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催泪因子是一种具有致泪特性的刺激性挥发物，在洋葱鳞茎被切开或切碎时产生。我们的目标是通过成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白9（CRISPR/Cas9）基因组编辑，获得催泪因子合酶（LFS）活性降低的洋葱植株。由初生根诱导形成的愈伤组织经携带CRISPR/Cas9、引导RNA、绿色荧光蛋白（GFP）和潮霉素抗性表达盒的根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）转化；筛选出表现出高频稳定GFP表达的愈伤组织系作为适于转化的“优良愈伤组织系”。切割扩增多态性序列（CAPS）、异源双链迁移率分析（HMA）和桑格测序证实LFS基因中引入了突变，并从经确认的LFS编辑愈伤组织系中再生出植株。LFS编辑植株叶片和鳞茎中的LFS酶活性低于对照植株，但LFS编辑植株表现出严重的生长异常且未能结籽，这可能是由于为维持优良愈伤组织系而进行的长期培养所致。本研究首次证明，能够实现对洋葱特定性状——LFS活性降低——的洋葱基因组编辑。所得结果为最终目标——培育无泪且具有更高健康功能性的洋葱——开辟了可行路径。
通过农杆菌介导的基因转移生成催泪因子合酶受抑制的洋葱（Allium cepa L.），用于CRISPR/Cas9基因组编辑 | bioRxiv
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通过农杆菌介导的基因转移生成催泪因子合酶受抑制的洋葱（Allium cepa L.），用于CRISPR/Cas9基因组编辑
查看 ORCID 个人资料 Shoya Tamaru ， Shinsuke Imai ， Satoshi Watanabe ， Tatsuya Ikegai ， Sachie Kondo ， 查看 ORCID 个人资料 Tomoko Igawa ， Takahiro Kamoi
doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.21.739049
Shoya Tamaru 1 House Foods Group Inc.； 在 Google Scholar 中查找该作者 在 PubMed 中查找该作者 在持有人为作者/资助方，其已授予 bioRxiv 永久展示该预印本的许可。 本文依据 CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可协议 提供。
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发布于 2026年7月22日。 下载 PDF 补充材料 电子邮件
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Shoya Tamaru ， Shinsuke Imai ， Satoshi Watanabe ， Tatsuya Ikegai ， Sachie Kondo ， Tomoko Igawa ， Takahiro Kamoi
bioRxiv 2026.07.21.739049； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.21.739049
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通过农杆菌介导的基因转移生成催泪因子合酶受抑制的洋葱（Allium cepa L.），用于CRISPR/Cas9基因组编辑
Shoya Tamaru ， Shinsuke Imai ， Satoshi Watanabe ， Tatsuya Ikegai ， Sachie Kondo ， Tomoko Igawa ， Takahiro Kamoi
bioRxiv 2026.07.21.739049； doi： https://doi.org/10.64898/2026.07.21.739049
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.07.21.739049v1?rss=1
🏷️ 洋葱 CRISPR/Cas9 农杆菌介导转化 催泪因子合酶 基因组编辑 愈伤组织培养