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腺相关病毒（AAV）载体被广泛用于基因递送，但转导效率不足可能需要较高的载体剂量。我们检验了未经修饰的线性聚乙烯吡咯烷酮（PVP）这一药用辅料，是否能够在不对载体或聚合物进行化学修饰的情况下改善AAV制剂。我们在体外HEK293、HeLa、MEF和CHO细胞中评估了PVP10、PVP40和PVP360；对筛选出的制剂进行了静脉递送测试，并对3% PVP40进行了视网膜下递送测试。 在体外实验中，1%–3% PVP提高了AAV8和AAV9介导的GFP在多种细胞系中的表达。PVP360在初始跨细胞实验中显示出广泛活性，而HEK293分子量筛选结果表明，PVP40和PVP360是活性最强的制剂。CHO细胞中观察到的显著倍数增加，主要反映了对照组较低的基线转导水平。高浓度PVP360会导致MTT吸光度下降，而PVP40保留了增强转导的活性，因此被选用于局部递送测试。在HeLa细胞的AAV-DJ实验中，MOI为1,000与MOI为100时的反应模式存在差异；在MOI 100条件下，GFP阳性面积增幅最大的是1.5% PVP10和1.5% PVP360。 静脉递送含PVP的AAV9并未稳定提高离体器官中的报告基因信号。相比之下，采用3% PVP40进行AAV-PHP.eB的视网膜下递送后，每只眼内平均计算的每个视网膜切片中DsRed阳性面积的均值增大了1.79倍（Welch’s t检验 p = 0.063；贝叶斯概率 Pr[{Delta} > 0] = 0.952）。这些发现支持进一步评估PVP40在局部视网膜下AAV递送中的应用。
腺相关病毒（AAV）载体被广泛用于基因递送，但转导效率不足可能需要较高的载体剂量。我们检验了未经修饰的线性聚乙烯吡咯烷酮（PVP）这一药用辅料，是否能够在不对载体或聚合物进行化学修饰的情况下改善AAV制剂。我们在体外HEK293、HeLa、MEF和CHO细胞中评估了PVP10、PVP40和PVP360；对筛选出的制剂进行了静脉递送测试，并对3% PVP40进行了视网膜下递送测试。在体外，1–3%的PVP可提高AAV8和AAV9介导的GFP表达，且这一效应见于多种细胞系。PVP360在初始跨细胞实验中表现出广泛活性，而HEK293分子量筛选则显示PVP40和PVP360是活性最高的制剂。在CHO细胞中观察到的显著倍数增加，主要反映了对照组较低的基线转导水平。高浓度PVP360会导致MTT吸光度下降，而PVP40保留了增强转导的活性，因此被选用于局部递送测试。在HeLa细胞的AAV-DJ实验中，MOI 1,000与MOI 100之间的响应模式有所不同；在MOI 100条件下，观察到GFP阳性面积增幅最大的是1.5% PVP10和1.5% PVP360。通过静脉递送AAV9并联合PVP处理，并未一致性地提高离体器官中的报告信号。相比之下，采用3% PVP40进行AAV-PHP.eB视网膜下递送，使每个眼内平均的每个视网膜切片DsRed阳性面积均值增大了1.79倍（Welch t检验，p = 0.063；贝叶斯Pr[Δ > 0] = 0.952）。这些发现支持进一步评估PVP40在AAV局部视网膜下递送中的应用。
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📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.21.739700v1?rss=1
🏷️ AAV载体 聚乙烯吡咯烷酮 基因递送 视网膜下递送 转导增强