在细胞中测定其水平仍然是一项挑战。在此,我们描述了一种新方法,可利用与荧光检测器联用的高效液相色谱法(HPLC)快速测定 NAD(H)、NADP(H) 和烟酰胺单核苷酸(NMN)的水平及其氧化态/还原态比值。 通过对该方法进行全面表征,并将其与经典的碘代硝基四唑(INT)检测法进行基准比较,我们表明,该方法能够对细菌中的 NAD+、NADP+ 和 NMN 水平进行准确且可重复的测量。我们进一步证明,该方法可用于测定工程化大肠杆菌菌株中的胞内 NADH 和 NADPH 浓度以及烟酰胺核苷酸辅因子的比值,也可应用于其他细菌物种,如恶臭假单胞菌。

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一种基于 HPLC 的快速方法,用于测定微生物中 NAD(P)(H) 和 NMN 氧化还原辅因子的浓度及其比值

查看 ORCID 个人资料 Noor E van Wijk, 查看 ORCID 个人资料 Elisabeth C. M. van der Heijden, 查看 ORCID 个人资料 Javier M. Hernandez-Sancho, 查看 ORCID 个人资料 Daniel C Volke, 查看 ORCID 个人资料 Pablo I Nikel, 查看 ORCID 个人资料 Johan H van Heerden, 查看 ORCID 个人资料 Frank J Bruggeman, 查看 ORCID 个人资料 Nico J Claassens, 查看 ORCID 个人资料 Ruud A Weusthuis, 查看 ORCID 个人资料 Markus M.M. Bisschops

doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740514

Noor E van Wijk 1 瓦赫宁根大学; 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方,后者已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC 4.0 国际许可协议 公开提供。

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发布于 2026 年 7 月 24 日。

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Noor E van Wijk, Elisabeth C. M. van der Heijden, Javier M. Hernandez-Sancho, Daniel C Volke, Pablo I Nikel, Johan H van Heerden, Frank J Bruggeman, Nico J Claassens, Ruud A Weusthuis, Markus M.M. Bisschops

bioRxiv 2026.07.24.740514; doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740514

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Noor E van Wijk, Elisabeth C. M. van der Heijden, Javier M. Hernandez-Sancho, Daniel C Volke, Pablo I Nikel, Johan H van Heerden, Frank J Bruggeman, Nico J Claassens, Ruud A Weusthuis, Markus M.M. Bisschops

bioRxiv 2026.07.24.740514; doi: https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740514


📄 原文链接:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.24.740514v1?rss=1

🏷️ 高效液相色谱 氧化还原辅因子 NAD(P)(H)定量 NMN检测 微生物代谢