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摘要 金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）是一种重要的昆虫病原真菌，广泛用于农业害虫的生物防治，但其商业化应用受到宿主死亡速度相对较慢的限制。本研究旨在构建一种对昆虫角质层具有更强结合亲和力和更高蛋白酶活性的嵌合蛋白酶（cPr1A）。我们假设，更强的角质层结合能力将提高酶在角质层表面的局部浓度，从而增强对角质层的降解作用。为实现这一目标，将家蚕（Bombyx mori）的几丁质结合结构域（BmCBD）融合至来源于金龟子绿僵菌的Pr1A蛋白酶C末端。重组Pr1A和cPr1A在大肠杆菌（Escherichia coli）中表达，并通过Ni-NTA亲和层析进行纯化。以蓖麻蚕（Samia ricini）角质层粉末为底物，对结合能力和蛋白酶活性进行三次重复测定。结果以均值 ± SEM表示。 与野生型Pr1A相比，嵌合蛋白酶cPr1A对角质层的结合能力提高了28.9%（15.81 ± 1.97 vs. 12.27 ± 2.13 g结合蛋白/mg角质层粉末；p通过家蚕几丁质结合结构域的C端融合生物工程改造嵌合型金龟子绿僵菌 cPr1A 蛋白酶以增强结合能力和酶活性 | bioRxiv
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通过家蚕几丁质结合结构域的C端融合生物工程改造嵌合型金龟子绿僵菌 cPr1A 蛋白酶以增强结合能力和酶活性
Neha Maurya， Gurvinder Kaur Saini
doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740453
Neha Maurya 印度古瓦哈提印度理工学院，阿萨姆邦，印度 在 Google Scholar 上查找该作者 在 PubMed 上查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可协议提供。
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发布于 2026 年 7 月 24 日。
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通过家蚕几丁质结合结构域的C端融合生物工程改造嵌合型金龟子绿僵菌 cPr1A 蛋白酶以增强结合能力和酶活性
Neha Maurya， Gurvinder Kaur Saini bioRxiv 2026.07.24.740453； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740453
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Neha Maurya， Gurvinder Kaur Saini bioRxiv 2026.07.24.740453； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.24.740453
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.24.740453v1?rss=1
🏷️ 金龟子绿僵菌 Pr1A蛋白酶 几丁质结合结构域 蛋白质工程 昆虫角质层 生物防治